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白念珠菌CaRCH1基因的功能研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
第一章 文献综述第7-18页
    1.1 白念珠菌简介第7-8页
    1.2 溶质运载蛋白家族(SLC)第8-11页
        1.2.1 溶质运载蛋白家族(SLC)概述第8-10页
        1.2.2 第10 个溶质运载蛋白家族(SLC10)及其成员第10-11页
    1.3 细胞内钙离子稳态及其信号通路第11-13页
        1.3.1 细胞内钙离子稳态第11-12页
        1.3.2 钙调磷酸酶信号途径第12-13页
    1.4 白念珠菌RCH1 基因第13-16页
        1.4.1 白念珠菌RCH1 基因简介第13-15页
        1.4.2 白念珠菌RCH1 基因已有研究第15-16页
    1.5 本文研究的内容与意义第16-18页
        1.5.1 研究的内容第16-17页
        1.5.2 研究的意义第17-18页
第二章 实验材料与方法第18-32页
    2.1 实验材料第18-24页
        2.1.1 菌株第18-19页
        2.1.2 质粒和引物第19-20页
        2.1.3 实验仪器第20-21页
        2.1.4 主要的生化试剂及其来源第21-22页
        2.1.5 常用试剂的配方第22-23页
        2.1.6 培养基配方第23-24页
    2.2 实验方法第24-32页
        2.2.1 大肠杆菌、酵母菌和白念珠菌的培养与菌种保存第24-25页
        2.2.2 质粒或连接体系转化到E. coli 感受态细胞第25页
        2.2.3 SDS 碱裂解法小量提取质粒DNA第25-26页
        2.2.4 玻璃珠法提取酵母或白念珠菌的基因组DNA第26页
        2.2.5 DNA 片段的切胶纯化第26-27页
        2.2.6 乙醇沉淀DNA 片段第27页
        2.2.7 PCR 扩增DNA 片段原理与方法第27-28页
        2.2.8 白念珠菌基因组提取方法第28页
        2.2.9 白念珠菌细胞的转化第28-29页
        2.2.10 倍比稀释实验第29页
        2.2.11 白念珠菌毒力实验第29-30页
        2.2.12 网络信息搜集方法第30-32页
第三章 实验过程与结果讨论第32-61页
    3.1 RCH1 生物信息学分析第32-33页
    3.2 白念珠菌rch1Δ/rch1Δ缺失株与pmc1Δ/pmc1Δ缺失株表型的相似性第33-34页
    3.3 环孢霉素A 可以抑制rch1Δ/rch1Δ缺失株对钙离子敏感的表型第34-35页
    3.4 胞外Mg~(2+)能够抑制rch1Δ/rch1Δ缺失株对Ca~(2+)的敏感第35-36页
    3.5 白念珠菌pmc1Δ/pmc1Δrch1Δ/rch1Δ双基因缺失株的构建第36-44页
        3.5.1 DWCA14 系列菌株及其检测第38-39页
        3.5.2 DWCA15 系列菌株及其检测第39-40页
        3.5.3 DWCA16 系列菌株及其检测第40-43页
        3.5.4 DWCA17 系列菌株及其检测第43-44页
    3.6 白念珠菌pmc1Δ/pmc1Δrch1Δ/rch1Δ双基因缺失株的表型实验第44-45页
    3.7 白念珠菌pmc1Δ/pmc1Δrch1Δ/rch1Δ双基因缺失株的形态学研究第45-49页
    3.8 白念珠菌pmc1Δ/pmc1Δrch1Δ/rch1Δ双基因缺失株小鼠毒力研究第49-51页
    3.9 白念珠菌RCH1 基因与PMC1 基因的功能互补实验第51-55页
        3.9.1 pCK1-RCH1 质粒的构建第51-54页
        3.9.2 白念珠菌RCH1 基因与PMC1 基因的功能互补实验第54-55页
    3.10 讨论第55-61页
        3.10.1 本论文总结第55-56页
        3.10.2 真菌耐药性与胞内钙离子稳态第56-61页
参考文献第61-64页
发表论文和参加科研情况说明第64-65页
附录第65-66页
致谢第66页

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