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HBV rtA181T突变致TGFBI启动子甲基化

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
中英文对照词表第9-10页
第1章 引言第10-13页
第2章 材料与方法第13-31页
    2.1 实验主要试剂和材料第13-16页
        2.1.1 血液标本、细胞株及质粒第13页
        2.1.2 主要试剂第13-14页
        2.1.3 实验主要设备和仪器第14-15页
        2.1.4 实验主要试剂的配制第15-16页
    2.2 实验方法与步骤第16-31页
        2.2.1 LO2细胞培养第16-17页
        2.2.2 pIRES2-HBsAg、pIRES2-HBsAg(rtA181T)、pGL3-TGFBI启动子重组质粒的构建第17-20页
        2.2.3 pIRES2-HBsAg(rtA181T)重组质粒的构建第20-22页
        2.2.4 基因转导技术第22页
        2.2.5 染色质免疫共沉淀技术(CHIP-seq)第22-24页
        2.2.6 启动子荧光素酶报告基因载体活性鉴定第24页
        2.2.7 RT-qPCR检测细胞中TGFBI的mRNA表达水平第24-26页
        2.2.8 Western blot法检测蛋白表达的变化第26-28页
        2.2.9 TGFBI启动子甲基化状态检测第28-30页
        2.2.10 数据处理第30-31页
第3章 结果第31-36页
    3.1 重组质粒pIRES2-HBsAg、PIRES2-HBs Ag(rtA181T)、pGL3-TGFBI的测序鉴定第31-32页
    3.2 CHIP–seq技术寻找rtA181T截短表面蛋白在胞核内的作用位点第32页
    3.3 rtA181T截短表面蛋白异常调节TGFBI表达第32-33页
    3.4 TGFBI启动子甲基化检测第33-34页
    3.5 rtA181T截短表面蛋白致癌活性与Cyclin D1蛋白表达升高相关第34-36页
第4章 讨论第36-39页
第5章 结论第39-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-44页
综述 乙肝病毒突变临床意义的研究进展第44-62页
    参考文献第53-62页

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