缩略语表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
前言 | 第15-16页 |
文献回顾 | 第16-28页 |
第一部分 miR-483在食管癌细胞系中的表达 | 第28-35页 |
前言 | 第28页 |
1 材料 | 第28-30页 |
1.1 细胞系 | 第28页 |
1.2 PCR引物 | 第28页 |
1.3 主要试剂 | 第28-29页 |
1.4 主要仪器 | 第29页 |
1.5 主要耗材 | 第29-30页 |
2 方法 | 第30-33页 |
2.1 细胞培养 | 第30-31页 |
2.2 qPCR | 第31-33页 |
3 结果 | 第33页 |
4 讨论 | 第33-35页 |
第二部分 过表达miR4833p对食管癌细胞恶性表型的影响 | 第35-46页 |
前言 | 第35页 |
1 材料 | 第35-36页 |
1.1 细胞系 | 第35页 |
1.2 实验动物 | 第35页 |
1.3 慢病毒 | 第35页 |
1.4 PCR引物 | 第35页 |
1.5 主要试剂 | 第35-36页 |
1.6 主要仪器 | 第36页 |
1.7 主要耗材 | 第36页 |
2 方法 | 第36-40页 |
2.1 细胞培养 | 第36页 |
2.2 建立过表达mi R4833p的细胞模型及对照细胞模型 | 第36-37页 |
2.3 MTT法检测细胞增殖 | 第37-38页 |
2.4 Transwell实验检测细胞迁移 | 第38页 |
2.5 流式细胞仪检测细胞周期 | 第38-39页 |
2.6 流式细胞仪检测ADR诱导的细胞凋亡 | 第39页 |
2.7 MTT法检测细胞对化疗药物的敏感性 | 第39-40页 |
2.8 裸鼠成瘤实验 | 第40页 |
3 结果 | 第40-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
第三部分 低表达miR4833p对食管癌细胞恶性表型的影响 | 第46-52页 |
前言 | 第46页 |
1 材料 | 第46-47页 |
1.1 细胞系 | 第46页 |
1.2 mi RNA抑制剂 | 第46页 |
1.3 引物 | 第46页 |
1.4 主要试剂 | 第46页 |
1.5 主要仪器 | 第46页 |
1.6 主要耗材 | 第46-47页 |
2 方法 | 第47-48页 |
2.1 细胞培养 | 第47页 |
2.2 建立低表达mi R4833p的细胞模型 | 第47页 |
2.3 MTT法检测细胞增殖 | 第47页 |
2.4 Transwell实验检测细胞迁移 | 第47-48页 |
2.5 流式细胞仪检测细胞周期 | 第48页 |
2.6 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第48页 |
2.7 MTT法检测细胞对化疗药物的敏感性 | 第48页 |
3 结果 | 第48-51页 |
4 讨论 | 第51-52页 |
第四部分 miR4833p靶基因的预测与鉴定 | 第52-63页 |
前言 | 第52页 |
1 材料 | 第52-53页 |
1.1 细胞系 | 第52页 |
1.2 抗体 | 第52页 |
1.3 主要试剂 | 第52-53页 |
1.4 主要仪器 | 第53页 |
1.5 主要耗材 | 第53页 |
2 方法 | 第53-58页 |
2.1 细胞培养 | 第53-54页 |
2.2 生物信息学预测mi R4833p的靶基因 | 第54页 |
2.3 Affymetrix表达谱芯片预测mi R4833p的靶基因 | 第54-55页 |
2.4 生物信息学预测结果与基因芯片预测结果取交集 | 第55页 |
2.5 PCR检测靶基因m RNA水平的表达差异 | 第55-56页 |
2.6 Western blot检测靶基因蛋白水平的表达差异 | 第56-58页 |
3 结果 | 第58-61页 |
4 讨论 | 第61-63页 |
小结 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-74页 |
附录 | 第74-77页 |
个人简历及研究成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |