| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 单位符号及英文缩写表 | 第11-15页 |
| 第一章 综述 | 第15-25页 |
| 1.1 病原学 | 第15-16页 |
| 1.1.1 PCV2简介 | 第15页 |
| 1.1.2 圆环病毒的起源 | 第15-16页 |
| 1.1.3 PCV2的发现 | 第16页 |
| 1.2 PCV2流行病学 | 第16-19页 |
| 1.2.1 PCV2流行情况 | 第16-18页 |
| 1.2.2 PCV2传播途径 | 第18页 |
| 1.2.3 PCV2宿主 | 第18-19页 |
| 1.3 分子生物学特征 | 第19-21页 |
| 1.3.1 基因组结构 | 第19-20页 |
| 1.3.2 Rep蛋白 | 第20页 |
| 1.3.3 Cap蛋白 | 第20-21页 |
| 1.3.4 ORF3与ORF4蛋白 | 第21页 |
| 1.4 PCV2的分类 | 第21-22页 |
| 1.5 基因的差异在诊断中的作用 | 第22页 |
| 1.5.1 诊断PCV1与PCV2方法 | 第22页 |
| 1.5.2 PCV2a与PCV2b区分方法 | 第22页 |
| 1.6 PCV2引起的临床症状 | 第22-24页 |
| 1.6.1 猪圆环病毒相关疾病(PCVAD) | 第23页 |
| 1.6.2 PCV2与其他病原体并发症 | 第23-24页 |
| 1.7 发病机理 | 第24页 |
| 1.8 本研究目的及意义 | 第24-25页 |
| 第二章 广西猪圆环病毒2型的分子流行病学调查 | 第25-65页 |
| 2.1 材料 | 第25页 |
| 2.2 主要仪器与试剂 | 第25-27页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.3 培养基及电泳胶等配制方法 | 第27-28页 |
| 2.3.1 DMEM培养基 | 第27页 |
| 2.3.2 LB和LA培养基 | 第27页 |
| 2.3.3 电泳液与琼脂糖凝胶 | 第27页 |
| 2.3.4 10%SDS | 第27-28页 |
| 2.3.5 PBS缓冲液 | 第28页 |
| 2.3.6 DH5α感受态细胞 | 第28页 |
| 2.4 实验方法 | 第28-35页 |
| 2.4.1 技术路线 | 第28-29页 |
| 2.4.2 样品处理 | 第29页 |
| 2.4.3 样品DNA抽提 | 第29-30页 |
| 2.4.4 PCR检测与扩增 | 第30-31页 |
| 2.4.5 全基因克隆 | 第31-32页 |
| 2.4.6 重组质粒鉴定 | 第32-33页 |
| 2.4.7 目的基因测序及分析 | 第33-35页 |
| 2.5 实验结果 | 第35-58页 |
| 2.5.1 待检样品中PCV2病原检测 | 第35-39页 |
| 2.5.2 PCR扩增PCV2全基因 | 第39页 |
| 2.5.3 重组质粒酶切鉴定 | 第39-40页 |
| 2.5.4 PCV2全基因测序结果 | 第40-42页 |
| 2.5.5 PCV2基因核苷酸序列分析 | 第42-58页 |
| 2.6 分析与讨论 | 第58-63页 |
| 2.7 小结 | 第63-65页 |
| 第三章 广西猪圆环病毒2型的分离与鉴定 | 第65-72页 |
| 3.1 材料 | 第65页 |
| 3.1.1 样品 | 第65页 |
| 3.1.2 细胞株 | 第65页 |
| 3.2 主要仪器与试剂 | 第65-66页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第65-66页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第66页 |
| 3.3 培养基配制方法 | 第66页 |
| 3.4 实验方法 | 第66-69页 |
| 3.4.1 技术路线 | 第66-67页 |
| 3.4.2 样品处理 | 第67页 |
| 3.4.3 PK-15细胞培养 | 第67页 |
| 3.4.4 PCV2病毒分离培养 | 第67-68页 |
| 3.4.5 PCV2分离鉴定 | 第68页 |
| 3.4.6 PCV2细胞毒全基因克隆与分析 | 第68-69页 |
| 3.5 实验结果 | 第69-71页 |
| 3.5.1 细胞带毒传代陪养 | 第69页 |
| 3.5.2 细胞毒检测结果 | 第69-70页 |
| 3.5.3 PCV2细胞毒全基因测序与分析 | 第70-71页 |
| 3.6 分析与讨论 | 第71页 |
| 3.7 小结 | 第71-72页 |
| 第四章 PCV2不同代次在细胞里的核苷酸变化 | 第72-78页 |
| 4.1 材料 | 第72页 |
| 4.1.1 样品 | 第72页 |
| 4.1.2 细胞株 | 第72页 |
| 4.2 主要仪器与试剂 | 第72页 |
| 4.3 培养基及电泳胶等配制方法 | 第72页 |
| 4.4 实验方法 | 第72-73页 |
| 4.4.1 技术路线 | 第72页 |
| 4.4.2 样品处理 | 第72页 |
| 4.4.3 PK-15细胞培养 | 第72-73页 |
| 4.4.4 PCV2分离培养 | 第73页 |
| 4.4.5 PCV2分离鉴定 | 第73页 |
| 4.4.6 PCV2细胞毒全基因克隆与分析 | 第73页 |
| 4.5 实验结果 | 第73-76页 |
| 4.5.1 GXGG-4-2013株分离鉴定结果 | 第73-74页 |
| 4.5.2 GXGG-4-2013株全基因测序与分析 | 第74-76页 |
| 4.6 分析与讨论 | 第76-77页 |
| 4.7 小结 | 第77-78页 |
| 第五章 全文结论 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第90页 |