| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要符号表 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 蓝圆鲹简介 | 第12-13页 |
| 1.2 脯氨酸内肽酶 | 第13-14页 |
| 1.3 PEP内源性抑制剂 | 第14-15页 |
| 1.4 酶的分离纯化 | 第15-17页 |
| 1.5 本文研究内容、目的与意义 | 第17-19页 |
| 第2章 材料与方法 | 第19-29页 |
| 2.1 实验原料 | 第19页 |
| 2.2 试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.1 层析树脂 | 第19页 |
| 2.2.2 荧光合成底物及肽底物 | 第19页 |
| 2.2.3 蛋白酶抑制剂 | 第19页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE所用试剂 | 第19页 |
| 2.2.5 其他试剂 | 第19-20页 |
| 2.3 实验所用溶剂及配制 | 第20-22页 |
| 2.3.1 母液 | 第20页 |
| 2.3.2 蓝圆鲹肌肉PEP分离纯化所用缓冲液 | 第20页 |
| 2.3.3 PEP性质分析所用溶液 | 第20页 |
| 2.3.4 蓝圆鲹肌肉PEP内源性抑制剂分离纯化所用缓冲液 | 第20-21页 |
| 2.3.5 PEP内源性抑制剂性质分析所用溶液 | 第21页 |
| 2.3.6 SDS-PAGE凝胶电泳所需溶液的配置 | 第21页 |
| 2.3.7 质谱银染色所用试剂的配置 | 第21-22页 |
| 2.4 实验仪器 | 第22页 |
| 2.5 实验方法 | 第22-29页 |
| 2.5.1 蛋白浓度的测定 | 第22-23页 |
| 2.5.2 脯氨酸内肽酶活性的测定 | 第23页 |
| 2.5.3 脯氨酸内肽酶内源性抑制剂活性的测定 | 第23页 |
| 2.5.4 蛋白纯度的鉴定 | 第23页 |
| 2.5.5 SDS-PAGE银染色法 | 第23页 |
| 2.5.6 PEP的分离纯化 | 第23-25页 |
| 2.5.7 脯氨酸内肽酶的性质分析 | 第25-26页 |
| 2.5.8 高效液相与电喷雾质谱联用分析PEP对胶原小肽的降解 | 第26页 |
| 2.5.9 PEP的圆二色谱扫描 | 第26页 |
| 2.5.10 PEP内源性抑制剂的分离纯化 | 第26-27页 |
| 2.5.11 PEP抑制剂的性质分析 | 第27-29页 |
| 第3章 结果与分析 | 第29-52页 |
| 3.1 PEP的分离纯化 | 第29-32页 |
| 3.2 PEP性质分析 | 第32-45页 |
| 3.2.1 肽质量指纹图谱 | 第32-34页 |
| 3.2.2 温度对酶活力的影响 | 第34-35页 |
| 3.2.3 pH对酶活力的影响 | 第35-36页 |
| 3.2.4 酶的热失活动力学 | 第36-37页 |
| 3.2.5 底物特异性 | 第37-38页 |
| 3.2.6 蛋白酶抑制剂对PEP活性的影响 | 第38-39页 |
| 3.2.7 PEP对胶原蛋白小肽的作用与研究 | 第39-44页 |
| 3.2.8 PEP的圆二色谱扫描分析 | 第44-45页 |
| 3.3 PEP内源性抑制剂的分离纯化 | 第45-52页 |
| 3.3.1 PEP内源性抑制剂的纯化结果 | 第45-47页 |
| 3.3.2 PEP抑制剂性质分析 | 第47-52页 |
| 第4章 讨论 | 第52-57页 |
| 4.1 蓝圆鲹PEP的分离纯化 | 第52页 |
| 4.2 蓝圆鲹PEP的性质 | 第52-55页 |
| 4.3 PEP抑制剂的分离纯化及性质分析 | 第55-57页 |
| 第5章 结论与展望 | 第57-59页 |
| 5.1 结论 | 第57-58页 |
| 5.2 展望 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 在校期间发表的学术论文 | 第65页 |
