摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6页 |
第一章 前言 | 第10-13页 |
1.1 金黄色葡萄球菌肠毒素研究进展 | 第10-11页 |
1.1.1 金黄色葡萄球菌肠毒素生物学特性 | 第10页 |
1.1.2 金黄色葡萄球菌肠毒素致病性 | 第10-11页 |
1.2 金黄色葡萄球菌肠毒素检测方法研究进展 | 第11页 |
1.3 免疫磁分离及化学发光快速检测技术研究进展 | 第11-12页 |
1.4 研究意义与目的 | 第12页 |
1.5 研究内容 | 第12-13页 |
第二章 金黄色葡萄球菌B型肠毒素的制备 | 第13-24页 |
2.1 材料 | 第13-16页 |
2.1.1 主要仪器及设备 | 第13-14页 |
2.1.2 主要试剂 | 第14页 |
2.1.3 主要试剂配置 | 第14-16页 |
2.1.4 SEB纯化相关溶液配制 | 第16页 |
2.2 方法 | 第16-20页 |
2.2.1 金黄色葡萄球菌B型肠毒素的培养与产毒 | 第16-20页 |
2.3 实验结果 | 第20-23页 |
2.3.1 小批量SEB表达SDS-PAGE验证结 | 第20-21页 |
2.3.2 大批量培养细菌SEB表达SDS-PAGE验证结果 | 第21-22页 |
2.3.3 SEB的浓缩及蛋白定量 | 第22-23页 |
2.4 讨论 | 第23页 |
2.5 小结 | 第23-24页 |
第三章 金黄色葡萄球菌B型肠毒素兔源多克隆抗体的制备 | 第24-36页 |
3.1 材料 | 第24-27页 |
3.1.1 主要仪器设备 | 第24-25页 |
3.1.2 主要试剂 | 第25页 |
3.1.3 实验动物 | 第25页 |
3.1.4 主要试剂得配制 | 第25-27页 |
3.2 方法 | 第27-31页 |
3.2.1 兔源抗金黄色葡萄球菌B型肠毒素多克隆抗体的制备 | 第27-31页 |
3.3 实验结果 | 第31-34页 |
3.3.1 SEB兔源多克隆抗体效价变化曲线 | 第31页 |
3.3.2 5次免疫后SEB兔源多克隆抗体特异性 | 第31-32页 |
3.3.3 多克隆抗体纯化结果 | 第32-33页 |
3.3.4 纯化抗体特异性 | 第33-34页 |
3.3.5 纯化多克隆抗体蛋白浓度测定结果 | 第34页 |
3.4 讨论 | 第34-35页 |
3.5 小结 | 第35-36页 |
第四章 基于免疫磁分离及化学发光对金黄色葡萄球菌B型肠毒素快速检测方法的建立 | 第36-47页 |
4.1 材料 | 第36-37页 |
4.1.1 主要仪器设备 | 第36-37页 |
4.1.2 主要试剂 | 第37页 |
4.2 方法 | 第37-41页 |
4.2.3 免疫磁珠的制备 | 第37-38页 |
4.2.4 最佳抗体稀释倍数的确定(棋盘法) | 第38页 |
4.2.5 双抗夹心化学发光免疫磁分离检测SEB方法的建立 | 第38-39页 |
4.2.6 SEB的加标回收实验 | 第39-41页 |
4.3 结果与分析 | 第41-46页 |
4.3.1 SEB最佳单克隆抗体稀释倍数的确定 | 第41页 |
4.3.2 封闭液种类的优化 | 第41-42页 |
4.3.3 免疫磁球用量的优化 | 第42页 |
4.3.4 抗原与抗体及一抗与二抗反应时间的优化 | 第42-43页 |
4.3.5 发光检测时间的优化 | 第43-44页 |
4.3.6 标准曲线的建立 | 第44页 |
4.3.7 方法特异性 | 第44-45页 |
4.3.8 准确性和精密性 | 第45-46页 |
4.4 讨论 | 第46页 |
4.5 小结 | 第46-47页 |
第五章 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
发表论文和科研情况说明 | 第51-52页 |
致谢 | 第52页 |