摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
第一章 研究背景和文献综述 | 第10-30页 |
第一节 肠炎性疾病的研究进展 | 第10-18页 |
1.1 结直肠癌现状 | 第10页 |
1.2 肠炎性疾病概述 | 第10-11页 |
1.3 炎性结直肠癌机理研究以及相关信号通路 | 第11-17页 |
1.4 总结与展望 | 第17-18页 |
第二节 Gpr35基因研究背景 | 第18-24页 |
2.1 Gpr35基因概述 | 第18-19页 |
2.2 Gpr35参与的信号通路 | 第19-20页 |
2.3 Gpr35基因的生物学功能 | 第20-22页 |
2.4.总结与展望 | 第22-24页 |
第三节 CRISPR/Cas9技术概述 | 第24-30页 |
3.1 CRISPR/Cas9的结构 | 第25-26页 |
3.2 CRISPR/Cas9技术的作用原理 | 第26-27页 |
3.3 各种不同功能的Cas9系统 | 第27-28页 |
3.4 CRISPR/Cas9技术的应用及展望 | 第28-30页 |
第二章 实验材料和方法 | 第30-45页 |
1 实验材料 | 第30-36页 |
1.1 实验动物 | 第30页 |
1.2 实验仪器 | 第30页 |
1.3 实验耗材 | 第30-31页 |
1.4 实验试剂和试剂盒 | 第31页 |
1.5 主要抗体 | 第31-32页 |
1.6 主要实验试剂配方 | 第32-36页 |
2 实验方法 | 第36-44页 |
2.1 组织总基因组DNA的提取 | 第36页 |
2.2 组织或细胞总RNA提取 | 第36-37页 |
2.3 RNA反转录cDNA | 第37页 |
2.4 实时定量PCR (Quantitative Realtime-PCR,Q-PCR) | 第37-38页 |
2.5 苏木精-伊红染色(HE染色) | 第38页 |
2.6 免疫组织化学染色 | 第38-40页 |
2.7 Western blot (WB) | 第40-42页 |
2.8 体外Cas9蛋白的转录 | 第42-43页 |
2.9 体外引导RNA的制备 | 第43-44页 |
2.10 引导RNA以及Cas9 mRNA的显微注射 | 第44页 |
3 主要软件与数据库 | 第44-45页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第45-68页 |
第一节 利用CRISPR/Cas9技术构建Gpr35基因敲除小鼠 | 第45-50页 |
1、引言 | 第45-46页 |
2、实验结果 | 第46-49页 |
3、小结与讨论 | 第49-50页 |
第二节 Gpr35基因敲除小鼠中肠功能和发育的组织学分析 | 第50-56页 |
1、引言 | 第50页 |
2、实验结果 | 第50-55页 |
3、小结与讨论 | 第55-56页 |
第三节 Gpr35基因敲除在小鼠肠炎疾病模型中的表型分析 | 第56-62页 |
1、引言 | 第56页 |
2、实验结果 | 第56-61页 |
3、小结与讨论 | 第61-62页 |
第四节 Gpr35基因在肠炎(IBD)中发挥作用的相关机制 | 第62-66页 |
1、引言 | 第62页 |
2、实验结果 | 第62-64页 |
3、小结与讨论 | 第64-66页 |
第五节 全文总结 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
附录 | 第73-74页 |
硕士在读期间参与的课题和发表的文章 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |