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马立克氏病病毒miRNA的体内动态表达谱及对病毒基因的自我调控

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 文献综述第13-41页
    1.1 马立克氏病第13-14页
    1.2 MD的病原学第14-28页
        1.2.1 MDV及其分类第14页
        1.2.2 MDV的基因组第14-15页
        1.2.3 MDV编码的蛋白与功能第15-23页
        1.2.4 MDV生活周期及致病进程第23-26页
        1.2.5 MDV进化及毒力增强第26-28页
    1.3 MDV编码的miRNA及功能第28-39页
        1.3.1 病毒编码的miRNA概述第28页
        1.3.2 病毒miRNA的功能第28-34页
        1.3.3 MDV编码的miRNA第34-39页
    1.4 本研究的目的和意义第39-41页
第二章 MDV-1 miRNA在病毒感染及致瘤过程中的动态基因表达谱第41-55页
    2.1 材料和方法第41-45页
        2.1.1 毒株、菌株和SPF鸡胚第41页
        2.1.2 主要试剂第41页
        2.1.3 引物设计与合成第41-43页
        2.1.4 CEF制备第43页
        2.1.5 MDV的增殖及效价测定第43页
        2.1.6 动物攻毒实验第43页
        2.1.7 病料采集第43页
        2.1.8 RNA提取第43-44页
        2.1.9 去除基因组DNA第44页
        2.1.10 Poly(A)加尾及cDNA合成第44页
        2.1.11 qPCR第44-45页
        2.1.12 数据分析第45页
    2.2 结果与分析第45-53页
        2.2.1 MDV的增殖及攻毒实验结果第45页
        2.2.2 RNA提取结果第45-48页
        2.2.3 MDV-1 蛋白编码基因gB、ICP4、pp38和meq的相对表达水平第48-50页
        2.2.4 26个MDV-1 miRNA的体内动态基因表达谱第50-53页
    2.3 讨论第53-55页
第三章 MDV-1 miRNA对MDV蛋白编码基因的自我调控作用第55-86页
    3.1 材料和方法第55-65页
        3.1.1 软件和数据库第55页
        3.1.2 miRNA候选靶基因的预测方法第55页
        3.1.3 毒株、细胞和载体第55页
        3.1.4 主要试剂第55页
        3.1.5 引物设计与合成第55-56页
        3.1.6 载体的构建与鉴定第56-58页
        3.1.7 双荧光素酶报告实验第58页
        3.1.8 MDV感染CEF及样品采集第58-64页
        3.1.9 RNA提取第64页
        3.1.10 cDNA合成第64页
        3.1.11 qPCR第64-65页
        3.1.12 数据分析第65页
    3.2 结果与分析第65-83页
        3.2.1 MDV-1 miRNA的病毒自身候选靶基因的预测分析结果第65-70页
        3.2.2 MDV-1 miRNA调控病毒自身靶基因的鉴定结果第70-79页
        3.2.3 MDV-1 miRNA对病毒靶基因的体内调控作用分析结果第79-83页
    3.3 讨论第83-86页
        3.3.1 RNAhybrid可有效用于MDV-1 miRNA的候选靶基因预测和分析第83页
        3.3.2 双荧光素酶报告实验是鉴定miRNA靶基因的有效方法第83-84页
        3.3.3 多个MDV-1 miRNA共同调节MDV-1 最重要致癌基因meq第84-86页
全文总结第86-87页
创新 点第87-88页
参考文献第88-100页
致谢第100-102页
作者简介第102页

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