中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12-15页 |
研究现状、成果 | 第12-14页 |
研究目的、方法 | 第14-15页 |
一、miR-101抑制HSV-1的复制 | 第15-26页 |
1.1 材料和方法 | 第15-22页 |
1.1.1 实验材料 | 第15-16页 |
1.1.2 实验方法 | 第16-22页 |
1.2 结果 | 第22-26页 |
1.2.1 miR-101抑制了HSV-1的抑制 | 第22-26页 |
二、miR-101靶基因的筛选及验证 | 第26-41页 |
2.1 材料和方法 | 第26-35页 |
2.1.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.2 实验方法 | 第27-35页 |
2.2 结果 | 第35-41页 |
2.2.1 EGFP荧光报告载体的构建 | 第35-37页 |
2.2.2 EGFP荧光报告载体实验验证ATP5B是miR-101的直接作用靶基因 | 第37-38页 |
2.2.3 检测ATP5B基因mRNA及蛋白水平在转染pcDNA3/pri-miR-101或者miR-101 ASO的HeLa细胞中的差异表达 | 第38-39页 |
2.2.4 western blot验证pCDNA3/ ATP5B的表达 | 第39页 |
2.2.5 病毒滴度空斑形成实验验证ATP5B挽救了miR-101对HSV-1复制的抑制作用 | 第39-41页 |
三、在宫颈癌细胞中敲降ATP5B抑制HSV-1的复制 | 第41-46页 |
3.1 材料和方法 | 第41-42页 |
3.1.1 实验材料 | 第41页 |
3.1.2 实验方法 | 第41-42页 |
3.2 结果 | 第42-46页 |
3.2.1 表达ATP5B-siRNA的质粒pSilencer/si- ATP5B的构建和验证 | 第42-43页 |
3.2.2 pSilencer/si- ATP5B质粒有效性的验证 | 第43-44页 |
3.2.3 MTT检测分析ATP5B对宫颈癌细胞生长活性的影响 | 第44页 |
3.2.4 病毒滴定实验分析ATP5B对单纯疱疹病毒复制能力的影响 | 第44-45页 |
3.2.5 Real-Time PCR方法检测在转染了pSilencer/si- ATP5B的HeLa细胞感染HSV-1后HSV-1 DNA pol基因的水平的改变 | 第45-46页 |
四、HSV-1感染后miR-101和ATP5B表达水平的变化 | 第46-48页 |
4.1 材料和方法 | 第46页 |
4.1.1 实验材料 | 第46页 |
4.1.2 实验方法 | 第46页 |
4.2 结果 | 第46-48页 |
4.2.1 在HSV-1感染的宫颈癌细胞中ATP5B和miR-101的表达水平呈现负相关的同步改变 | 第46-48页 |
讨论 | 第48-52页 |
小结 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第57-58页 |
综述 microRNA与病毒 | 第58-65页 |
综述参考文献 | 第62-65页 |
致谢 | 第65页 |