| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 1 材料、试剂和仪器 | 第14-22页 |
| 1.1 实验细胞 | 第14页 |
| 1.2 主要试剂 | 第14-15页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第15-20页 |
| 1.3.1 肝癌SMMC-7721细胞培养基的配制 | 第15页 |
| 1.3.2 MTT工作液的配制 | 第15-16页 |
| 1.3.3 磷酸缓冲盐溶液的配制（PBS） | 第16页 |
| 1.3.4 胰酶储备液的配制 | 第16页 |
| 1.3.5 胰酶工作液的配制 | 第16-17页 |
| 1.3.6 多聚赖氨酸(Poly-L-lysine)工作液的配制 | 第17页 |
| 1.3.7 4%多聚甲醛（Paraformaldehyde）的配制 | 第17页 |
| 1.3.8 0.5%结晶紫母液配制 | 第17页 |
| 1.3.9 5×蛋白上样缓冲液的配制 | 第17页 |
| 1.3.10 SDS-PAGE电泳相关溶液的配制 | 第17-20页 |
| 1.4 主要实验仪器 | 第20-22页 |
| 2 实验方法和步骤 | 第22-28页 |
| 2.1 MTT实验检测亚硝酸钠、氯化铵、亚硝酸钠氯化铵混合物对肝癌SMMC-7721细胞增殖活性的影响 | 第22页 |
| 2.2 微管示踪剂荧光染色观察不同处理组细胞有丝分裂情况 | 第22页 |
| 2.3 细胞划痕实验 | 第22-23页 |
| 2.4 细胞线粒体和微丝检测 | 第23页 |
| 2.5 细胞ATP含量测定 | 第23页 |
| 2.6 TRANSWELL侵袭实验 | 第23页 |
| 2.7 细胞活性氧荧光检测 | 第23-24页 |
| 2.8 WESTERN BLOTTING检测相关蛋白表达 | 第24-26页 |
| 2.8.1 蛋白的提取 | 第24页 |
| 2.8.2 BCA法测定收集蛋白浓度 | 第24-25页 |
| 2.8.3 蛋白浓度的调节 | 第25页 |
| 2.8.4 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第25-26页 |
| 2.9 鸟氨酸脱羧酶（ODC）ELISA试剂盒检测细胞内ODC的含量 | 第26-27页 |
| 2.10 统计学分析 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-38页 |
| 3.1 亚硝酸盐和铵盐联合暴露对肝癌细胞增殖活力性的影响 | 第28-30页 |
| 3.1.1 MTT实验检测细胞活力选择亚硝酸钠、氯化铵、及亚硝酸钠氯化铵混合物作用的适宜浓度 | 第28-29页 |
| 3.1.2 MTT实验检测细胞活性选择亚硝酸钠、氯化铵、亚硝酸氯化铵混合物作用的适宜时间 | 第29页 |
| 3.1.3 亚硝酸钠、氯化铵、亚硝酸钠氯化铵混合物对人肝癌SMMC-7721细胞有丝分裂的影响 | 第29-30页 |
| 3.2 亚硝酸盐和铵盐联合暴露对肝癌细胞迁徙和侵袭能力的影响 | 第30-34页 |
| 3.2.1 亚硝酸钠、氯化铵、亚硝酸钠氯化铵混合物对人肝癌SMMC-7721细胞水平迁徙能力的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.2 亚硝酸钠、氯化铵、亚硝酸氯化铵混合物对人肝癌SMMC-7721细胞微丝变化及线粒体数量的的影响 | 第31-32页 |
| 3.2.3 亚硝酸钠、氯化铵、亚硝酸氯化铵混合物对人肝癌SMMC-7721细胞内ATP含量的影响 | 第32-33页 |
| 3.2.4 亚硝酸钠、氯化铵、亚硝酸氯化铵混合物对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭能力的影响 | 第33-34页 |
| 3.3 亚硝酸盐和铵盐联合暴露对肝癌细胞增殖侵袭影响的机制 | 第34-38页 |
| 3.3.1 亚硝酸钠、氯化铵、亚硝酸氯化铵混合物对人肝癌SMMC-7721细胞内ROS水平的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.2 亚硝酸钠和氯化铵联合暴露通过ROS促进人肝癌SMMC-7721细胞侵袭 | 第35-36页 |
| 3.3.3 亚硝酸钠、氯化铵、亚硝酸钠氯化铵混合物对人肝癌SMMC-7721细胞内ODC表达的影响 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-42页 |
| 5 结论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 综述 活性氧与肿瘤的关系 | 第48-62页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附录 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 硕士期间发表的学术论文 | 第65-66页 |
