| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·草鱼出血病 | 第12-15页 |
| ·病原 | 第12-13页 |
| ·症状和病理变化 | 第13-14页 |
| ·诊断方法 | 第14页 |
| ·流行情况 | 第14页 |
| ·防治方法 | 第14-15页 |
| ·基因表达研究中内参基因的选择 | 第15-18页 |
| ·实时定量RT-PCR(quantitative real-time RT-PCR) | 第15-17页 |
| ·内参基因的选择以及在水产动物中的研究进展 | 第17-18页 |
| ·Toll 样受体及其信号传导中的接头分子研究进展 | 第18-22页 |
| ·硬骨鱼类先天性免疫概述 | 第18-19页 |
| ·Toll 样受体及其接头蛋白MyD88 研究进展 | 第19-22页 |
| ·本试验开展的目的和意义 | 第22-24页 |
| ·为研究草鱼不同组织以及病毒刺激条件下的基因表达提供合适的内参 | 第22页 |
| ·为鱼类抗病育种提供一些分子生物学基础 | 第22-24页 |
| 第二章 草鱼四种候选内参基因的稳定性研究 | 第24-40页 |
| ·材料与方法 | 第24-30页 |
| ·试验动物 | 第24页 |
| ·主要试验仪器和试剂 | 第24-25页 |
| ·RNA 提取和cDNA 模板第一链的合成 | 第25-26页 |
| ·草鱼EF1-α基因的克隆以及候选内参基因实时定量PCR 引物设计 | 第26-29页 |
| ·实时定量PCR | 第29页 |
| ·数据分析 | 第29-30页 |
| ·结果和分析 | 第30-37页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒GCRV 攻毒试验以及病毒检测 | 第30页 |
| ·草鱼总RNA 提取 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR 检测病鱼组织中的GCRV 病毒 | 第31页 |
| ·草鱼EF1-α基因片段的克隆与鉴定 | 第31-33页 |
| ·草鱼候选内参基因引物检测 | 第33页 |
| ·实时定量PCR 的扩增效率 | 第33-34页 |
| ·草鱼不同组织中候选内参基因表达稳定性 | 第34-36页 |
| ·呼肠孤病毒感染不同时期草鱼脾脏中候选内参基因表达稳定性研究 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-40页 |
| 第三章 草鱼髓样分化因子88 基因的克隆与表达 | 第40-55页 |
| ·材料与方法 | 第40-44页 |
| ·试验动物 | 第40页 |
| ·试验材料 | 第40页 |
| ·草鱼RNA 提取与cDNA 第一链的合成 | 第40页 |
| ·PCR 扩增片段TA 克隆以及菌液测序 | 第40页 |
| ·采用同源克隆方法以及RACE 法克隆草鱼MyD88 cDNA 全长 | 第40-43页 |
| ·草鱼MyD88 基因的生物信息学分析 | 第43页 |
| ·半定量RT-PCR 法检测目的基因的组织差异性表达 | 第43-44页 |
| ·实时定量PCR 法检测目的基因的表达 | 第44页 |
| ·结果和分析 | 第44-52页 |
| ·草鱼MyD88 cDNA 全长克隆 | 第44-48页 |
| ·草鱼MyD88 基因的生物信息学分析 | 第48-50页 |
| ·草鱼MyD88 基因在不同组织中差异性表达 | 第50-51页 |
| ·实时定量PCR 检测MyD88 基因在草鱼脾脏组织中的时序表达 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| 第四章 草鱼TLR9 基因的克隆以及组织差异性表达 | 第55-62页 |
| ·材料与方法 | 第55-57页 |
| ·试验动物 | 第55页 |
| ·试验材料 | 第55页 |
| ·草鱼RNA 提取与cDNA 第一链的合成 | 第55页 |
| ·扩增片段TA 克隆以及菌液测序 | 第55页 |
| ·草鱼TLR9 基因克隆 | 第55-56页 |
| ·草鱼TLR9 基因在不同组织中差异性表达 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-60页 |
| ·草鱼TLR9 片段的扩增 | 第57-59页 |
| ·草鱼TLR9 片段的同源性比对分析 | 第59页 |
| ·半定量RT-PCR 检测草鱼TLR9 的表达 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 第五章 结论 | 第62-63页 |
| ·草鱼内参基因比较研究 | 第62页 |
| ·草鱼髓样分化因子88 基因研究 | 第62页 |
| ·草鱼Toll 样受体9 基因研究 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72页 |
