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miR-299-5p在胰岛β细胞中的作用研究

中文摘要第6-8页
Abstract第8-9页
前言第10-13页
材料与方法第13-44页
    1 实验材料第13-17页
        1.1 仪器设备第13-14页
        1.2 耗材第14-17页
        1.3 其他第17页
    2 实验方法第17-44页
        2.1 细胞培养及处理第17-19页
        2.2 胰岛分离和培养第19-21页
        2.3 RNA提取和相对定量分析第21-24页
        2.4 瞬时转染第24-25页
        2.5 TMT标记的定量蛋白质组学第25-29页
        2.6 细胞总蛋白质的提取及Western Blot检测第29-34页
        2.7 葡萄糖刺激的膜岛素分泌(Glucose stimulated insulin secretion,GSIS)功能和钾刺激的胰岛素分泌(Potassium stimulated insulin secretion,KSIS)功能实验和细胞内胰岛素含量抽提第34-35页
        2.8 CCK-8实验第35-36页
        2.9 Hoechst染色实验第36页
        2.10 DNA Ladder实验第36页
        2.11 胰岛免疫荧光和TUNEL实验第36-38页
        2.12 质粒构建第38-42页
        2.13 双荧光素酶报告基因实验第42-43页
        2.14 高脂喂养建立糖尿病模型及表型鉴定第43页
        2.15 统计学分析第43-44页
结果第44-66页
    1、糖脂毒性导致胰岛及β细胞miR-299-5p表达水平下降第44-46页
    2、定量蛋白质组学结果的验证与分析第46-50页
    3、miR-299-5p调节β细胞功能第50-53页
    4、干扰miR-299-5p导致β细胞凋亡第53-56页
    5、miR-299-5p靶基因的寻找与鉴定第56-61页
    6、干扰Perp可部分逆转干扰miR-299-5p对β细胞造成的功能损伤及凋亡第61-63页
    7、Perp参与糖脂毒性诱导的β细胞功能障碍及凋亡第63-66页
分析与讨论第66-73页
小结第73-74页
参考文献第74-91页
文献综述第91-113页
    参考文献第101-113页
附录第113-117页
    附录1 实时荧光定量PCR引物序列(5'-3')第113-114页
    附录2 克隆引物序列(5'-3')第114-115页
    附录3 缩略词表第115-117页
攻读学位期间发表文章情况第117-118页
致谢第118页

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