中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
縮略语/符号说明 | 第13-14页 |
前言 | 第14-18页 |
研究现状、成果 | 第14-16页 |
研究目的、方法 | 第16-18页 |
一、CYP1B1对紫杉醇细胞毒效应的影响 | 第18-31页 |
1.1 材料与方法 | 第18-25页 |
1.1.1 实验材料 | 第18页 |
1.1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
1.1.3 实验仪器 | 第19页 |
1.1.4 相关试剂配制 | 第19-21页 |
1.1.5 TCDD诱导乳腺癌细胞系MCF-7表达CYP1B1 | 第21页 |
1.1.6 MCF-7细胞CYP1B1表达水平的检测 | 第21-24页 |
1.1.7 紫杉醇对MCF-7的细胞毒效应观察 | 第24-25页 |
1.2 结果 | 第25-28页 |
1.2.1 TCDD对MCF-7细胞活性的影响 | 第25页 |
1.2.2 Real-Time PCR反应特异性鉴定 | 第25页 |
1.2.3 TCDD剂量依赖性诱导CYP1B1 mRNA水平的表达 | 第25-26页 |
1.2.4 TCDD的诱导剂量与CYP1B1蛋白表达水平的相关性 | 第26-27页 |
1.2.5 紫杉醇作用MCF-7后CYP1B1 mRNA的表达情况 | 第27页 |
1.2.6 紫杉醇对乳腺癌细胞系MCF-7的细胞毒效应 | 第27-28页 |
1.3 讨论 | 第28-30页 |
1.4 小结 | 第30-31页 |
二、CYP1B1的克隆及真核表达载体的构建 | 第31-42页 |
2.1 材料与方法 | 第31-36页 |
2.1.1 实验材料 | 第31页 |
2.1.2 实验试剂 | 第31-32页 |
2.1.3 实验仪器 | 第32页 |
2.1.4 相关试剂配制 | 第32-33页 |
2.1.5 CYP1B1目的基因的克隆 | 第33-34页 |
2.1.6 重组真核表达载体的构建 | 第34-36页 |
2.1.7 重组真核表达载体pIRES2-EGFP-CYP1B1的鉴定 | 第36页 |
2.2 结果 | 第36-39页 |
2.2.1 CYP1B1目的基因的构建 | 第36-37页 |
2.2.2 CYP1B1目的基因和表达载体pIRES2-EGFP双酶切产物的鉴定 | 第37-38页 |
2.2.3 EcoR Ⅰ酶切真核表达载体pIRES2-EGFP-CYP1B1产物的鉴定 | 第38-39页 |
2.2.4 重组质粒测序结果 | 第39页 |
2.3 讨论 | 第39-41页 |
2.4 小结 | 第41-42页 |
三、CYP1B1免疫组化诊断试剂的研制及初步应用 | 第42-50页 |
3.1 材料与方法 | 第42-45页 |
3.1.1 实验材料 | 第42页 |
3.1.2 实验试剂 | 第42-43页 |
3.1.3 实验仪器 | 第43页 |
3.1.4 免疫血清的制备 | 第43-44页 |
3.1.5 肿瘤组织中CYP1B1免疫组化检测方法的建立及初步应用 | 第44-45页 |
3.2 结果 | 第45-47页 |
3.2.1 免疫血清的抗体效价 | 第45-46页 |
3.2.2 免疫组化染色方法的优化与建立 | 第46页 |
3.2.3 临床初步应用实验结果 | 第46-47页 |
3.3 讨论 | 第47-49页 |
3.4 小结 | 第49-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第55-57页 |
综述 | 第57-71页 |
综述参考文献 | 第66-71页 |
致谢 | 第71页 |