摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
目录 | 第10-12页 |
英文缩略词表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-16页 |
第一章 仪器与材料 | 第16-23页 |
1.1 主要仪器 | 第16页 |
1.2 主要试剂与耗材 | 第16-18页 |
1.3 主要溶液的配制 | 第18-23页 |
1.3.1 感受态的制备 | 第18页 |
1.3.2 质粒的扩增及抽提 | 第18-19页 |
1.3.3 细胞培养所需溶液 | 第19页 |
1.3.4 冻存液(现用现配) | 第19页 |
1.3.5 Western-blotting所需的各种贮存液、工作液及其他重要试剂的配制 | 第19-23页 |
第二章 实验方法 | 第23-30页 |
2.1 质粒扩增、抽提 | 第23-25页 |
2.1.1 大肠杆菌DH5a抗性检测及单克隆菌落的制备 | 第23页 |
2.1.2 大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备 | 第23页 |
2.1.3 质粒的转化 | 第23-24页 |
2.1.4 克隆挑取及扩增 | 第24页 |
2.1.5 质粒的抽提和鉴定 | 第24-25页 |
2.2 HEK293细胞的复苏、冻存和培养 | 第25-26页 |
2.3 质粒转染 | 第26-27页 |
2.3.1 细胞的接种 | 第26页 |
2.3.2 质粒转染 | 第26-27页 |
2.3.3 药物处理及pH调节 | 第27页 |
2.4 western blot检测 | 第27-29页 |
2.4.1 WB之前的样品处理 | 第27页 |
2.4.2 BCA法蛋白定量 | 第27-28页 |
2.4.3 western blot | 第28-29页 |
2.5 数据处理及统计学分析 | 第29-30页 |
第三章 结果 | 第30-36页 |
3.1 质粒测序 | 第30页 |
3.2 pH变化对ataxin-3蛋白表达量的影响 | 第30-31页 |
3.2.1 pH变化对ataxin-3蛋白表达量的影响的Western图像 | 第30-31页 |
3.2.2 pH处理后的ataxin-3表达量的统计学分析 | 第31页 |
3.3 不同浓度的DMA对ataxin-3蛋白表达量的影响 | 第31-32页 |
3.3.1 不同浓度的对ataxin-3蛋白表达量的影响的Western图像 | 第31-32页 |
3.3.2 不同浓度的DMA处理后的ataxin-3表达的统计学分析 | 第32页 |
3.4 不同浓度DMA及pH处理后ASICla对ataxin-3蛋白表达量的影响 | 第32-34页 |
3.4.1 pH变化及不同浓度DMA处理后ASICla对ataxin-3蛋白表达量的影响的Western图像 | 第32-33页 |
3.4.2 pH变化及不同浓度DMA处理后的ataxin-3表达的统计学分析 | 第33-34页 |
3.5 ataxin-3蛋白对ASICla表达的影响 | 第34-36页 |
3.5.1 ataxin-3蛋白对ASICla表达量的影响的Western图像 | 第34-35页 |
3.5.2 ataxin-3蛋白对ASICla表达量的影响之统计学分析 | 第35-36页 |
第四章 讨论 | 第36-39页 |
4.1 ASICla对polyQ扩展突变型ataxin-3蛋白表达量的影响 | 第36-38页 |
4.1.1 扩展突变型ataxin-3蛋白的细胞毒性 | 第36页 |
4.1.2 ASICla的生理及病理功能 | 第36-37页 |
4.1.3 ASICla增加polyQ扩展突变型ataxin-3蛋白表达量以及影响polyQ扩展突变型ataxin-3蛋白细胞毒性的可能机制 | 第37-38页 |
4.2 扩展突变型ataxin-3上调ASICla的表达量 | 第38页 |
4.3 研究和展望 | 第38-39页 |
第五章 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
综述 | 第45-57页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57页 |