| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 材料与方法 | 第16-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-21页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第16页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第16页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第16-18页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第18-19页 |
| 2.1.5 基因引物序列(上海生物工程有限公司设计合成) | 第19-20页 |
| 2.1.6 siRNA序列(上海吉玛制药技术有限公司合成) | 第20页 |
| 2.1.7 shRNA序列 | 第20页 |
| 2.1.8 实验设备 | 第20-21页 |
| 2.1.9 临床组织样本 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-32页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第21-22页 |
| 2.2.2 提取组织或细胞的RNA | 第22-23页 |
| 2.2.3 RNA定量 | 第23页 |
| 2.2.4 RNA逆转录成cDNA | 第23-24页 |
| 2.2.5 Real-TimePCR实验 | 第24页 |
| 2.2.6 提取组织或细胞的蛋白质 | 第24-25页 |
| 2.2.7 免疫印迹(Western Blot)实验 | 第25-26页 |
| 2.2.8 细胞生长曲线实验 | 第26页 |
| 2.2.9 细胞克隆形成实验 | 第26-27页 |
| 2.2.10 Transwell迁移实验 | 第27页 |
| 2.2.11 Transwell侵袭实验 | 第27-28页 |
| 2.2.12 染色质免疫共沉淀(ChIP)实验 | 第28-30页 |
| 2.2.13 裸鼠移植瘤模型的建立与观察 | 第30-31页 |
| 2.2.14 细胞周期实验 | 第31页 |
| 2.2.15 Oncomine数据库大数据分析 | 第31页 |
| 2.2.16 统计学分析 | 第31-32页 |
| 结果 | 第32-48页 |
| 3.1 沉默G9A后抑制了CRC细胞的增殖 | 第32-37页 |
| 3.1.1 Oncomine数据库分析表明G9A在CRC组织表达水平比正常组织较高 | 第32-33页 |
| 3.1.2 实验证明CRC组织中G9A表达量比正常组织较高 | 第33页 |
| 3.1.3 siRNA和化学抑制剂较高效率沉默了G9A的表达 | 第33-35页 |
| 3.1.4 细胞生长曲线实验表明沉默G9A后抑制CRC细胞的增殖 | 第35页 |
| 3.1.5 沉默G9A后抑制了CRC细胞的克隆形成能力 | 第35-36页 |
| 3.1.6 沉默G9A后抑制了CRC细胞的迁移能力 | 第36-37页 |
| 3.1.7 沉默G9A后抑制了CRC细胞的侵袭能力 | 第37页 |
| 3.2 沉默G9A后抑制裸鼠皮下瘤模型肿瘤生长 | 第37-42页 |
| 3.2.1 建立G9A稳定低表达的CRC细胞株 | 第37-38页 |
| 3.2.2 G9A稳定低表达的CRC细胞株生长速度降低 | 第38页 |
| 3.2.3 G9A稳定低表达的CRC细胞株克隆能力降低 | 第38-39页 |
| 3.2.4 G9A稳定低表达的CRC细胞株迁移能力降低 | 第39页 |
| 3.2.5 G9A稳定低表达的CRC细胞株侵袭能力降低 | 第39-40页 |
| 3.2.6 沉默G9A后抑制了裸鼠CRC皮下移植瘤的生长 | 第40-42页 |
| 3.3 G9A通过对CRC细胞系的丝氨酸合成通路的调控作用调节CRC细胞的生长 | 第42-46页 |
| 3.3.1 沉默G9A后降低了CRC细胞系的丝氨酸合成通路相关酶的核酸水平的相对表达 | 第42-43页 |
| 3.3.2 沉默G9A后降低了CRC细胞系的丝氨酸合成通路相关酶的蛋白水平的相对表达 | 第43-44页 |
| 3.3.3 利用BIX01294抑制G9A后进一步确认G9A对CRC细胞系的丝氨酸合成通路的作用 | 第44-45页 |
| 3.3.4 G9A稳定低表达的细胞株的丝氨酸合成通路相关酶的表达同样受到抑制 | 第45-46页 |
| 3.4 G9A通过H3K9me1调控PSAT1引起细胞周期G1期阻滞调节CRC增殖 | 第46-48页 |
| 3.4.1 G9A通过H3K9me1亚型来调控PSAT1 | 第46-47页 |
| 3.4.2 沉默G9A使CRC细胞发生G1期阻滞 | 第47-48页 |
| 讨论 | 第48-52页 |
| 结论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 综述 | 第58-68页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第70-71页 |
