| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一部分 Anxa5 真核表达质粒构建及在 Hca-P 中的表达 | 第15-37页 |
| 材料和方法 | 第15-25页 |
| 1. 材料 | 第15-17页 |
| 1.1 细胞株、菌种和引物 | 第15页 |
| 1.2 主要仪器和试剂 | 第15-17页 |
| 1.3 溶液配制 | 第17页 |
| 2. 方法 | 第17-25页 |
| 2.1 细胞培养 | 第17页 |
| 2.2 Western blot 检测 Hca-P 和 Hca-F 中 Anxa5 的水平 | 第17-18页 |
| 2.3 Anxa5 真核表达质粒构建 | 第18-23页 |
| 2.4 Anxa5 重组质粒稳定转染 Hca-P | 第23-24页 |
| 2.5 Anxa5 稳转 Hca-P 细胞形态表征 | 第24-25页 |
| 2.6 Western blot 检测 Anxa5 在其稳转 Hca-P 中水平 | 第25页 |
| 2.7 统计学分析 | 第25页 |
| 结果 | 第25-32页 |
| 1. Anxa5 在 Hca-P 和 Hca-F 中的蛋白水平分析比较 | 第25-26页 |
| 2. Anxa5 基因扩增 | 第26页 |
| 3. pMD 19-T-Anxa5 克隆质粒的鉴定 | 第26-27页 |
| 4. pcDNA3.1-V5/HisB-Anxa5 真核表达质粒的鉴定 | 第27-28页 |
| 5. 测序鉴定结果 | 第28页 |
| 6. Anxa5 稳转前后 Hca-P 形态学观察和比较 | 第28-29页 |
| 7. Anxa5 稳转前后 Hca-P 亚显微结构变化 | 第29-30页 |
| 8. Anxa5 在稳转单克隆 Hca-P 中稳定高表达 | 第30-32页 |
| 讨论 | 第32-34页 |
| 结论 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-37页 |
| 第二部分 Anxa5 上调对 Hca-P 增殖、迁移、侵袭和淋巴结转移力影响 | 第37-54页 |
| 材料和方法 | 第37-40页 |
| 1. 材料 | 第37-38页 |
| 1.1 细胞株和实验动物 | 第37页 |
| 1.2 主要仪器和试剂 | 第37-38页 |
| 2. 方法 | 第38-40页 |
| 2.1 CCK-8 法检测上调 Anxa5 后 Hca-P 增殖能力变化 | 第38页 |
| 2.2 Transwell 法检测 Anxa5 上调影响 Hca-P 迁移能力 | 第38页 |
| 2.3 Transwell 法检测 Anxa5 上调对 Hca-P 侵袭能力影响 | 第38-39页 |
| 2.4 Anxa5 上调致 Hca-P 体内成瘤及淋巴结转移情况观察 | 第39页 |
| 2.5 统计学分析 | 第39-40页 |
| 结果 | 第40-47页 |
| 1. Anxa5 表达上调对 Hca-P 增殖能力的影响 | 第40-41页 |
| 2. Hca-P 的迁移能力与 Anxa5 的表达量呈正相关 | 第41-43页 |
| 3. Anxa5 表达上调促进 Hca-P 侵袭 | 第43-44页 |
| 4. Anxa5 表达量变化致 Hca-P 体内成瘤及淋巴结转移情况 | 第44-47页 |
| 4.1 足垫原发灶形态及表观恶性程度观察 | 第44-45页 |
| 4.2 Anxa5 高表达促进 Hca-P 淋巴结转移 | 第45-47页 |
| 讨论 | 第47-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 综述 | 第54-68页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
