摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
目录 | 第10-12页 |
縮略词 | 第12-13页 |
第一章 前言 | 第13-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-30页 |
2.1 实验试剂和仪器 | 第15-16页 |
2.2 研究方法 | 第16-19页 |
2.2.1 实验中各种溶液的配制 | 第16-17页 |
2.2.2 细胞培养 | 第17-19页 |
2.3 建立共培养模型 | 第19-20页 |
2.4 细胞总RNA提取 | 第20-21页 |
2.4.1 实验试剂与仪器 | 第20页 |
2.4.2 实验器材的处理 | 第20页 |
2.4.3 总RNA提取步骤 | 第20-21页 |
2.5 逆转录合成CDNA | 第21-22页 |
2.5.1 microRNA-33b及内参U6的cDNA合成 | 第21-22页 |
2.5.2 ABCA1、SREBP-1c、SREBP-2、APOA1及GAPDH基因的cDNA合成 | 第22页 |
2.6 荧光定量PCR(REAL-TIME POLYMERASE CHAIN REACTION)扩增 | 第22-25页 |
2.6.1 microRNA-33b及内参U6的检测 | 第22-23页 |
2.6.2 ABCA1、SREBP-1c、SREBP-2、APOA1及GAPDH基因检测 | 第23-25页 |
2.6.3 实时荧光定量PCR结果分析 | 第25页 |
2.7 Western blot检测 | 第25-28页 |
2.7.1 细胞总蛋白提取 | 第25页 |
2.7.2 Bradford法测定蛋白质浓度 | 第25-26页 |
2.7.3 相关溶液及凝胶的配制 | 第26-27页 |
2.7.4 SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)电泳 | 第27-28页 |
2.7.5 转膜 | 第28页 |
2.7.6 免疫反应 | 第28页 |
2.8 统计学分析 | 第28-30页 |
第三章 结果 | 第30-41页 |
3.1 脂肪细胞的培养及鉴定 | 第30-32页 |
3.1.1 小鼠3T3-L1的形态学观察及鉴定 | 第30页 |
3.1.2 ADSCs形态学观察 | 第30-31页 |
3.1.3 诱导分化及成熟脂肪细胞鉴定 | 第31-32页 |
3.2 脂肪细胞与肝细胞共培养对HEPG2细胞ABCA1蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
3.2.1 与小鼠3T3-L1细胞共培养可降低HepG2细胞ABCA1蛋白表达 | 第32页 |
3.2.2 与人ADSCs共培养可降低HepG2细胞ABCA1蛋白表达 | 第32-33页 |
3.3 脂肪细胞与肝细胞共培养对HEPG2细胞ABCA1、APOA1MRNA表达的影响 | 第33-34页 |
3.3.1 与小鼠3T3-L1细胞共培养可诱导HepG2细胞ABCA1、ApoA1mRNA表达下降 | 第33页 |
3.3.2 与人ADSCs共培养可诱导HepG2细胞ABCA1、ApoA1mRNA表达下降 | 第33-34页 |
3.4 IL-6对HEPG2细胞ABCA1、APOA1表达的影响 | 第34-35页 |
3.5 IL-6对HEPG2细胞ABCA1、APOA1 MRNA表达的影响 | 第35页 |
3.6 RESISTIN对HEPG2细胞ABCA1蛋白表达的影响 | 第35-36页 |
3.7 RESISTIN对HEPG2细胞ABCA1、APOA1 MRNA表达的影响 | 第36-37页 |
3.8 脂肪细胞与肝细胞共培养对HEPG2细胞SREBP2/MIR-33A及REBP-1c/MIR-33B表达的影响 | 第37-39页 |
3.8.1 与小鼠3T3-L1细胞共培养对HepG2细胞SREBP2/miR-33a及SREBP-1c/miR-33b表达的影响 | 第37-38页 |
3.8.2 与人ADSCs细胞共培养对HepG2细胞SREBP2/miR-33a及SREBP-1c/miR-33b表达的影响 | 第38-39页 |
3.9 IL-6干预对HEPG2细胞SREBP2/MIR-33A及SREBP-1C/M-33B表达的影响 | 第39-40页 |
3.10 RESISIIN干预对HEPG2细胞SREBP2/MIR-33A及SREBP-1C/MIR-33B表达的影响 | 第40-41页 |
第四章 讨论 | 第41-45页 |
第五章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
综述 | 第51-62页 |
参考文献 | 第56-62页 |
攻读学位期间主要的研究成果目录 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |