| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略语/符号说明 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-17页 |
| 研究现状、成果 | 第14-16页 |
| 研究目的、方法 | 第16-17页 |
| 材料与方法 | 第17-36页 |
| 1. 主要实验仪器 | 第17页 |
| 2. 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1 组织芯片标本来源 | 第17-18页 |
| 2.2 细胞系 | 第18页 |
| 2.3 探针、引物、DNA合成序列及重组质粒 | 第18页 |
| 2.4 主要试剂 | 第18-19页 |
| 3. 实验方法 | 第19-36页 |
| 3.1 组织标本实验 | 第19-22页 |
| 3.1.1 人脑胶质瘤组织微阵列制备 | 第19页 |
| 3.1.2 锁定管核苷酸探针原位杂交 | 第19-21页 |
| 3.1.3 免疫组织化学染色 | 第21页 |
| 3.1.4 阳性结果判定 | 第21-22页 |
| 3.2 miR-146b-5p靶基因的预测和验证 | 第22-27页 |
| 3.2.1 生物信息学预测 | 第22页 |
| 3.2.2 荧光素酶实验 | 第22-27页 |
| 3.3 体外细胞学实验 | 第27-35页 |
| 3.3.1 稳定表达miR-146b-5p级无意义对照序列的亚细胞系的构建 | 第27-29页 |
| 3.3.2 各亚细胞系MMP16及MMP2表达水平的检测 | 第29-31页 |
| 3.3.3 明胶酶谱实验 | 第31-32页 |
| 3.3.4 体外迁移侵袭实验 | 第32-33页 |
| 3.3.5 Matrigel 3D培养 | 第33页 |
| 3.3.6 凋亡细胞检测 | 第33-35页 |
| 3.3.7 细胞周期检测 | 第35页 |
| 3.4 统计学方法 | 第35-36页 |
| 结果 | 第36-50页 |
| 1. 对照组及各胶质瘤组miR-146b-5p表达的检测结果 | 第36-37页 |
| 2. 对照组及各胶质瘤组MMP16表达的检测结果 | 第37-38页 |
| 3. miR-146b-5p靶基因的筛选 | 第38-40页 |
| 3.1 生物信息学预测结果 | 第38-39页 |
| 3.2 荧光素酶实验结果 | 第39-40页 |
| 3.2.1 重组荧光素酶报告基因表达质粒的构建 | 第39页 |
| 3.2.2 不同转染组胶质瘤细胞荧光素酶活性检测结果 | 第39-40页 |
| 4. 稳定过表达miR-146b-5p的恶性胶质瘤亚细胞系的筛选和鉴定 | 第40-41页 |
| 5. 各亚细胞系MMP16表达水平的检测 | 第41-42页 |
| 6. miR-146b-5p可抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力 | 第42-45页 |
| 6.1 各胶质瘤亚细胞系明胶酶谱的检测结果 | 第42-43页 |
| 6.2 各胶质瘤亚细胞系迁移和侵袭能力的比较 | 第43-44页 |
| 6.3 U87MG和SNB19各亚细胞系Matrigel 3D培养结果 | 第44-45页 |
| 7. 各胶质瘤亚细胞系凋亡水平的比较 | 第45-48页 |
| 7.1 各胶质瘤亚细胞系迁移和侵袭能力的比较 | 第45-46页 |
| 7.2 U87MG、SNB19及TJ905各亚细胞系凋亡细胞FCM检测结果 | 第46-48页 |
| 8. 胶质瘤各亚细胞系细胞周期分别的比较 | 第48-50页 |
| 讨论 | 第50-55页 |
| 1. miR-146b-5p是重要的胶质瘤抑癌miRNA | 第50页 |
| 2. MMP16是miR-146b-5p的天然靶基因 | 第50-51页 |
| 3. miR-146b-5p可特异性敲低MMP16的表达 | 第51页 |
| 4. miR-146b-5p可通过下调MMP16表达抑制恶性胶质瘤细胞侵袭迁移 | 第51-53页 |
| 5. miR-146b-5p对胶质瘤细胞凋亡和细胞周期分布的影响 | 第53-54页 |
| 6. 结束语 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第59-60页 |
| 综述 miRNA和基质金属蛋白酶与肿瘤转移的关系 | 第60-71页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
