个人简历 | 第3-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
前言 | 第12-16页 |
1 材料与仪器 | 第16-18页 |
1.1 实验材料 | 第16页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第16-18页 |
2 实验方法 | 第18-35页 |
2.1 过表达慢病毒载体构建 | 第18-19页 |
2.2 细胞培养 | 第19-20页 |
2.3 过表达细胞株的构建 | 第20-21页 |
2.4 稳定细胞株的鉴定 | 第21-26页 |
2.5 串联亲和纯化 | 第26-27页 |
2.6 银染 | 第27-28页 |
2.7 考马斯亮蓝染色 | 第28页 |
2.8 考马斯亮蓝染色后胶内酶解 | 第28-30页 |
2.9 酶解肽段的液相色谱分离 | 第30-31页 |
2.10 数据库搜索和蛋白鉴定 | 第31页 |
2.11 生物信息学分析 | 第31页 |
2.12 免疫共沉淀验证相互作用蛋白 | 第31-33页 |
2.13 CCK-8检测细胞增殖 | 第33-34页 |
2.14 统计学分析 | 第34-35页 |
3 实验结果 | 第35-45页 |
3.1 RSK4变异体RSK4m2和RSK4m3在转染的MDA-MB-231乳腺癌细胞中稳定表达 | 第35-37页 |
3.2 Strep Ⅱ/Flag-TAP技术分离纯化蛋白复合物联合质谱鉴定RSK | 第37-39页 |
3.3 RSK4 m2或RSK4m3相互作用蛋白组的生物信息学分析 | 第39-43页 |
3.4 免疫共沉淀(CO-IP)验证相互作用蛋白 | 第43-45页 |
讨论 | 第45-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
综述 | 第53-65页 |
参考文献 | 第61-65页 |
附录 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读硕士学位期间(待)发表的学术论文目录 | 第67页 |