| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-12页 |
| 2 多重耐药铜绿假单胞菌的可移动元件与耐药性研究 | 第12-23页 |
| 2.1 材料与设备 | 第12-15页 |
| 2.1.1 菌株 | 第12页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第12-13页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第13页 |
| 2.1.4 实验用药敏纸片 | 第13页 |
| 2.1.5 仪器与设备 | 第13页 |
| 2.1.6 引物 | 第13-15页 |
| 2.2 方法 | 第15-17页 |
| 2.2.1 菌种鉴定 | 第15页 |
| 2.2.2 药敏试验 | 第15页 |
| 2.2.3 细菌总DNA提取 | 第15-16页 |
| 2.2.4 PCR检测可移动遗传元件的遗传标记 | 第16-17页 |
| 2.2.5 1.5%琼脂糖凝胶电泳 | 第17页 |
| 2.3 结果 | 第17-20页 |
| 2.3.1 菌种鉴定及来源分布 | 第17页 |
| 2.3.2 药敏试验结果 | 第17-18页 |
| 2.3.3 可移动遗传元件相关基因检测结果 | 第18-20页 |
| 2.4 讨论 | 第20-22页 |
| 2.5 小结 | 第22-23页 |
| 3 整合子对耐药基因盒整合频率的测定 | 第23-33页 |
| 3.1 材料与设备 | 第23-24页 |
| 3.1.1 菌株及质粒 | 第23页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 3.1.3 试剂配制 | 第23-24页 |
| 3.1.4 仪器与设备 | 第24页 |
| 3.2 方法 | 第24-27页 |
| 3.2.1 重组质粒的构建 | 第24-26页 |
| 3.2.2 重组质粒序列验证 | 第26页 |
| 3.2.3 重组质粒转化感受态细胞 | 第26-27页 |
| 3.2.4 抑菌浓度链霉素诱导整合子捕获和表达aadA2基因盒 | 第27页 |
| 3.2.5 表型筛选法检测整合频率 | 第27页 |
| 3.3 结果 | 第27-30页 |
| 3.3.1 重组质粒序列验证 | 第27-29页 |
| 3.3.2 转化后感受态菌株在LB平板上的生长情况 | 第29页 |
| 3.3.3 整合频率的测定 | 第29-30页 |
| 3.4 讨论 | 第30-32页 |
| 3.5 小结 | 第32-33页 |
| 4 不同可变区启动子对整合子耐药基因盒表达的影响研究 | 第33-43页 |
| 4.1 材料与设备 | 第33-35页 |
| 4.1.1 菌株及质粒 | 第33-34页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 4.1.3 仪器与设备 | 第34页 |
| 4.1.4 引物 | 第34-35页 |
| 4.2 方法 | 第35-37页 |
| 4.2.1 定点突变法构建含不同类型的可变区启动子的质粒 | 第35页 |
| 4.2.2 点突变质粒转化感受态细菌 | 第35页 |
| 4.2.3 提取转化后菌株的总RNA | 第35-37页 |
| 4.3 结果 | 第37-41页 |
| 4.3.1 点突变质粒序列验证 | 第37页 |
| 4.3.2 1.5%琼脂糖凝胶电泳检验RNA提取物 | 第37-38页 |
| 4.3.3 不同可变区启动子对aadA2基因表达水平的影响 | 第38-39页 |
| 4.3.4 不同可变区启动子对intI1基因表达水平的影响 | 第39-41页 |
| 4.4 讨论 | 第41-42页 |
| 4.5 小结 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 综述 | 第48-55页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 攻读学位期间主要研究成果 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
