| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-26页 |
| 1.1 伪狂犬病的研究进展 | 第13-20页 |
| 1.1.1 PRV的病原学 | 第13-14页 |
| 1.1.2 PRV的流行病学研究 | 第14-16页 |
| 1.1.3 PRV的分子生物学研究 | 第16-18页 |
| 1.1.4 PRV的致病机制 | 第18-20页 |
| 1.2 p53的研究进展 | 第20-25页 |
| 1.2.1 p53分子的简介 | 第20-21页 |
| 1.2.2 机体先天性免疫抗病毒因子及其与p53的联系 | 第21-23页 |
| 1.2.3 p53与病毒之间的关系 | 第23-25页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 PRV gB基因实时定量PCR检测方法的建立 | 第26-37页 |
| 2.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 病毒、感受态细胞 | 第26页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.1.4 相关试剂与培养基的配制 | 第26-27页 |
| 2.2 方法 | 第27-31页 |
| 2.2.1 gB基因质粒标准品的制备 | 第27-31页 |
| 2.2.2 gB基因荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第31页 |
| 2.3 结果 | 第31-35页 |
| 2.3.1 gB基因的PCR扩增结果 | 第31-32页 |
| 2.3.2 单克隆菌落PCR鉴定 | 第32-33页 |
| 2.3.3 阳性质粒送检测序比对结果 | 第33页 |
| 2.3.4 gB基因绝对荧光定量标准曲线的建立 | 第33-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.5 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 p53影响小鼠体内PRV复制及致病力的研究 | 第37-55页 |
| 3.1 材料 | 第37-39页 |
| 3.1.1 病毒、试验动物及细胞 | 第37页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第37-38页 |
| 3.1.4 相关试剂溶液及培养基的配制 | 第38-39页 |
| 3.2 方法 | 第39-45页 |
| 3.2.1 PRV病毒的扩增培养与滴度测定 | 第39-40页 |
| 3.2.2 p53基因敲除鼠的鉴定 | 第40-41页 |
| 3.2.3 小鼠PRV攻毒后病毒复制量的测定 | 第41-42页 |
| 3.2.4 小鼠PRV攻毒后存活率试验 | 第42页 |
| 3.2.5 组织病理切片并染色 | 第42-43页 |
| 3.2.6 小鼠PRV攻毒后炎症因子的测定 | 第43-45页 |
| 3.3 结果 | 第45-53页 |
| 3.3.1 PRV攻毒病毒材料病毒滴度 | 第45页 |
| 3.3.2 p53基因敲除鼠的基因型鉴定结果 | 第45-46页 |
| 3.3.3 p53 KO小鼠脑内病毒拷贝数较低 | 第46页 |
| 3.3.4 p53 KO小鼠脑内病毒滴度较低 | 第46-47页 |
| 3.3.5 PRV感染后p53 KO小鼠存活率更高 | 第47页 |
| 3.3.6 PRV感染后p53 KO小鼠的小脑表现较轻微的炎症病理变化 | 第47-50页 |
| 3.3.7 PRV感染后p53 KO小鼠的脑部炎症因子mRNA水平更低 | 第50-51页 |
| 3.3.8 PRV感染后p53 KO小鼠血清中炎症因子抗体水平更低 | 第51-53页 |
| 3.4 讨论 | 第53页 |
| 3.5 小结 | 第53-55页 |
| 第四章 PRV感染小鼠后脑组织的全基因转录组差异分析 | 第55-65页 |
| 4.1 材料 | 第55页 |
| 4.1.1 实验动物和病毒 | 第55页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第55页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第55页 |
| 4.2 方法 | 第55-57页 |
| 4.2.1 小鼠脑组织全基因转录组分析 | 第55-56页 |
| 4.2.2 RT qPCR验证小鼠脑组织全基因转录组数据 | 第56-57页 |
| 4.2.3 WT型小鼠PRV攻毒对照试验 | 第57页 |
| 4.3 结果 | 第57-63页 |
| 4.3.1 小鼠全基因转录组表达差异分析 | 第57-63页 |
| 4.3.2 荧光定量PCR验证与转录组数据一致 | 第63页 |
| 4.4 讨论 | 第63-64页 |
| 4.5 小结 | 第64-65页 |
| 全文总结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
