摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 文献综述 | 第13-23页 |
1.1 引言 | 第13页 |
1.2 植物MT的理化性质 | 第13-16页 |
1.2.1 分子量 | 第13-14页 |
1.2.2 氨基酸含量 | 第14页 |
1.2.3 空间结构 | 第14-15页 |
1.2.4 植物MT的分类 | 第15-16页 |
1.3 植物MT的检测方法 | 第16-19页 |
1.3.1 金属饱和法 | 第16-17页 |
1.3.2 电化学法 | 第17页 |
1.3.3 色谱分析法 | 第17-18页 |
1.3.4 蛋白质分析法/免疫法 | 第18页 |
1.3.5 克隆及检测 | 第18页 |
1.3.6 偶联技术(coupledtechniques) | 第18-19页 |
1.4 植物MT的功能 | 第19-20页 |
1.4.1 植物MT的重金属解毒功能 | 第19页 |
1.4.2 植物MT维持内环境的稳定 | 第19页 |
1.4.3 植物MT参与基因的调控 | 第19-20页 |
1.4.4 植物MT清除活性氧(ROS) | 第20页 |
1.4.5 植物MT参与环境保护 | 第20页 |
1.5 研究内容及研究意义 | 第20-23页 |
1.5.1 研究内容 | 第20-21页 |
1.5.2 研究意义 | 第21-23页 |
第二章 ZmMT1的表达与纯化 | 第23-37页 |
2.1 引言 | 第23页 |
2.2 材料 | 第23-29页 |
2.2.1 质粒与菌株 | 第23-24页 |
2.2.2 主要实验试剂 | 第24-25页 |
2.2.3 主要实验仪器 | 第25页 |
2.2.4 常规试剂的配制 | 第25-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-32页 |
2.3.1 原核表达载体pGEX-6P-1-ZmMT1的构建 | 第29页 |
2.3.2 目的基因ZmMT1所编码蛋白质的表达及纯化 | 第29-32页 |
2.3.3 目的基因ZmMT1所编码蛋白质的表达条件的探究 | 第32页 |
2.4 实验结果 | 第32-36页 |
2.4.1 ZmMT1的电泳检测 | 第32-33页 |
2.4.2 目的基因ZmMT1所编码蛋白质的表达条件的探究 | 第33-36页 |
2.5 本章小结 | 第36-37页 |
第三章 ZmMT1与金属离子相互作用的分析 | 第37-51页 |
3.1 引言 | 第37页 |
3.2 实验部分 | 第37-39页 |
3.2.1 主要实验试剂 | 第37-38页 |
3.2.2 主要实验仪器 | 第38-39页 |
3.2.3 常规试剂的配制 | 第39页 |
3.3 实验方法 | 第39-42页 |
3.3.1 原核表达载体PGEX-6P-1-ZmMT1与PGEX-6p-1的构建 | 第39-40页 |
3.3.2 ZmMT1对不同金属离子耐受性测定 | 第40页 |
3.3.3 不同金属离子对ZmMT1的诱导表达 | 第40页 |
3.3.4 DTNB法测定ZmMT1的浓度 | 第40-41页 |
3.3.5 制备apo-ZmMT1溶液 | 第41页 |
3.3.6 ZmMT1与不同金属离子的结合性质探究 | 第41页 |
3.3.7 ZmMT1与DTNB氧化速率的探究 | 第41-42页 |
3.4 实验结果 | 第42-49页 |
3.4.1 ZmMT1对不同金属离子耐受性研究 | 第42-44页 |
3.4.2 不同金属离子对ZmMT1的诱导表达 | 第44页 |
3.4.3 ZmMT1的浓度确定 | 第44-45页 |
3.4.4 UV光谱法探究不同金属离子滴定apo-ZmMT | 第45-48页 |
3.4.5 ZmMT1与DTNB氧化速率的探究 | 第48-49页 |
3.5 本章小结 | 第49-51页 |
第四章 硫离子对ZmMT1金属离子结合性质影响 | 第51-59页 |
4.1 引言 | 第51页 |
4.2 实验部分 | 第51-53页 |
4.2.1 主要实验试剂 | 第51-52页 |
4.2.2 主要实验仪器 | 第52页 |
4.2.3 常规试剂的配制 | 第52-53页 |
4.3 实验方法 | 第53-54页 |
4.3.1 硫离子存在条件下ZmMT1与不同金属离子的结合特性探究 | 第53页 |
4.3.2 不同硫离子浓度对ZmMT1与金属离子结合特性探究 | 第53页 |
4.3.3 不同滴加顺序对ZmMT1结合性质探究 | 第53-54页 |
4.4 实验结果 | 第54-58页 |
4.4.1 硫离子存在条件下ZmMT1与不同金属离子的结合性质探究 | 第54-56页 |
4.4.2 不同硫离子浓度对apo-ZmMT1与金属离子结合特性探究 | 第56-57页 |
4.4.3 不同滴加顺序对ZmMT1结合性质探究 | 第57-58页 |
4.5 本章小结 | 第58-59页 |
第五章 ZmMT1与稀土离子相互作用研究 | 第59-67页 |
5.1 引言 | 第59-60页 |
5.2 实验部分 | 第60-61页 |
5.2.1 主要实验试剂 | 第60页 |
5.2.2 主要实验仪器 | 第60页 |
5.2.3 常规试剂的配制 | 第60-61页 |
5.3 实验方法 | 第61-62页 |
5.3.1 ZmMT1对不同稀土离子耐受性测定 | 第61页 |
5.3.2 不同稀土离子对ZmMT1的诱导表达 | 第61页 |
5.3.3 紫外光谱法探究ZmMT1与不同稀土离子的相互作用 | 第61-62页 |
5.4 实验结果 | 第62-65页 |
5.4.1 ZmMT1对不同稀土离子耐受性研究 | 第62页 |
5.4.2 不同金属离子对ZmMT1的诱导表达 | 第62-63页 |
5.4.3 Apo-ZmMT1与不同稀土离子的相互作用 | 第63-65页 |
5.5 本章小结 | 第65-67页 |
第六章 总结与展望 | 第67-69页 |
6.1 总结 | 第67-68页 |
6.2 展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
致谢 | 第77-79页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第79页 |