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脂肪细胞共培养及白介素-6、抵抗素对HepG2细胞ABCA1表达的影响及可能机制探讨

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
目录第10-12页
縮略词第12-13页
第一章 前言第13-15页
第二章 材料与方法第15-30页
    2.1 实验试剂和仪器第15-16页
    2.2 研究方法第16-19页
        2.2.1 实验中各种溶液的配制第16-17页
        2.2.2 细胞培养第17-19页
    2.3 建立共培养模型第19-20页
    2.4 细胞总RNA提取第20-21页
        2.4.1 实验试剂与仪器第20页
        2.4.2 实验器材的处理第20页
        2.4.3 总RNA提取步骤第20-21页
    2.5 逆转录合成CDNA第21-22页
        2.5.1 microRNA-33b及内参U6的cDNA合成第21-22页
        2.5.2 ABCA1、SREBP-1c、SREBP-2、APOA1及GAPDH基因的cDNA合成第22页
    2.6 荧光定量PCR(REAL-TIME POLYMERASE CHAIN REACTION)扩增第22-25页
        2.6.1 microRNA-33b及内参U6的检测第22-23页
        2.6.2 ABCA1、SREBP-1c、SREBP-2、APOA1及GAPDH基因检测第23-25页
        2.6.3 实时荧光定量PCR结果分析第25页
    2.7 Western blot检测第25-28页
        2.7.1 细胞总蛋白提取第25页
        2.7.2 Bradford法测定蛋白质浓度第25-26页
        2.7.3 相关溶液及凝胶的配制第26-27页
        2.7.4 SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)电泳第27-28页
        2.7.5 转膜第28页
        2.7.6 免疫反应第28页
    2.8 统计学分析第28-30页
第三章 结果第30-41页
    3.1 脂肪细胞的培养及鉴定第30-32页
        3.1.1 小鼠3T3-L1的形态学观察及鉴定第30页
        3.1.2 ADSCs形态学观察第30-31页
        3.1.3 诱导分化及成熟脂肪细胞鉴定第31-32页
    3.2 脂肪细胞与肝细胞共培养对HEPG2细胞ABCA1蛋白表达的影响第32-33页
        3.2.1 与小鼠3T3-L1细胞共培养可降低HepG2细胞ABCA1蛋白表达第32页
        3.2.2 与人ADSCs共培养可降低HepG2细胞ABCA1蛋白表达第32-33页
    3.3 脂肪细胞与肝细胞共培养对HEPG2细胞ABCA1、APOA1MRNA表达的影响第33-34页
        3.3.1 与小鼠3T3-L1细胞共培养可诱导HepG2细胞ABCA1、ApoA1mRNA表达下降第33页
        3.3.2 与人ADSCs共培养可诱导HepG2细胞ABCA1、ApoA1mRNA表达下降第33-34页
    3.4 IL-6对HEPG2细胞ABCA1、APOA1表达的影响第34-35页
    3.5 IL-6对HEPG2细胞ABCA1、APOA1 MRNA表达的影响第35页
    3.6 RESISTIN对HEPG2细胞ABCA1蛋白表达的影响第35-36页
    3.7 RESISTIN对HEPG2细胞ABCA1、APOA1 MRNA表达的影响第36-37页
    3.8 脂肪细胞与肝细胞共培养对HEPG2细胞SREBP2/MIR-33A及REBP-1c/MIR-33B表达的影响第37-39页
        3.8.1 与小鼠3T3-L1细胞共培养对HepG2细胞SREBP2/miR-33a及SREBP-1c/miR-33b表达的影响第37-38页
        3.8.2 与人ADSCs细胞共培养对HepG2细胞SREBP2/miR-33a及SREBP-1c/miR-33b表达的影响第38-39页
    3.9 IL-6干预对HEPG2细胞SREBP2/MIR-33A及SREBP-1C/M-33B表达的影响第39-40页
    3.10 RESISIIN干预对HEPG2细胞SREBP2/MIR-33A及SREBP-1C/MIR-33B表达的影响第40-41页
第四章 讨论第41-45页
第五章 结论第45-46页
参考文献第46-51页
综述第51-62页
    参考文献第56-62页
攻读学位期间主要的研究成果目录第62-63页
致谢第63页

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