| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 绪论 | 第16-20页 |
| Part Ⅰ PDK1 调控血小板的活化和动脉血栓的形成 | 第20-77页 |
| 第一章 巨核细胞 PDK1 缺失引起血小板减少，抑制低浓度刺激剂引起的血小板活化，并延缓小鼠颈动脉血栓的形成 | 第20-33页 |
| 1.1 引言 | 第20-21页 |
| 1.2 材料与方法 | 第21-28页 |
| 1.2.1 实验动物 | 第21页 |
| 1.2.2 试剂与仪器 | 第21-22页 |
| 1.2.3 实验方法 | 第22-27页 |
| 1.2.4 数据处理及统计学分析 | 第27-28页 |
| 1.3 实验结果 | 第28-32页 |
| 1.3.1 构建巨核细胞特异 PDK1 缺失小鼠 | 第28页 |
| 1.3.2 巨核细胞/血小板特异缺失 PDK1 引起小鼠血小板减少症 | 第28-29页 |
| 1.3.3 PDK1 缺失显著抑制较低浓度 GPCRs 激动剂引起的血小板聚集 | 第29-31页 |
| 1.3.4 PDK1 调控动脉血栓形成 | 第31-32页 |
| 1.4 讨论 | 第32-33页 |
| 第二章 PDK1 磷酸化 Akt Thr308 位进而调控 Gsk3β Ser9 磷酸化参与血小板活化 | 第33-44页 |
| 2.1 引言 | 第33-34页 |
| 2.2 材料与方法 | 第34-37页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第34页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第34-37页 |
| 2.3 实验结果 | 第37-43页 |
| 2.3.1 PDK1 缺失不影响其下游可能靶蛋白的表达 | 第37页 |
| 2.3.2 在 GPCRs 激动剂 thrombin、ADP 和 U46619 作用下，PDK1 通过磷酸化Akt-Thr308 从而抑制 Gsk3β来调控血小板的活化 | 第37-39页 |
| 2.3.3 Gsk3β是 PI3K/Akt 信号通路的下游靶蛋白 | 第39-40页 |
| 2.3.4 Gsk3β抑制剂能够克服 PDK1 缺失对 Thrombin 引起血小板聚集的抑制作用，但 Gsk3β抑制剂却能够抑制 ADP 引起的血小板聚集 | 第40-42页 |
| 2.3.5 PDK1/Akt 还可以通过 NO/cGMP 通路来调控 PDK1 介导的血小板的活化 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-44页 |
| 第三章 Akt Ser473 位磷酸化不参与 thrombin 引起的血小板聚集和αⅡbβ3 介导的Outside-in 信号 | 第44-54页 |
| 3.1 引言 | 第44-46页 |
| 3.2 材料与方法 | 第46-48页 |
| 3.2.1 试剂与仪器 | 第46页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 3.3 实验结果 | 第48-52页 |
| 3.3.1 抑制 mTORC2 显著抑制 Akt Ser473 位磷酸化而对 Thr308 磷酸化无影响 | 第48-49页 |
| 3.3.2 抑制 Akt Ser473 位磷酸化不影响 Thrombin 引起的血小板聚集 | 第49-50页 |
| 3.3.3 PDK1 缺失而不是 mTORC2 抑制剂抑制血小板铺展 | 第50-51页 |
| 3.3.4 抑制 Akt Ser473 磷酸化不影响栓块收缩 | 第51-52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 PDK1 通过下游 Gsk3β调控整合素αⅡbβ3 outside-in 信号所介导的血小板铺展和栓块收缩 | 第54-67页 |
| 4.1 引言 | 第54-57页 |
| 4.2 材料与方法 | 第57-58页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第57页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第57-58页 |
| 4.3 实验结果 | 第58-65页 |
| 4.3.1 PDK1 不影响 Inside-out 信号引起的整合素αⅡbβ3 的活化 | 第58-59页 |
| 4.3.2 PDK1 通过整合素αⅡbβ3 介导的 Outside-in 信号调控血小板的活化 | 第59-60页 |
| 4.3.3 PDK1 和 Gsk3β是血小板在纤维蛋白原上铺展过程中的重要调控分子 | 第60-63页 |
| 4.3.4 PDK1 和 Gsk3β依赖于其上游分子 PI3K 来调控αⅡbβ3 介导 Outside-in 信号 | 第63-64页 |
| 4.3.5 PDK1 通过 Gsk3β调控栓块收缩过程 | 第64-65页 |
| 4.4 讨论 | 第65-67页 |
| 第五章 mTORC1 参与调控血小板的铺展而不影响栓块收缩 | 第67-74页 |
| 5.1 引言 | 第67-68页 |
| 5.2 材料与方法 | 第68-69页 |
| 5.2.1 试剂与仪器 | 第68-69页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第69页 |
| 5.3 实验结果 | 第69-72页 |
| 5.3.1 mTORC1 调控血小板的铺展 | 第69-70页 |
| 5.3.2 mTORC1 通过正反馈的方式调控 PDK1/Akt/Gsk3β通路介导的血小板铺展. | 第70-71页 |
| 5.3.3 mTORC1 不参与调控栓块收缩过程 | 第71-72页 |
| 5.4 讨论 | 第72-74页 |
| 第一部分总结与讨论 | 第74-77页 |
| Part Ⅱ 巨核细胞缺失 PTEN 引发滤泡淋巴瘤的机制研究 | 第77-130页 |
| 第一章 巨核细胞特异缺失 PTEN 小鼠发生滤泡型 B 淋巴瘤 | 第77-95页 |
| 1.1 引言 | 第77-78页 |
| 1.2 材料与方法 | 第78-85页 |
| 1.2.1 实验动物 | 第78-79页 |
| 1.2.2 试剂与仪器 | 第79页 |
| 1.2.3 实验方法 | 第79-85页 |
| 1.3 实验结果 | 第85-93页 |
| 1.3.1 巨核细胞特异缺失 PTEN 对巨核细胞分化的影响 | 第85-86页 |
| 1.3.2 巨核细胞缺失 PTEN 引发小鼠淋巴瘤 | 第86-87页 |
| 1.3.3 巨核细胞缺失 PTEN 引发小鼠 B 细胞淋巴瘤 | 第87-88页 |
| 1.3.4 巨核细胞缺失 PTEN 的特异性 | 第88-89页 |
| 1.3.5 核磁共振成像法（Magnetic resonance imaging, MRI）检测巨核细胞缺失 PTEN小鼠淋巴瘤发病进程 | 第89-90页 |
| 1.3.6 巨核细胞缺失 PTEN 小鼠发生滤泡淋巴瘤 | 第90-92页 |
| 1.3.7 滤泡淋巴瘤病人血小板中的 PTEN 表达水平普遍低于正常人 | 第92-93页 |
| 1.4 讨论 | 第93-95页 |
| 第二章 巨核细胞缺失 PTEN 引起滤泡淋巴瘤中 B 细胞异常始于骨髓 | 第95-106页 |
| 2.1 引言 | 第95-96页 |
| 2.2 材料与方法 | 第96-98页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第96页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第96-98页 |
| 2.3 实验结果 | 第98-105页 |
| 2.3.1 巨核细胞 PTEN 缺失小鼠淋巴结 B 细胞比例增加 | 第98-99页 |
| 2.3.2 巨核细胞 PTEN 缺失小鼠外周血中 B 细胞比例减少 | 第99-101页 |
| 2.3.3 巨核细胞 PTEN 缺失对小鼠脾脏中 B 细胞比例无影响 | 第101页 |
| 2.3.4 巨核细胞 PTEN 缺失小鼠骨髓中 B 细胞比例增加 | 第101-102页 |
| 2.3.5 巨核细胞 PTEN 缺失小鼠骨髓中 Pre-B, Pro-B 以及 immature B 细胞比例增加，成熟/再循环 B 细胞比例减少 | 第102-104页 |
| 2.3.6 巨核细胞 PTEN 缺失小鼠骨髓中 B 细胞具有正常分化能力 | 第104-105页 |
| 2.4 讨论 | 第105-106页 |
| 第三章 PTEN 缺失的巨核细胞释放细胞因子改变骨髓 B 细胞发育微环境可能是滤泡淋巴瘤发生诱因 | 第106-111页 |
| 3.1 引言 | 第106-107页 |
| 3.2 材料与方法 | 第107-108页 |
| 3.2.1 试剂与仪器 | 第107页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第107-108页 |
| 3.3 实验结果 | 第108-111页 |
| 3.3.1 Pten~(f/f)Pf4-Cre~+小鼠血小板的表达谱分析 | 第108-109页 |
| 3.3.2 Pten~(f/f)Pf4-Cre~+小鼠骨髓中 B 细胞的凋亡与增殖 | 第109-111页 |
| 3.4 讨论 | 第111页 |
| 第四章 巨核细胞 PTEN 缺失小鼠滤泡淋巴瘤的分子特征 | 第111-121页 |
| 4.1 引言 | 第111-112页 |
| 4.2 材料与方法 | 第112-114页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第112页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第112-114页 |
| 4.3 实验结果 | 第114-120页 |
| 4.3.1 巨核细胞 PTEN 缺失小鼠 B 细胞基因拷贝数的变异与累积 | 第114-116页 |
| 4.3.2 Pten~(f/f)Pf4-Cre~+小鼠淋巴瘤中 B 细胞的表达谱分析 | 第116-117页 |
| 4.3.3 Pten~(f/f)Pf4-Cre~+小鼠 B 细胞中 DNA 损伤的累积 | 第117-119页 |
| 4.3.4 Pten~(f/f)Pf4-Cre~+小鼠淋巴结中 B 细胞的凋亡受阻且增殖加快 | 第119-120页 |
| 4.4 讨论 | 第120-121页 |
| 第五章 巨核细胞 PTEN 缺失小鼠滤泡淋巴瘤的潜在治疗靶点 | 第121-130页 |
| 5.1 引言 | 第121-122页 |
| 5.2 材料与方法 | 第122-125页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第122页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第122-125页 |
| 5.3 实验结果 | 第125-129页 |
| 5.3.1 抑制巨核细胞 PI3K/Akt 通路过度活化可以作为治疗滤泡淋巴瘤的新靶点 | 第125-126页 |
| 5.3.2 巨核细胞/血小板特异缺失 PTEN 引起小鼠血浆中 IL12 水平上调 | 第126-129页 |
| 5.4 讨论 | 第129-130页 |
| 全文总结讨论与展望 | 第130-134页 |
| 参考文献 | 第134-144页 |
| 附录 | 第144-150页 |
| 附录 1 统计学分析各种激动剂作用下 Akt Ser473 磷酸化的相对强度 | 第144-145页 |
| 附录 2 Gsk3β正调控 collagen 诱导的血小板聚集 | 第145-146页 |
| 附录 3 SB与8-Br-cGMP分别对Thrombin诱导的PDK1缺失血小板聚集的修复程度的比较 | 第146页 |
| 附录 4 巨核细胞 PTEN 缺失小鼠的骨髓和淋巴结中 CD19+B 细胞比例 | 第146-147页 |
| 附录 5 Pten~(f/f)Pf4-Cre~+小鼠骨髓中的 Pro B/Pre B 和 immature B 以及 recirculating B 细胞亚群的生长曲线 | 第147-148页 |
| 附录 6 Pten~(f/f)Pf4-Cre~+小鼠骨髓中 B 细胞各亚群的增殖曲线（B220/CD19） | 第148-149页 |
| 附录 7 Pten~(f/f)Pf4-Cre~+小鼠骨髓中 B 细胞各亚群的生长曲线（B220/IgM/IgD） | 第149页 |
| 附录 8 Pten~(f/f)Pf4-Cre~+小鼠的 B 细胞中发生拷贝数变化的基因的代表图 | 第149-150页 |
| 致谢 | 第150-152页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及会议摘要 | 第152页 |
