摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-20页 |
·ΔFosB 基因的研究进展 | 第10-12页 |
·ΔFosB 基因结构及功能简介 | 第10-11页 |
·国内外研究进展 | 第11-12页 |
·ΔFosB 基因与乳腺中钙代谢的关系探讨 | 第12页 |
·原核表达载体的选择 | 第12-15页 |
·多克隆抗体的优点及制备原理 | 第15-19页 |
·抗体的概念 | 第15-17页 |
·多克隆抗体与单克隆抗体 | 第17-18页 |
·多克隆抗体制备的原理及检测方法 | 第18-19页 |
·本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
第二章 ΔFosB 基因原核表达载体的构建及初步表达 | 第20-30页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·菌株和质粒 | 第20页 |
·主要仪器及设备 | 第20页 |
·主要溶液的配制 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-26页 |
·ΔFosB 基因的获得 | 第21-24页 |
·pET 表达质粒的构建及鉴定 | 第24-25页 |
·ΔFosB 基因的小量诱导表达 | 第25页 |
·表达产物的SDS-PAGE 电泳分析 | 第25-26页 |
·结果与分析 | 第26-29页 |
·ΔFosB 基因的克隆 | 第26-27页 |
·克隆载体的构建与鉴定 | 第27页 |
·原核表达载体的构建及鉴定 | 第27页 |
·目的基因的表达及表达蛋白的初步鉴定 | 第27-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
第三章 ΔFosB 表达条件的优化、大量表达及纯化 | 第30-37页 |
·材料 | 第30-31页 |
·试剂 | 第30页 |
·主要溶液的配制 | 第30-31页 |
·主要仪器及设备 | 第31页 |
·方法 | 第31-33页 |
·目的蛋白表达条件的优化 | 第31-32页 |
·目的蛋白的大量表达及亲和纯化 | 第32页 |
·目的蛋白的大量纯化 | 第32-33页 |
·结果与分析 | 第33-36页 |
·表达条件的优化 | 第33-34页 |
·目的蛋白的Ni-Agrose 亲和层析纯化 | 第34-35页 |
·目的蛋白的大量纯化 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
第四章ΔFosB 多克隆抗体的制备及鉴定 | 第37-43页 |
·材料 | 第37-38页 |
·试剂 | 第37页 |
·主要溶液的配制 | 第37-38页 |
·主要仪器及设备 | 第38页 |
·方法 | 第38-40页 |
·乳化抗原 | 第38-39页 |
·免疫家兔 | 第39页 |
·检测抗体效价 | 第39页 |
·抗体特异性检测 | 第39-40页 |
·奶山羊ΔFosB 的组织差异表达分析 | 第40页 |
·结果与分析 | 第40-42页 |
·抗体效价检测 | 第40页 |
·抗体特异性分析 | 第40-41页 |
·ΔFosB 组织差异表达检测 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
第五章 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
作者简介 | 第50页 |