| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1 组织工程角膜基质载体支架种类 | 第13-17页 |
| 1.1 天然材料 | 第13-16页 |
| 1.1.1 胶原及其衍生物 | 第13-14页 |
| 1.1.2 壳聚糖 | 第14页 |
| 1.1.3 纤维蛋白 | 第14-15页 |
| 1.1.4 透明质酸 | 第15页 |
| 1.1.5 丝素蛋白 | 第15页 |
| 1.1.6 脱细胞角膜基质 | 第15-16页 |
| 1.1.7 自分泌细胞外基质 | 第16页 |
| 1.2 人工合成可降解高分子材料 | 第16-17页 |
| 1.2.1 聚羟基乙酸 | 第16页 |
| 1.2.2 聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物 | 第16-17页 |
| 1.3 复合材料 | 第17页 |
| 2 角膜基质脱细胞方法的研究进展 | 第17-22页 |
| 2.1 物理方法 | 第18-19页 |
| 2.1.1 高压 | 第18页 |
| 2.1.2 反复冻融 | 第18页 |
| 2.1.3 机械震荡 | 第18-19页 |
| 2.2 化学方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 酸、碱处理 | 第19页 |
| 2.2.2 去污剂处理 | 第19-20页 |
| 2.2.3 高渗溶液、低渗溶液处理法 | 第20页 |
| 2.2.4 醇类处理法 | 第20-21页 |
| 2.2.5 螯合剂处理 | 第21页 |
| 2.3 生物方法 | 第21-22页 |
| 2.3.1 酶消化法 | 第21页 |
| 2.3.2 血清脱细胞法 | 第21-22页 |
| 3 脱细胞角膜基质检测方法 | 第22-24页 |
| 3.1 脱细胞效果的检测 | 第22页 |
| 3.2 支架理化性能的检测 | 第22-23页 |
| 3.3 支架生物相容性检测 | 第23-24页 |
| 第二章 脱细胞猪角膜基质支架的制备及鉴定 | 第24-37页 |
| 1 材料与用品 | 第24-27页 |
| 1.1 实验材料 | 第24页 |
| 1.2 主要仪器 | 第24页 |
| 1.3 实验试剂 | 第24-25页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第25-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.1 脱细胞猪角膜基质支架的制备 | 第27页 |
| 2.1.1 猪角膜的取材 | 第27页 |
| 2.1.2 猪角膜的脱细胞处理与保存 | 第27页 |
| 2.2 脱细胞猪角膜基质理化性质检测 | 第27-28页 |
| 2.2.1 外观观察 | 第27页 |
| 2.2.2 透光率 | 第27页 |
| 2.2.3 含水量 | 第27-28页 |
| 2.3 脱细胞猪角膜基质组织结构学检测 | 第28页 |
| 2.3.1 石蜡切片与 HE 染色 | 第28页 |
| 2.3.2 透射电镜观察 | 第28页 |
| 2.4 脱细胞猪角膜基质成分分析 | 第28-29页 |
| 2.4.1 冰冻切片与 DAPI 染色 | 第28-29页 |
| 2.4.2 DNA 含量检测 | 第29页 |
| 2.4.3 阿利新兰染色 | 第29页 |
| 3 结果 | 第29-35页 |
| 3.1 脱细胞猪角膜基质的理化性质 | 第29-31页 |
| 3.1.1 外观观察 | 第29-30页 |
| 3.1.2 透光率 | 第30页 |
| 3.1.3 含水量 | 第30-31页 |
| 3.2 脱细胞猪角膜基质的组织结构 | 第31-32页 |
| 3.2.1 脱细胞猪角膜基质 HE 染色结果 | 第31-32页 |
| 3.2.2 透射电镜观察结果 | 第32页 |
| 3.3 脱细胞猪角膜基质的成分 | 第32-35页 |
| 3.3.1 脱细胞猪角膜基质 DAPI 染色结果 | 第32-33页 |
| 3.3.2 DNA 定量检测结果 | 第33-34页 |
| 3.3.3 脱细胞猪角膜基质阿利新兰染色结果 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 人角膜基质细胞的培养及其鉴定 | 第37-47页 |
| 1 材料与用品 | 第37-39页 |
| 1.1 实验材料 | 第37页 |
| 1.2 主要仪器 | 第37-38页 |
| 1.3 实验试剂 | 第38页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第38-39页 |
| 2 实验方法 | 第39-41页 |
| 2.1 人角膜基质细胞的复苏和体外传代培养 | 第39页 |
| 2.2 人角膜基质细胞系细胞生长特性测定 | 第39-40页 |
| 2.3 人角膜基质细胞免疫化学检测 | 第40-41页 |
| 3 结果 | 第41-44页 |
| 3.1 人角膜基质细胞的传代培养及形态观察 | 第41页 |
| 3.2 人角膜基质细胞生长特性 | 第41-42页 |
| 3.3 人角膜基质细胞标志及功能蛋白表达 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 5 本章小结 | 第46-47页 |
| 第四章 脱细胞猪角膜基质支架的生物相容性研究 | 第47-62页 |
| 1 材料与用品 | 第47-50页 |
| 1.1 实验材料 | 第47页 |
| 1.2 主要仪器 | 第47-48页 |
| 1.3 实验试剂 | 第48页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第48-50页 |
| 2 实验方法 | 第50-52页 |
| 2.1 浸提液对人角膜基质细胞活力影响作用分析 | 第50-51页 |
| 2.1.1 浸提液制备 | 第50页 |
| 2.1.2 形态学观察 | 第50页 |
| 2.1.3 增殖能力检测 | 第50-51页 |
| 2.2 细胞在支架内分布与增长情况检测 | 第51-52页 |
| 2.2.1 接种人角膜基质细胞前脱细胞猪角膜基质的处理 | 第51页 |
| 2.2.2 人角膜基质细胞的 DiI 标记 | 第51页 |
| 2.2.3 人角膜基质细胞的接种 | 第51页 |
| 2.2.4 支架接种细胞后体外培养 | 第51页 |
| 2.2.5 石蜡切片与 HE 染色 | 第51页 |
| 2.2.6 冰冻切片与 DiI 荧光观察 | 第51页 |
| 2.2.7 免疫化学检测 | 第51-52页 |
| 2.2.8 透射电镜检测 | 第52页 |
| 3 结果 | 第52-59页 |
| 3.1 浸提液对人角膜基质细胞活力影响作用 | 第52-54页 |
| 3.1.1 细胞形态学评价 | 第52-53页 |
| 3.1.2 增殖能力检测结果 | 第53-54页 |
| 3.2 细胞在支架内分布与增长情况 | 第54-59页 |
| 3.2.1 细胞在支架内的定位分布 | 第54-55页 |
| 3.2.2 免疫化学检测结果 | 第55-59页 |
| 3.2.3 透射电镜检测结果 | 第59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 5 本章小结 | 第61-62页 |
| 全文总结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 个人简历 | 第70页 |
| 在学期间发表的学术论文及专利 | 第70-71页 |