| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-46页 |
| 1.1 苹果蠹蛾简介 | 第17-24页 |
| 1.1.1 苹果蠹蛾的起源、分布和寄主 | 第17-18页 |
| 1.1.2 苹果蠹蛾的生物学特性 | 第18-19页 |
| 1.1.3 苹果蠹蛾的综合防治 | 第19-21页 |
| 1.1.4 苹果蠹蛾的抗药性 | 第21-24页 |
| 1.2 昆虫解毒酶研究进展 | 第24-35页 |
| 1.2.1 细胞色素 P450 酶系 | 第25-28页 |
| 1.2.2 谷胱甘肽-S-转移酶 | 第28-31页 |
| 1.2.3 酯酶与羧酸酯酶 | 第31-35页 |
| 1.3 有机磷和拟除虫菊酯杀虫剂 | 第35-38页 |
| 1.3.1 有机磷杀虫剂 | 第35-37页 |
| 1.3.2 拟除虫菊酯杀虫剂 | 第37-38页 |
| 1.4 分子模拟及其在抗性研究方面的应用 | 第38-40页 |
| 1.5 大肠杆菌表达系统 | 第40-42页 |
| 1.6 定点突变技术在昆虫学研究中的应用 | 第42-43页 |
| 1.7 丙氨酸扫描突变 | 第43页 |
| 1.8 研究设想 | 第43-46页 |
| 第二章 苹果蠹蛾的抗药性调查 | 第46-59页 |
| 2.1 材料和方法 | 第46-51页 |
| 2.1.1 材料 | 第46-47页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第47-51页 |
| 2.2 结果与分析 | 第51-56页 |
| 2.2.1 诊断剂量的确定 | 第51页 |
| 2.2.2 诊断剂量下的杀虫效果 | 第51-52页 |
| 2.2.3 酶活性测定结果 | 第52-53页 |
| 2.2.4 羧酸酯酶多态性分析 | 第53-54页 |
| 2.2.5 乙酰胆碱酯酶多态性分析 | 第54页 |
| 2.2.6 突变检测结果分析 | 第54-56页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第56-59页 |
| 2.3.1 小结 | 第56页 |
| 2.3.2 讨论 | 第56-59页 |
| 第三章 苹果蠹蛾细胞色素 P450 基因克隆及表达模式 | 第59-77页 |
| 3.1 材料和方法 | 第59-66页 |
| 3.1.1 材料 | 第59-60页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第60-66页 |
| 3.2 结果与分析 | 第66-75页 |
| 3.2.1 苹果蠹蛾 CYP9A61 序列分析 | 第66-68页 |
| 3.2.2 进化分析 | 第68-72页 |
| 3.2.3 杀虫剂诱导 CYP9A61 基因表达水平 | 第72-74页 |
| 3.2.4 CYP9A61 基因时空表达模式 | 第74页 |
| 3.2.5 杀虫剂诱导细胞色素 P450 氧化酶活性 | 第74-75页 |
| 3.3 小结与讨论 | 第75-77页 |
| 3.3.1 小结 | 第75页 |
| 3.3.2 讨论 | 第75-77页 |
| 第四章 苹果蠹蛾羧酸酯酶基因及 5′侧翼序列的克隆及表达模式 | 第77-97页 |
| 4.1 材料和方法 | 第77-84页 |
| 4.1.1 材料 | 第77页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第77-84页 |
| 4.2 结果与分析 | 第84-94页 |
| 4.2.1 苹果蠹 CpCE-1 序列分析 | 第84-87页 |
| 4.2.2 CpCE-1 基因 5′-侧翼序列分析 | 第87-88页 |
| 4.2.3 进化分析 | 第88-90页 |
| 4.2.4 绝对定量 PCR 标准曲线 | 第90-91页 |
| 4.2.5 杀虫剂诱导 CpCE-1 基因表达水平 | 第91-92页 |
| 4.2.6 CpCE-1 基因时空表达模式 | 第92页 |
| 4.2.7 杀虫剂诱导羧酸酯酶活性 | 第92-94页 |
| 4.3 小结与讨论 | 第94-97页 |
| 4.3.1 小结 | 第94页 |
| 4.3.2 讨论 | 第94-97页 |
| 第五章 苹果蠹蛾 CpCE-1 蛋白的表达及对杀虫剂的代谢功能 | 第97-123页 |
| 5.1 材料和方法 | 第97-105页 |
| 5.1.1 材料 | 第97-98页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第98-105页 |
| 5.2 结果与分析 | 第105-118页 |
| 5.2.0 表达载体的构建 | 第105页 |
| 5.2.1 蛋白最佳诱导表达条件 | 第105-107页 |
| 5.2.2 CpCE-1 蛋白纯化 | 第107-109页 |
| 5.2.3 CpCE-1 蛋白理化特性描述 | 第109-111页 |
| 5.2.4 杀虫剂对 CpCE-1 活性的影响 | 第111-113页 |
| 5.2.5 分子模拟 | 第113页 |
| 5.2.6 定点突变及抑制动力学 | 第113-116页 |
| 5.2.7 代谢实验 | 第116-118页 |
| 5.2.8 羧酸酯酶基因 CpCE-1 突变检测 | 第118页 |
| 5.3 小结与讨论 | 第118-123页 |
| 5.3.1 小结 | 第118-119页 |
| 5.3.2 讨论 | 第119-123页 |
| 第六章 苹果蠹蛾 CpGSTd1 蛋白的表达及对杀虫剂的代谢功能 | 第123-144页 |
| 6.1 材料和方法 | 第123-128页 |
| 6.1.1 材料 | 第123页 |
| 6.1.2 实验方法 | 第123-128页 |
| 6.2 结果与分析 | 第128-140页 |
| 6.2.1 苹果蠹蛾 CpGSTd1 序列和结构分析 | 第128-131页 |
| 6.2.2 CpGSTd1 蛋白表达及纯化 | 第131-132页 |
| 6.2.3 CpGSTd1 蛋白的酶动力学特性 | 第132-134页 |
| 6.2.4 杀虫剂对 CpGSTd1 酶活性的抑制 | 第134页 |
| 6.2.5 代谢实验 | 第134-135页 |
| 6.2.6 杀虫剂诱导 CpGSTd1 基因表达水平 | 第135-136页 |
| 6.2.7 CpGSTd1 基因时空表达模式 | 第136-137页 |
| 6.2.8 杀虫剂诱导 GST 活性 | 第137页 |
| 6.2.9 结合模式分析 | 第137页 |
| 6.2.11 结合自由能 | 第137-140页 |
| 6.3 小结与讨论 | 第140-144页 |
| 6.3.1 小结 | 第140页 |
| 6.3.2 讨论 | 第140-144页 |
| 第七章 结论与讨论 | 第144-148页 |
| 7.1 结论 | 第144-145页 |
| 7.2 讨论 | 第145-148页 |
| 参考文献 | 第148-163页 |
| 附录 | 第163-165页 |
| 1.苹果蠹蛾 Cpace1 基因 F399 片段核苷酸序列 | 第163页 |
| 2. 苹果蠹蛾 CpCE-1 基因 A121 片段核苷酸序列 | 第163页 |
| 3. 苹果蠹蛾 CpCE-1 基因 W233 片段核苷酸序列 | 第163-164页 |
| 4. α-萘酚标准曲线 | 第164页 |
| 5.对硝基苯酚标准曲线 | 第164-165页 |
| 缩略语 | 第165-166页 |
| 致谢 | 第166-167页 |
| 作者简介 | 第167-168页 |
