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串联亲和纯化技术联合质谱鉴定RSK4变异体的相互作用蛋白

个人简历第3-6页
中文摘要第6-8页
英文摘要第8-11页
前言第12-16页
1 材料与仪器第16-18页
    1.1 实验材料第16页
    1.2 主要试剂和仪器第16-18页
2 实验方法第18-35页
    2.1 过表达慢病毒载体构建第18-19页
    2.2 细胞培养第19-20页
    2.3 过表达细胞株的构建第20-21页
    2.4 稳定细胞株的鉴定第21-26页
    2.5 串联亲和纯化第26-27页
    2.6 银染第27-28页
    2.7 考马斯亮蓝染色第28页
    2.8 考马斯亮蓝染色后胶内酶解第28-30页
    2.9 酶解肽段的液相色谱分离第30-31页
    2.10 数据库搜索和蛋白鉴定第31页
    2.11 生物信息学分析第31页
    2.12 免疫共沉淀验证相互作用蛋白第31-33页
    2.13 CCK-8检测细胞增殖第33-34页
    2.14 统计学分析第34-35页
3 实验结果第35-45页
    3.1 RSK4变异体RSK4m2和RSK4m3在转染的MDA-MB-231乳腺癌细胞中稳定表达第35-37页
    3.2 Strep Ⅱ/Flag-TAP技术分离纯化蛋白复合物联合质谱鉴定RSK第37-39页
    3.3 RSK4 m2或RSK4m3相互作用蛋白组的生物信息学分析第39-43页
    3.4 免疫共沉淀(CO-IP)验证相互作用蛋白第43-45页
讨论第45-48页
结论第48-49页
参考文献第49-53页
综述第53-65页
    参考文献第61-65页
附录第65-66页
致谢第66-67页
攻读硕士学位期间(待)发表的学术论文目录第67页

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