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Paecilomyces sp.FLH 30内切β-1,3(4)葡聚糖酶基因和Selenomonas ruminantium木糖苷酶基因在毕赤酵母中的表达

摘要第4-5页
Abstract第5页
英文缩略语表(Abbreviations)第10-11页
第1章 绪论第11-22页
    1.1 纤维素酶第11-12页
        1.1.1 纤维素酶的来源第11-12页
        1.1.2 纤维素酶系间的作用第12页
    1.2 葡聚糖酶第12-14页
        1.2.1 β-葡聚糖酶的性质及应用第13-14页
        1.2.2 β-葡聚糖酶的基因工程研究第14页
    1.3 半纤维素酶第14页
    1.4 木糖苷酶第14-16页
        1.4.1 木糖苷酶的性质及作用第15-16页
        1.4.2 木糖苷酶的基因工程研究第16页
    1.5 拟青霉属第16页
    1.6 反刍月形单胞菌第16-18页
        1.6.1 反刍月形单胞菌的亚种及生物化学反应特性的研究第17页
        1.6.2 S.ruminantium的生物学功能第17页
        1.6.3 影响S.ruminantium发挥作用的主要因素第17-18页
        1.6.4 S.ruminantium益生素研究的现状第18页
    1.7 巴斯德毕赤酵母表达系统第18-19页
        1.7.1 毕赤酵母表达系统的特点第18页
        1.7.2 毕赤酵母表达系统的分类第18-19页
    1.8 本试验的选题依据及主要研究内容第19-21页
        1.8.1 本试验的选题依据第19-20页
        1.8.2 本试验的主要研究内容第20-21页
    1.9 本试验的目的和意义第21-22页
第2章 源于Paecilomyces sp.FLH 30内切 β-1,3(4)葡聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达第22-52页
    2.1 材料第22-26页
        2.1.1 菌株与载体第22页
        2.1.2 主要工具酶、试剂及仪器设备第22-24页
        2.1.3 常用培养基及溶液的配制第24-26页
    2.2 方法第26-39页
        2.2.1 源于Paecilomyces sp. FLH 30葡聚糖酶基因的合成与优化第26页
        2.2.2 重组质粒的构建及鉴定第26-27页
        2.2.3 重组毕赤酵母的构建第27-30页
        2.2.4 重组酵母的鉴定第30-31页
        2.2.5 重组 β-1,3(4)葡聚糖酶在试管水平的诱导表达第31页
        2.2.6 重组 β-1,3(4)葡聚糖酶在摇瓶水平的诱导表达第31-32页
        2.2.7 重组 β-1,3(4)葡聚糖酶在 10 L发酵罐的高密度诱导表达第32-36页
        2.2.8 重组 β-1,3(4)葡聚糖酶活性的初步测定及纯化第36-38页
        2.2.9 重组 β-1,3(4)葡聚糖酶的酶学性质第38-39页
    2.3 结果与分析第39-50页
        2.3.1 源于Paecilomyces sp. FLH30葡聚糖酶基因的优化第39-42页
        2.3.2 重组质粒的酶切鉴定第42-43页
        2.3.3 重组酵母GS115的PCR鉴定第43页
        2.3.4 重组 β-1,3(4)葡聚糖酶活性的测定第43-45页
        2.3.5 重组 β-1,3(4)葡聚糖酶在 10 L发酵罐中的高密度培养第45-48页
        2.3.6 重组 β-1,3(4)葡聚糖酶的酶学性质第48-50页
    2.4 讨论第50-51页
    2.5 小结第51-52页
第3章 Selenomonas ruminantium木糖苷酶基因在毕赤酵母中的表达第52-73页
    3.1 材料第52页
        3.1.1 菌株与载体第52页
        3.1.2 主要工具酶及试剂第52页
        3.1.3 常用培养基及溶液的配制第52页
        3.1.4 主要仪器及设备第52页
    3.2 方法第52-59页
        3.2.1 源于Selenomonas ruminantium木糖苷酶基因的合成与优化第52页
        3.2.2 重组质粒的构建及鉴定第52-53页
        3.2.3 重组毕赤酵母的构建第53-54页
        3.2.4 重组酵母的鉴定第54页
        3.2.5 重组木糖苷酶在试管水平的诱导表达第54-55页
        3.2.6 重组木糖苷酶在摇瓶水平的诱导表达第55-56页
        3.2.7 重组木糖苷酶在 10 L发酵罐的高密度诱导表达第56页
        3.2.8 重组木糖苷酶活性的初步测定及纯化第56-58页
        3.2.9 重组木糖苷酶的酶学性质第58-59页
    3.3 结果与分析第59-71页
        3.3.1 源于Selenomonas ruminantium木糖苷酶基因的优化与合成第59-63页
        3.3.2 重组质粒的酶切鉴定第63-64页
        3.3.3 重组酵母GS115的PCR鉴定第64页
        3.3.4 重组木糖苷酶活性的测定第64-66页
        3.3.5 重组木糖苷酶在 10 L发酵罐中的高密度培养第66-69页
        3.3.6 重组木糖苷酶的酶学性质第69-71页
    3.4 讨论第71-72页
    3.5 小结第72-73页
第4章 重组酶对麦芽汁的水解过滤速率的测定第73-80页
    4.1 材料第73页
        4.1.1 菌株第73页
        4.1.2 试验材料第73页
        4.1.3 常用溶液的配制第73页
        4.1.4 主要仪器第73页
    4.2 方法第73-76页
        4.2.1 重组葡聚糖酶水解麦芽汁第73-74页
        4.2.2 重组木糖苷酶水解麦芽汁第74-75页
        4.2.3 过滤速率的测定第75-76页
    4.3 结果与分析第76-78页
        4.3.1 重组葡聚糖酶水解麦芽汁的过滤速率的测定第76-77页
        4.3.2 重组木糖苷酶水解麦芽汁的过滤速率的测定第77-78页
    4.4 讨论第78页
    4.5 小结第78-80页
第5章 结论与展望第80-82页
    5.1 结论第80页
    5.2 展望第80-82页
参考文献第82-96页
致谢第96-97页
作者简介第97页

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