摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
第一章 文献综述 | 第7-18页 |
1.1 白念珠菌简介 | 第7-8页 |
1.2 溶质运载蛋白家族(SLC) | 第8-11页 |
1.2.1 溶质运载蛋白家族(SLC)概述 | 第8-10页 |
1.2.2 第10 个溶质运载蛋白家族(SLC10)及其成员 | 第10-11页 |
1.3 细胞内钙离子稳态及其信号通路 | 第11-13页 |
1.3.1 细胞内钙离子稳态 | 第11-12页 |
1.3.2 钙调磷酸酶信号途径 | 第12-13页 |
1.4 白念珠菌RCH1 基因 | 第13-16页 |
1.4.1 白念珠菌RCH1 基因简介 | 第13-15页 |
1.4.2 白念珠菌RCH1 基因已有研究 | 第15-16页 |
1.5 本文研究的内容与意义 | 第16-18页 |
1.5.1 研究的内容 | 第16-17页 |
1.5.2 研究的意义 | 第17-18页 |
第二章 实验材料与方法 | 第18-32页 |
2.1 实验材料 | 第18-24页 |
2.1.1 菌株 | 第18-19页 |
2.1.2 质粒和引物 | 第19-20页 |
2.1.3 实验仪器 | 第20-21页 |
2.1.4 主要的生化试剂及其来源 | 第21-22页 |
2.1.5 常用试剂的配方 | 第22-23页 |
2.1.6 培养基配方 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-32页 |
2.2.1 大肠杆菌、酵母菌和白念珠菌的培养与菌种保存 | 第24-25页 |
2.2.2 质粒或连接体系转化到E. coli 感受态细胞 | 第25页 |
2.2.3 SDS 碱裂解法小量提取质粒DNA | 第25-26页 |
2.2.4 玻璃珠法提取酵母或白念珠菌的基因组DNA | 第26页 |
2.2.5 DNA 片段的切胶纯化 | 第26-27页 |
2.2.6 乙醇沉淀DNA 片段 | 第27页 |
2.2.7 PCR 扩增DNA 片段原理与方法 | 第27-28页 |
2.2.8 白念珠菌基因组提取方法 | 第28页 |
2.2.9 白念珠菌细胞的转化 | 第28-29页 |
2.2.10 倍比稀释实验 | 第29页 |
2.2.11 白念珠菌毒力实验 | 第29-30页 |
2.2.12 网络信息搜集方法 | 第30-32页 |
第三章 实验过程与结果讨论 | 第32-61页 |
3.1 RCH1 生物信息学分析 | 第32-33页 |
3.2 白念珠菌rch1Δ/rch1Δ缺失株与pmc1Δ/pmc1Δ缺失株表型的相似性 | 第33-34页 |
3.3 环孢霉素A 可以抑制rch1Δ/rch1Δ缺失株对钙离子敏感的表型 | 第34-35页 |
3.4 胞外Mg~(2+)能够抑制rch1Δ/rch1Δ缺失株对Ca~(2+)的敏感 | 第35-36页 |
3.5 白念珠菌pmc1Δ/pmc1Δrch1Δ/rch1Δ双基因缺失株的构建 | 第36-44页 |
3.5.1 DWCA14 系列菌株及其检测 | 第38-39页 |
3.5.2 DWCA15 系列菌株及其检测 | 第39-40页 |
3.5.3 DWCA16 系列菌株及其检测 | 第40-43页 |
3.5.4 DWCA17 系列菌株及其检测 | 第43-44页 |
3.6 白念珠菌pmc1Δ/pmc1Δrch1Δ/rch1Δ双基因缺失株的表型实验 | 第44-45页 |
3.7 白念珠菌pmc1Δ/pmc1Δrch1Δ/rch1Δ双基因缺失株的形态学研究 | 第45-49页 |
3.8 白念珠菌pmc1Δ/pmc1Δrch1Δ/rch1Δ双基因缺失株小鼠毒力研究 | 第49-51页 |
3.9 白念珠菌RCH1 基因与PMC1 基因的功能互补实验 | 第51-55页 |
3.9.1 pCK1-RCH1 质粒的构建 | 第51-54页 |
3.9.2 白念珠菌RCH1 基因与PMC1 基因的功能互补实验 | 第54-55页 |
3.10 讨论 | 第55-61页 |
3.10.1 本论文总结 | 第55-56页 |
3.10.2 真菌耐药性与胞内钙离子稳态 | 第56-61页 |
参考文献 | 第61-64页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第64-65页 |
附录 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |