| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 韭蛆对蔬菜的危害及防治研究现状 | 第10-11页 |
| 1.2 昆虫内参基因在昆虫实时荧光定量PCR中的应用 | 第11-14页 |
| 1.2.1 内参基因的必要性 | 第11页 |
| 1.2.2 昆虫中常用的内参基因种类 | 第11-12页 |
| 1.2.3 已报道的昆虫内参基因 | 第12-13页 |
| 1.2.4 内参基因稳定性的分析方法 | 第13-14页 |
| 1.3 昆虫解毒酶简介 | 第14-15页 |
| 1.3.1 细胞色素P450 | 第14页 |
| 1.3.2 谷胱甘肽-S-转移酶 | 第14-15页 |
| 1.3.3 羧酸酯酶 | 第15页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 1.5 研究内容与技术路线 | 第16-18页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第16-17页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 韭蛆内参基因的筛选 | 第18-39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第18-23页 |
| 2.1.1 试验昆虫与样本收集 | 第18页 |
| 2.1.2 试剂与仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.3 核酸的提取 | 第19页 |
| 2.1.4 cDNA第一条链的合成 | 第19-20页 |
| 2.1.5 引物设计 | 第20-21页 |
| 2.1.6 RealtimePCR | 第21-22页 |
| 2.1.7 标准曲线的绘制 | 第22-23页 |
| 2.2 结果与分析 | 第23-37页 |
| 2.2.1 RNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.2 内参基因荧光定量引物特异性分析 | 第23-27页 |
| 2.2.3 各候选内参基因的表达水平 | 第27-28页 |
| 2.2.4 不同性别各内参基因表达稳定性分析 | 第28-31页 |
| 2.2.5 不同组织各内参基因表达稳定性分析 | 第31-33页 |
| 2.2.6 不同虫态各内参基因表达稳定性分析 | 第33-35页 |
| 2.2.7 农药处理各内参基因表达稳定性分析 | 第35-37页 |
| 2.3 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 四种关键解毒代谢酶基因克隆及序列分析 | 第39-57页 |
| 3.1 材料材料 | 第39-40页 |
| 3.2 试验方法 | 第40-43页 |
| 3.2.1 总RNA的提取与鉴定 | 第40页 |
| 3.2.2 四种基因引物序列 | 第40页 |
| 3.2.3 常规PCR反应 | 第40-42页 |
| 3.2.4 目的片段的克隆和测序 | 第42-43页 |
| 3.3 结果与分析 | 第43-56页 |
| 3.3.1 总RNA琼脂糖电泳检测 | 第43-44页 |
| 3.3.2 PCR产物的克隆与鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3.3 ABC转运蛋白克隆片段的测序与序列分析 | 第45-48页 |
| 3.3.4 EST基因克隆片段的测序与序列分析 | 第48-50页 |
| 3.3.5 GST基因克隆片段的测序与序列分析 | 第50-53页 |
| 3.3.6 CYP基因克隆片段的测序与序列分析 | 第53-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-57页 |
| 第四章 韭蛆四种解毒酶基因转录水平定量研究 | 第57-67页 |
| 4.1 材料与方法 | 第57-59页 |
| 4.1.1 材料 | 第57页 |
| 4.1.2 方法 | 第57-59页 |
| 4.2 结果分析 | 第59-65页 |
| 4.2.1 总RNA电泳 | 第59页 |
| 4.2.2 标准曲线的绘制 | 第59页 |
| 4.2.3 引物特异性检测 | 第59-61页 |
| 4.2.4 用辛硫磷处理的4龄幼虫不同时间四种基因的诱导转录水平 | 第61-62页 |
| 4.2.5 用毒死蜱处理的4龄幼虫不同时间四种基因的诱导转录水平 | 第62-63页 |
| 4.2.6 用吡虫啉处理的4龄幼虫不同时间四种基因的诱导转录水平 | 第63-64页 |
| 4.2.7 用吡虫啉处理的4龄幼虫不同时间四种基因的诱导转录水平 | 第64-65页 |
| 4.3 讨论 | 第65-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第73页 |
