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TIPE2在白血病细胞中的表达及其功能研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
缩略词表第10-12页
引言第12-14页
第一部分 TNFAIP8 家族基因在白血病患者 PBMC 标本中的表达分析第14-26页
   ·前言第14页
   ·材料第14-15页
     ·主要试剂第14页
     ·仪器设备第14-15页
   ·方法第15-21页
     ·引物设计第15页
     ·白血病患者及健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)标本的采集第15-16页
     ·标本外周血单个核细胞(PBMC)总 RNA 的提取第16-17页
     ·RT-PCR 扩增 TNFAIP8 家族基因第17-18页
     ·回收目的基因片段第18页
     ·连接反应第18页
     ·感受态细胞的制备第18-20页
     ·转化第20页
     ·挑取及鉴定克隆第20页
     ·半定量 Duplex PCR 检测 TIPE2 基因的表达量第20-21页
     ·实时荧光定量 PCR 检测 TNFAIP8 家族基因的表达量第21页
     ·统计学分析方法第21页
   ·结果第21-24页
     ·TNFAIP8 家族基因的扩增第21-22页
     ·TIPE2 PCR 产物与 T 载体连接的测序结果第22页
     ·TIPE2 的半定量 Duplex PCR 结果第22-23页
     ·TIPE2 的定量 PCR 结果分析第23-24页
   ·讨论第24-26页
第二部分 TIPE2 基因沉默载体的构建及其对 Jurkat 细胞的影响第26-46页
   ·前言第26-27页
   ·材料及试剂第27-31页
     ·主要试剂第27页
     ·仪器设备第27-28页
     ·主要溶液的配制第28-31页
   ·方法第31-37页
     ·基因沉默功能序列设计与合成第31页
     ·TIPE2 基因沉默载体的构建第31-33页
     ·细胞培养和转染第33-34页
     ·BCA 法测定蛋白质浓度第34页
     ·SDS-PAGE 凝胶电泳第34-35页
     ·免疫印迹杂交第35-36页
     ·WST 细胞生长曲线第36页
     ·流式细胞术检测细胞周期第36页
     ·流式细胞术检测细胞凋亡第36-37页
   ·结果第37-43页
     ·测序结果第37页
     ·TIPE2 基因沉默的 PCR、免疫印迹验证结果第37-38页
     ·TIPE2 的定量 PCR 结果分析第38页
     ·Image pro plus 6 软件对细胞体积的分析第38-39页
     ·WST 检测 TIPE2 基因沉默对 Jurkat 细胞生长情况的影响第39-40页
     ·TNFAIP8 家族其它成员 mRNA 表达检测第40页
     ·流式细胞仪检测细胞周期第40-41页
     ·流式细胞仪检测细胞的凋亡第41-42页
     ·Western blot 分析结果第42-43页
   ·讨论第43-46页
结论第46-48页
参考文献第48-50页
第四部分 文献综述第50-60页
 一、TNFAIP8 家族的特点第50-51页
 二、TIPE 的生物学功能第51-55页
 三、TIPE1 的生物功能第55页
 四、TIPE2 的生物功能第55-57页
 五、小结第57页
 参考文献第57-60页
致谢第60-61页
在读期间发表的学术论文及研究成果第61-62页

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