| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 引言 | 第10-28页 |
| 1.1 拉沙病毒与拉沙热 | 第10-13页 |
| 1.1.1 拉沙病毒的分类与分布 | 第10-11页 |
| 1.1.2 拉沙病毒的传播 | 第11-13页 |
| 1.2 拉沙病毒的生物学特征 | 第13-21页 |
| 1.2.1 拉沙病毒的结构 | 第13页 |
| 1.2.2 拉沙病毒的生活周期 | 第13-16页 |
| 1.2.3 拉沙病毒GPC的结构与功能 | 第16-21页 |
| 1.3 拉沙病毒的药物研究进展 | 第21-27页 |
| 1.3.1 拉沙病毒反向遗传学系统 | 第22-25页 |
| 1.3.2 拉沙病毒进入抑制剂 | 第25-26页 |
| 1.3.3 拉沙病毒复制和出芽抑制剂 | 第26-27页 |
| 1.4 本论文的主要研究内容和意义 | 第27-28页 |
| 第2章 LASV假型病毒和重组病毒的构建 | 第28-46页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 实验材料、仪器和方法 | 第28-40页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.2.3 重组型VSV病毒基因组的构建 | 第30-34页 |
| 2.2.4 从质粒拯救重组型VSV病毒 | 第34-35页 |
| 2.2.5 噬斑实验测定重组VSV病毒滴度 | 第35页 |
| 2.2.6 重组VSV病毒的一步生长曲线 | 第35页 |
| 2.2.7 丙酮法浓缩上清液病毒颗粒 | 第35-36页 |
| 2.2.8 Westernblot检测 | 第36-37页 |
| 2.2.9 假型VSV病毒的包装 | 第37-38页 |
| 2.2.10 LASVpv的荧光素酶活性检测 | 第38页 |
| 2.2.11 LASVpv的负染电镜检测 | 第38页 |
| 2.2.12 RT-qPCR检测VSV基因组含量 | 第38-40页 |
| 2.2.13 LASVpv上清液的拷贝数检测 | 第40页 |
| 2.3 实验结果 | 第40-44页 |
| 2.3.1 构建pVSVΔG-eGFP-GPC质粒 | 第40-41页 |
| 2.3.2 重组型VSV病毒的拯救 | 第41-42页 |
| 2.3.3 假型VSV病毒的拯救和包装 | 第42-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-46页 |
| 第3章 筛选FDA批准药物库鉴定拉沙病毒进入抑制剂 | 第46-73页 |
| 3.1 引言 | 第46页 |
| 3.2 实验材料、仪器和方法 | 第46-53页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第47页 |
| 3.2.3 高通量筛选实验体系参数计算 | 第47-48页 |
| 3.2.4 药物筛选实验 | 第48-49页 |
| 3.2.5 MTT法测定细胞活力 | 第49页 |
| 3.2.6 药物选择指数(SI)的计算 | 第49页 |
| 3.2.7 药物时间梯度处理实验 | 第49-50页 |
| 3.2.8 药物对病毒细胞吸附过程的影响 | 第50页 |
| 3.2.9 药物对LASVGPC介导的膜融合的影响 | 第50-51页 |
| 3.2.10 药物对病毒粒子的淬灭作用 | 第51页 |
| 3.2.11 病毒耐受药物的适应性突变筛选 | 第51-52页 |
| 3.2.12 适应性突变重组病毒的拯救 | 第52-53页 |
| 3.3 实验结果 | 第53-70页 |
| 3.3.1 高通量筛选体系的建立 | 第53-54页 |
| 3.3.2 高通量筛选结果 | 第54-57页 |
| 3.3.3 候选药物作用的机制探究 | 第57-63页 |
| 3.3.4 病毒对候选药物适应性突变株的筛选 | 第63-66页 |
| 3.3.5 候选药物的广谱抗病毒活性 | 第66-70页 |
| 3.4 讨论 | 第70-73页 |
| 参考文献 | 第73-85页 |
| 致谢 | 第85-87页 |
| 作者简历及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第87-88页 |
