| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 C3 结构 | 第11-14页 |
| 1.1.1 C3 基本结构 | 第11-12页 |
| 1.1.2 C3 活化裂解 | 第12-13页 |
| 1.1.3 C3 进化分析 | 第13-14页 |
| 1.2 C3 功能 | 第14-16页 |
| 1.2.1 C3 生物学活性 | 第14-15页 |
| 1.2.2 C3 相关疾病 | 第15-16页 |
| 1.3 结语及研究意义 | 第16-18页 |
| 2 L-C3-like 开放阅读框全长及 3’非编码区的克隆、生物信息学分析 | 第18-31页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第18页 |
| 2.1.3 药品及试剂 | 第18-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-25页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第19页 |
| 2.2.2 七鳃鳗 L-C3-like（片段一、片段二）序列的克隆 | 第19-20页 |
| 2.2.3 七鳃鳗 L-C3-like（片段三）cDNA3’末端全长快速扩增反应（3’RACE） | 第20-21页 |
| 2.2.4 七鳃鳗 L-C3-like（片段一、片段二、片段三）扩增序列的切胶回收 | 第21-22页 |
| 2.2.5 目的片段与载体连接 | 第22页 |
| 2.2.6 E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.7 连接载体的目的片段的转化 | 第23页 |
| 2.2.8 重组质粒的鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.9 重组质粒抽提与测序 | 第24-25页 |
| 2.2.10 3’ RACE 实验和开放阅读框所得的序列拼接 | 第25页 |
| 2.2.11 L-C3-like 生物信息学分析软件及数据库 | 第25页 |
| 2.3 结果 | 第25-29页 |
| 2.3.1 分子克隆 | 第25-27页 |
| 2.3.2 生物信息学分析 | 第27-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-30页 |
| 2.5 小结 | 第30-31页 |
| 3 七鳃鳗 L-C3-like-2 片段的蛋白表达、纯化及质谱检测 | 第31-42页 |
| 3.1 材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第31-32页 |
| 3.2 方法 | 第32-37页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第32页 |
| 3.2.2 PCR 扩增 | 第32页 |
| 3.2.3 目的片段切胶回收 | 第32-33页 |
| 3.2.4 目的片段与载体的连接与转化 | 第33-34页 |
| 3.2.5 原核重组蛋白的诱导表达 | 第34-35页 |
| 3.2.6 原核重组蛋白包涵体纯化 | 第35-36页 |
| 3.2.7 纯化的原核重组蛋白质谱检测 | 第36-37页 |
| 3.3 结果 | 第37-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-41页 |
| 3.5 小结 | 第41-42页 |
| 4 兔抗七鳃鳗 L-C3-like-2 多克隆抗体的制备及鉴定 | 第42-48页 |
| 4.1 材料 | 第42页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第42页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第42页 |
| 4.2 方法 | 第42-45页 |
| 4.2.1 兔抗 L-C3-like-2 多克隆抗体的制备及间接 ELISA 法检测 | 第42-44页 |
| 4.2.2 多克隆抗体的纯化 | 第44页 |
| 4.2.3 Western Blot 及质谱对多克隆抗体的敏感性与特异性的检测 | 第44-45页 |
| 4.3 结果 | 第45-46页 |
| 4.4 讨论 | 第46页 |
| 4.5 小结 | 第46-48页 |
| 5 L-C3-like 的七鳃鳗组织、细胞表达分析 | 第48-55页 |
| 5.1 材料 | 第48-49页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第48页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第48-49页 |
| 5.2 方法 | 第49-51页 |
| 5.2.1 Real-time PCR 法检测 L-C3-like 转录水平组织相对表达量 | 第49-50页 |
| 5.2.2 Western blot 分析各组织 L-C3-like 蛋白的表达 | 第50页 |
| 5.2.3 激光共聚焦 L-C3-like 在七鳃鳗髓免疫小体细胞的亚细胞定位 | 第50-51页 |
| 5.2.4 流式细胞分析（FACS）L-C3-like 七鳃鳗免疫小体细胞的表达 | 第51页 |
| 5.3 结果 | 第51-53页 |
| 5.4 讨论 | 第53页 |
| 5.5 小结 | 第53-55页 |
| 6 L-C3-like 与 VLRB 分子协同参与的免疫学活性研究 | 第55-60页 |
| 6.1 材料 | 第55页 |
| 6.1.1 主要试剂 | 第55页 |
| 6.1.2 主要仪器 | 第55页 |
| 6.2 方法 | 第55-56页 |
| 6.2.1 L-C3-like 与 VLRB 免疫共沉淀实验 | 第55-56页 |
| 6.2.2 L-C3-like 兔红细胞沉积实验 | 第56页 |
| 6.3 结果 | 第56-58页 |
| 6.4 讨论 | 第58-59页 |
| 6.5 小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 本文创新点 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 附录 七鳃鳗 L-C3-like 分子核苷酸及氨基酸序列 | 第64-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第70页 |
| 攻读硕士期间参与项目情况 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
