| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-13页 |
| 1.1 RNA干扰技术 | 第10-11页 |
| 1.2 端粒、端粒酶与肿瘤 | 第11-13页 |
| 2 材料与方法 | 第13-26页 |
| 2.1 材料 | 第13-19页 |
| 2.1.1 细胞 | 第13页 |
| 2.1.2 试剂 | 第13-18页 |
| 2.1.3 仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-26页 |
| 2.2.1 H1/U6双启动子表达框架的构建 | 第19-22页 |
| 2.2.2 细胞培养及转染 | 第22-23页 |
| 2.2.3 细胞端粒酶活性的检测 | 第23-26页 |
| 3 结果 | 第26-34页 |
| 3.1 H1/U6双启动子表达框架的构建 | 第26-28页 |
| 3.1.1 琼脂糖凝胶电泳分析质粒提取回收产物 | 第26页 |
| 3.1.2 琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物 | 第26页 |
| 3.1.3 紫外分光光度法定量分析融合PCR产物 | 第26页 |
| 3.1.4 H1/U6双启动子SECs测序结果 | 第26-28页 |
| 3.2 HepG2细胞转染H1/U6双启动子SECs后其端粒酶活性的定性检测 | 第28-30页 |
| 3.2.1 阳离子聚合物转染双启动子表达框架对细胞端粒酶活性的影响 | 第29页 |
| 3.2.2 磷酸钙共沉淀法转染双启动子表达框架对细胞端粒酶活性的影响 | 第29-30页 |
| 3.3 HepG2细胞转染H1/U6双启动子表达框架后其端粒酶活性的半定量检测 | 第30-32页 |
| 3.3.1 阳离子聚合物转染试剂转染H1/U6双启动子表达框架后对HepG2细胞端粒酶活性的影响 | 第30页 |
| 3.3.2 磷酸钙共沉淀法转染H1/U6双启动子表达框架后对HepG2细胞端粒酶活性的影响 | 第30-31页 |
| 3.3.3 两种转染方法对端粒酶活性影响的比较 | 第31-32页 |
| 3.4 HepG2细胞转染H1/U6双启动子表达框架后其端粒酶活性的荧光定量检测结果 | 第32-34页 |
| 3.4.1 端粒酶活性检测扩增曲线、标准曲线和熔解曲线 | 第32-33页 |
| 3.4.2 荧光定量检测细胞转染SECs后其端粒酶活性的结果 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 综述 | 第42-50页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
