| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-41页 |
| 1.1 马立克氏病 | 第13-14页 |
| 1.2 MD的病原学 | 第14-28页 |
| 1.2.1 MDV及其分类 | 第14页 |
| 1.2.2 MDV的基因组 | 第14-15页 |
| 1.2.3 MDV编码的蛋白与功能 | 第15-23页 |
| 1.2.4 MDV生活周期及致病进程 | 第23-26页 |
| 1.2.5 MDV进化及毒力增强 | 第26-28页 |
| 1.3 MDV编码的miRNA及功能 | 第28-39页 |
| 1.3.1 病毒编码的miRNA概述 | 第28页 |
| 1.3.2 病毒miRNA的功能 | 第28-34页 |
| 1.3.3 MDV编码的miRNA | 第34-39页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第39-41页 |
| 第二章 MDV-1 miRNA在病毒感染及致瘤过程中的动态基因表达谱 | 第41-55页 |
| 2.1 材料和方法 | 第41-45页 |
| 2.1.1 毒株、菌株和SPF鸡胚 | 第41页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 2.1.3 引物设计与合成 | 第41-43页 |
| 2.1.4 CEF制备 | 第43页 |
| 2.1.5 MDV的增殖及效价测定 | 第43页 |
| 2.1.6 动物攻毒实验 | 第43页 |
| 2.1.7 病料采集 | 第43页 |
| 2.1.8 RNA提取 | 第43-44页 |
| 2.1.9 去除基因组DNA | 第44页 |
| 2.1.10 Poly(A)加尾及cDNA合成 | 第44页 |
| 2.1.11 qPCR | 第44-45页 |
| 2.1.12 数据分析 | 第45页 |
| 2.2 结果与分析 | 第45-53页 |
| 2.2.1 MDV的增殖及攻毒实验结果 | 第45页 |
| 2.2.2 RNA提取结果 | 第45-48页 |
| 2.2.3 MDV-1 蛋白编码基因gB、ICP4、pp38和meq的相对表达水平 | 第48-50页 |
| 2.2.4 26个MDV-1 miRNA的体内动态基因表达谱 | 第50-53页 |
| 2.3 讨论 | 第53-55页 |
| 第三章 MDV-1 miRNA对MDV蛋白编码基因的自我调控作用 | 第55-86页 |
| 3.1 材料和方法 | 第55-65页 |
| 3.1.1 软件和数据库 | 第55页 |
| 3.1.2 miRNA候选靶基因的预测方法 | 第55页 |
| 3.1.3 毒株、细胞和载体 | 第55页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第55页 |
| 3.1.5 引物设计与合成 | 第55-56页 |
| 3.1.6 载体的构建与鉴定 | 第56-58页 |
| 3.1.7 双荧光素酶报告实验 | 第58页 |
| 3.1.8 MDV感染CEF及样品采集 | 第58-64页 |
| 3.1.9 RNA提取 | 第64页 |
| 3.1.10 cDNA合成 | 第64页 |
| 3.1.11 qPCR | 第64-65页 |
| 3.1.12 数据分析 | 第65页 |
| 3.2 结果与分析 | 第65-83页 |
| 3.2.1 MDV-1 miRNA的病毒自身候选靶基因的预测分析结果 | 第65-70页 |
| 3.2.2 MDV-1 miRNA调控病毒自身靶基因的鉴定结果 | 第70-79页 |
| 3.2.3 MDV-1 miRNA对病毒靶基因的体内调控作用分析结果 | 第79-83页 |
| 3.3 讨论 | 第83-86页 |
| 3.3.1 RNAhybrid可有效用于MDV-1 miRNA的候选靶基因预测和分析 | 第83页 |
| 3.3.2 双荧光素酶报告实验是鉴定miRNA靶基因的有效方法 | 第83-84页 |
| 3.3.3 多个MDV-1 miRNA共同调节MDV-1 最重要致癌基因meq | 第84-86页 |
| 全文总结 | 第86-87页 |
| 创新 点 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-100页 |
| 致谢 | 第100-102页 |
| 作者简介 | 第102页 |
