符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-22页 |
1.1 小麦赤霉病研究进展 | 第11-14页 |
1.1.1 小麦赤霉病病原菌 | 第11-12页 |
1.1.2 小麦抗赤霉病机理研究进展 | 第12-13页 |
1.1.3 分子水平抗赤霉病机理的研究进展 | 第13-14页 |
1.2 植物转基因技术及其研究进展 | 第14-18页 |
1.2.1 农杆菌介导法 | 第15-16页 |
1.2.2 基因枪法 | 第16-17页 |
1.2.3 花粉管通道法 | 第17页 |
1.2.4 聚乙二醇(PEG)介导法 | 第17-18页 |
1.3 短柄草的研究进展 | 第18-22页 |
1.3.1 短柄草的简介 | 第18-19页 |
1.3.2 短柄草是新型的模式植物 | 第19-21页 |
1.3.3 短柄草的分子生物学研究 | 第21-22页 |
1.4 本实验的目的及意义 | 第22页 |
2 材料与方法 | 第22-35页 |
2.1 实验材料 | 第22-24页 |
2.1.1 植物材料 | 第22-23页 |
2.1.2 菌株与质粒载体 | 第23页 |
2.1.3 引物 | 第23页 |
2.1.4 酶及主要生化试剂 | 第23页 |
2.1.5 主要仪器与设备 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-35页 |
2.2.0 禾谷镰刀菌的培养 | 第24页 |
2.2.1 小麦穗部接菌方法 | 第24页 |
2.2.2 短柄草穗部接菌方法 | 第24-25页 |
2.2.3 叶片离体培养鉴定赤霉病 | 第25页 |
2.2.4 小麦胚芽鞘接菌的方法 | 第25页 |
2.2.5 短柄草胚芽鞘接菌的方法 | 第25-26页 |
2.2.6 基因克隆与表达载体的构建 | 第26-27页 |
2.2.6.1 抗病路径相关基因的克隆及载体构建 | 第26页 |
2.2.6.2 小麦基因枪转化表达载体的构建 | 第26-27页 |
2.2.7 琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 | 第27-28页 |
2.2.8 质粒的提取 | 第28-29页 |
2.2.9 农杆菌介导的短柄草的遗传转化 | 第29-31页 |
2.2.9.1 短柄草的种植 | 第29页 |
2.2.9.2 短柄草幼胚的剥取 | 第29页 |
2.2.9.3 短柄草愈伤组织的诱导及继代培养 | 第29-30页 |
2.2.9.4 农杆菌介导的短柄草的遗传转化 | 第30页 |
2.2.9.5 愈伤组织的筛选与再分化 | 第30-31页 |
2.2.9.6 转基因短柄草植株的鉴定 | 第31页 |
2.2.10 基因枪介导的小麦的遗传转化 | 第31-35页 |
2.2.10.1 小麦幼胚愈伤组织的诱导 | 第31-32页 |
2.2.10.2 金粉的配制 | 第32页 |
2.2.10.3 基因枪微粒子弹的配制 | 第32页 |
2.2.10.4 愈伤组织的高渗处理 | 第32-33页 |
2.2.10.5 基因枪轰击 | 第33页 |
2.2.10.6 愈伤组织的筛选与分化 | 第33页 |
2.2.10.7 抗性植株的获得 | 第33页 |
2.2.10.8 抗性植株的检测 | 第33-35页 |
3 结果与分析 | 第35-45页 |
3.1 短柄草研究小麦赤霉病体系的建立 | 第35-37页 |
3.1.1 穗部与禾谷镰刀菌的互作 | 第35-36页 |
3.1.2 离体叶片与禾谷镰刀菌的互作 | 第36页 |
3.1.3 胚芽鞘与禾谷镰刀菌的互作 | 第36-37页 |
3.2 短柄草研究小麦赤霉病体系的应用 | 第37-45页 |
3.2.1 抗赤霉病路径相关基因的抗性分析 | 第37-43页 |
3.2.1.1 抗病路径相关基因的克隆及过表达载体的构建 | 第37页 |
3.2.1.2 短柄草的遗传转化 | 第37-38页 |
3.2.1.3 转基因短柄草植株的鉴定 | 第38-39页 |
3.2.1.4 转基因短柄草植株的抗性鉴定——筛选候选基因 | 第39-42页 |
3.2.1.5 候选基因进行小麦的遗传转化 | 第42-43页 |
3.2.2 短柄草种质资源的抗病性鉴定 | 第43-45页 |
3.2.2.1 短柄草种质资源的抗病性鉴定 | 第43-45页 |
3.2.2.2 短柄草种质材料的遗传转化 | 第45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
4.1 短柄草作为禾本科模式作物的必要性 | 第45-46页 |
4.2 利用短柄草研究小麦赤霉病 | 第46页 |
4.3 短柄草的遗传转化 | 第46-47页 |
4.4 小麦的遗传转化 | 第47-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
附录 | 第57-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第61页 |