摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
前言 | 第8-11页 |
材料与方法 | 第11-17页 |
1 材料设备 | 第11-14页 |
1.1 细胞系 | 第11页 |
1.2 实验动物 | 第11-12页 |
1.3 慢病毒包装系统 | 第12页 |
1.4 抗体 | 第12页 |
1.5 其他试剂及材料 | 第12-13页 |
1.6 主要仪器设备 | 第13-14页 |
2 实验方法 | 第14-17页 |
2.1 细胞培养 | 第14页 |
2.2 慢病毒包装 | 第14页 |
2.3 用重组慢病毒感染目的细胞 | 第14页 |
2.4 Western blot检测 | 第14-15页 |
2.5 细胞迁移实验 | 第15页 |
2.6 移植瘤模型的建立 | 第15页 |
2.7 免疫组化检测Sema4D的表达水平 | 第15-16页 |
2.8 免疫荧光检测移植瘤血管生成情况 | 第16-17页 |
结果讨论 | 第17-43页 |
1. 结直肠癌细胞系高表达信号素4D(Sema4D)及其受体神经丛素B1(Plexin-B1) | 第17页 |
2. 结直肠癌细胞系血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平呈现差异 | 第17-19页 |
3. 结直肠癌细胞系对慢病毒转导的敏感性和耐受性表现差异 | 第19-22页 |
4. 慢病毒转导能有效上调或下调目的细胞信号素4D(Sema4D)的表达水平 | 第22-23页 |
5. 慢病毒转导对目的细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平无明显影响 | 第23-25页 |
6. 上调或下调目的细胞信号素4D(Sema4D)的表达水平,能够增强或减弱其诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)运动迁移的能力 | 第25-28页 |
7. 移植瘤模型显示干扰Sema4D的表达能减缓裸鼠皮下移植瘤生长的速度,过表达Sema4D在一定程度上可以促进裸鼠皮下移植瘤的生长 | 第28-33页 |
8. 慢病毒转导能实现裸鼠皮下移植瘤中Sema4D的稳定干扰和过表达 | 第33-36页 |
9. 干扰Sema4D的表达能降低裸鼠皮下移植瘤内血管密度,过表达Sema4D能够在一定程度上增大裸鼠皮下移植瘤内血管密度 | 第36-43页 |
结论 | 第43-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
附录 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |