摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
中英文对照词表 | 第9-10页 |
第1章 引言 | 第10-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-31页 |
2.1 实验主要试剂和材料 | 第13-16页 |
2.1.1 血液标本、细胞株及质粒 | 第13页 |
2.1.2 主要试剂 | 第13-14页 |
2.1.3 实验主要设备和仪器 | 第14-15页 |
2.1.4 实验主要试剂的配制 | 第15-16页 |
2.2 实验方法与步骤 | 第16-31页 |
2.2.1 LO2细胞培养 | 第16-17页 |
2.2.2 pIRES2-HBsAg、pIRES2-HBsAg(rtA181T)、pGL3-TGFBI启动子重组质粒的构建 | 第17-20页 |
2.2.3 pIRES2-HBsAg(rtA181T)重组质粒的构建 | 第20-22页 |
2.2.4 基因转导技术 | 第22页 |
2.2.5 染色质免疫共沉淀技术(CHIP-seq) | 第22-24页 |
2.2.6 启动子荧光素酶报告基因载体活性鉴定 | 第24页 |
2.2.7 RT-qPCR检测细胞中TGFBI的mRNA表达水平 | 第24-26页 |
2.2.8 Western blot法检测蛋白表达的变化 | 第26-28页 |
2.2.9 TGFBI启动子甲基化状态检测 | 第28-30页 |
2.2.10 数据处理 | 第30-31页 |
第3章 结果 | 第31-36页 |
3.1 重组质粒pIRES2-HBsAg、PIRES2-HBs Ag(rtA181T)、pGL3-TGFBI的测序鉴定 | 第31-32页 |
3.2 CHIP–seq技术寻找rtA181T截短表面蛋白在胞核内的作用位点 | 第32页 |
3.3 rtA181T截短表面蛋白异常调节TGFBI表达 | 第32-33页 |
3.4 TGFBI启动子甲基化检测 | 第33-34页 |
3.5 rtA181T截短表面蛋白致癌活性与Cyclin D1蛋白表达升高相关 | 第34-36页 |
第4章 讨论 | 第36-39页 |
第5章 结论 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-44页 |
综述 乙肝病毒突变临床意义的研究进展 | 第44-62页 |
参考文献 | 第53-62页 |