| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-22页 |
| 1 果实形态发育的研究现状 | 第13-15页 |
| 1.1 果实发育的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 佛手果实发育研究 | 第14-15页 |
| 2 果形建成相关基因的研究进展 | 第15-16页 |
| 2.1 控制果实长度的基因 | 第15-16页 |
| 2.2 控制果实宽度的基因 | 第16页 |
| 3 YABBY基因家族的研究进展 | 第16-19页 |
| 3.1 CRC基因对果实生长发育的研究 | 第18页 |
| 3.2 YABBY5基因对果实生长发育的研究 | 第18-19页 |
| 4 研究果实发育的相关技术 | 第19-20页 |
| 4.1 病毒诱导基因沉默技术 | 第19-20页 |
| 4.2 果实注射转化法遗传转化 | 第20页 |
| 5 选题的目的与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 佛手果形发育的形态学观察 | 第22-32页 |
| 1 前言 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-27页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.2 花芽样品的固定及干燥处理 | 第23-25页 |
| 2.2.1 2.5%戊二醛固定液的制备 | 第23页 |
| 2.2.2 佛手花芽的固定 | 第23-24页 |
| 2.2.3 脱水处理 | 第24页 |
| 2.2.4 临界点干燥 | 第24-25页 |
| 2.3 超景深显微镜观察佛手花芽 | 第25页 |
| 2.4 扫描电镜观察佛手不同发育时期的花芽 | 第25-27页 |
| 2.4.1 样品镀膜 | 第25-26页 |
| 2.4.2 电镜观察的仪器操作步骤 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-30页 |
| 3.1 佛手花芽到果实发育各时期形态观察 | 第27-28页 |
| 3.2 佛手花芽到幼果发育过程的显微观察 | 第28-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 佛手、香橼CRC、YABBY5基因克隆与生物信息学分析 | 第32-45页 |
| 1 前言 | 第32-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-39页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第33页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第33页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第33页 |
| 2.2 叶片DNA提取 | 第33-34页 |
| 2.3 佛手花总RNA提取cDNA第一链合成 | 第34-35页 |
| 2.3.1 佛手花器官RNA提取 | 第34页 |
| 2.3.2 琼脂糖凝胶电泳RNA纯度检测 | 第34-35页 |
| 2.3.3 反转录的体系的配置 | 第35页 |
| 2.4 目的基因扩增 | 第35-38页 |
| 2.4.1 PCR扩增目的基因 | 第35-36页 |
| 2.4.2 超级感受态细胞制备 | 第36-37页 |
| 2.4.3 T载体的链接和转化 | 第37-38页 |
| 2.4.4 菌落PCR鉴定及测序保存 | 第38页 |
| 2.5 目的基因序列及结构分析 | 第38页 |
| 2.6 YABBY5蛋白序列及系统进化树分析 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-43页 |
| 3.1 CRC基因启动子序列的分离 | 第39页 |
| 3.2 YABBY5基因gDNA和cDNA序列的克隆 | 第39页 |
| 3.3 佛手与香橼中CRC基因启动子序列比较 | 第39-41页 |
| 3.4 佛手与香橼中YABBY5基因结构与蛋白序列比对分析 | 第41-42页 |
| 3.5 佛手中YABBY5基因系统进化的构建 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 4.1 CRC基因启动子序列分析 | 第43-44页 |
| 4.2 YABBY5基因结构及蛋白序列分析 | 第44-45页 |
| 第四章 CRC和YABBY5基因在花器官不同发育时期的表达分析 | 第45-53页 |
| 1 前言 | 第45-46页 |
| 2 材料与方法 | 第46-49页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第46页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第46页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第46页 |
| 2.2 佛手、香橼花器官发育不同时期取样 | 第46-47页 |
| 2.3 花芽RNA提取 | 第47页 |
| 2.4 cDNA第一链的合成 | 第47页 |
| 2.5 CRC、YABBY5基因的定量引物设计 | 第47-48页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR | 第48-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-50页 |
| 3.1 CRC、YABBY5基因在佛手、香橼花器官中的表达分析 | 第49-50页 |
| 3.2 CRC、YABBY5基因在高低温诱导佛手花器官中的表达分析 | 第50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 CRC基因差异表达与佛手果形建成的影响分析 | 第51页 |
| 4.2 YABBY5基因差异表达与佛手果形建成的影响分析 | 第51-53页 |
| 第五章 利用VIGS技术对番茄SlYABBY5基因功能的研究 | 第53-63页 |
| 1 前言 | 第53-54页 |
| 2 材料与方法 | 第54-57页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第54-55页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第54页 |
| 2.1.2 质粒与菌株 | 第54页 |
| 2.1.3 主要试剂及培养基配制 | 第54-55页 |
| 2.2 番茄SlYABBY5基因的分离 | 第55页 |
| 2.3 SIYABBY5-TRV的VIGS沉默载体构建 | 第55页 |
| 2.4 农杆菌感受态制备 | 第55-56页 |
| 2.5 农杆菌侵染 | 第56页 |
| 2.6 番茄分析器对沉默果形的分析 | 第56页 |
| 2.7 YABBY5及其互作基因在沉默果实中的表达 | 第56-57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-61页 |
| 3.1 SlYABBY5基因沉默载体构建 | 第57-58页 |
| 3.2 沉默SlYABBY5基因的表型分析 | 第58页 |
| 3.3 番茄分析器对沉默果形的分析 | 第58-60页 |
| 3.4 YABBY5及其互作基因在沉默果实中的表达分析 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 4.1 SlYABBY5沉默对番茄果形发育的影响 | 第61页 |
| 4.2 SlYABBY5沉默对其预测互作基因的影响 | 第61-63页 |
| 结论与展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 附录 基因序列 | 第74-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第80-82页 |
