| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 常见英文缩写一览表（文中先后顺序） | 第14-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-23页 |
| 1.1 黑色素瘤 | 第16页 |
| 1.2 肿瘤转移 | 第16-17页 |
| 1.3 上皮间质转化 | 第17-18页 |
| 1.4 蛋白 4.1B | 第18-20页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第20页 |
| 1.6 研究内容与方法 | 第20-22页 |
| 1.7 技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 蛋白 4.1 家族在小鼠黑色素瘤细胞中的表达筛选 | 第23-38页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.4 常用试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-35页 |
| 2.2.1 细胞培养的常规方法 | 第26-28页 |
| 2.2.2 PCR法检测蛋白 4.1 家族基因的表达情况 | 第28-30页 |
| 2.2.3 Western blot技术检测蛋白 4.1 家族的表达 | 第30-33页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR检测EPB41L3基因的表达 | 第33-35页 |
| 2.2.5 统计学分析 | 第35页 |
| 2.3 结果 | 第35-37页 |
| 2.3.1 PCR法初步筛选蛋白 4.1 家族的表达 | 第35-36页 |
| 2.3.2 Western blot法检测蛋白 4.1 家族的表达情况 | 第36-37页 |
| 2.3.3 荧光定量PCR法检测EPB41L3基因的表达情况 | 第37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 真核表达载体p EGFP-N1-EPB41L3的构建和表达 | 第38-56页 |
| 3.1 材料 | 第38-40页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第38页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第39-40页 |
| 3.1.4 常用试剂配制 | 第40页 |
| 3.2 方法 | 第40-46页 |
| 3.2.1 小鼠EPB41L3基因的扩增 | 第40-41页 |
| 3.2.2 真核表达载体p EGFP-N1-EPB41L3的构建 | 第41-43页 |
| 3.2.3 荧光显微镜检测 4.1B融合蛋白的表达 | 第43-44页 |
| 3.2.4 PCR检测EPB41L3的表达 | 第44页 |
| 3.2.5 荧光定量PCR法检测EPB41L3基因的表达情况 | 第44-45页 |
| 3.2.6 Western blot法检测蛋白 4.1B | 第45页 |
| 3.2.7 统计学分析 | 第45-46页 |
| 3.3 结果 | 第46-55页 |
| 3.3.1 小鼠EPB41L3基因的扩增结果 | 第46页 |
| 3.3.2 绘制小鼠EPB41L3基因的外显子图谱 | 第46-47页 |
| 3.3.3 真核表达载体p EGFP-N1-EPB41L3的鉴定 | 第47-50页 |
| 3.3.4 荧光显微镜观察 4.1B在细胞内的表达情况 | 第50-52页 |
| 3.3.5 PCR检测EPB41L3基因的表达情况 | 第52页 |
| 3.3.6 荧光定量PCR检测EPB41L3基因的表达情况 | 第52-53页 |
| 3.3.7 Western blot法检测B16和B16-F10细胞表达蛋白 4.1B | 第53-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-56页 |
| 第四章 4.1B对B16、B16-F10细胞体外增殖和迁移的影响 | 第56-63页 |
| 4.1 材料 | 第56页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第56页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第56页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第56页 |
| 4.1.4 常用试剂配制 | 第56页 |
| 4.2 方法 | 第56-59页 |
| 4.2.1 MMT法检测蛋白 4.1B抑制B16的体外增殖 | 第56-57页 |
| 4.2.2 MTT法检测蛋白 4.1B抑制B16-F10的体外增殖 | 第57-58页 |
| 4.2.3 划痕实验检测蛋白 4.1B对细胞迁移的影响 | 第58页 |
| 4.2.4 统计学分析 | 第58-59页 |
| 4.3 结果 | 第59-62页 |
| 4.3.1 蛋白 4.1B抑制B16细胞的体外增殖 | 第59-60页 |
| 4.3.2 蛋白 4.1B抑制B16-F10细胞的体外增殖 | 第60-61页 |
| 4.3.3 蛋白 4.1B抑制黑色素瘤细胞系B16、B16-F10的迁移 | 第61-62页 |
| 4.4 讨论 | 第62-63页 |
| 第五章 4.1B抑制黑色素瘤细胞EMT的机制研究 | 第63-75页 |
| 5.1 材料 | 第63-64页 |
| 5.1.1 细胞株 | 第63页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第63-64页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第64页 |
| 5.1.4 常用试剂配制 | 第64页 |
| 5.2 方法 | 第64-67页 |
| 5.2.1 荧光定量PCR检测EMT相关基因的表达 | 第64-65页 |
| 5.2.2 Western blot法检测EMT相关蛋白的表达情况 | 第65-66页 |
| 5.2.3 流式细胞术检测integrin β1 的表达和活化 | 第66-67页 |
| 5.2.4 统计学分析 | 第67页 |
| 5.3 结果 | 第67-73页 |
| 5.3.1 蛋白 4.1B影响EMT相关marker的表达 | 第67-68页 |
| 5.3.2 蛋白 4.1B对TGF-β 家族成员的影响 | 第68-69页 |
| 5.3.3 蛋白 4.1B抑制驱动EMT的相关转录因子 | 第69-70页 |
| 5.3.4 蛋白 4.1B对MMP-2 和MMP-9 的影响 | 第70-71页 |
| 5.3.5 蛋白 4.1B对integrinβ1 的影响 | 第71-73页 |
| 5.4 讨论 | 第73-75页 |
| 第六章 小鼠皮下移植瘤和肺转移动物实验验证 4.1B功能 | 第75-80页 |
| 6.1 材料 | 第75-76页 |
| 6.1.1 细胞株 | 第75页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第75页 |
| 6.1.3 主要仪器 | 第75页 |
| 6.1.4 常用试剂配制 | 第75-76页 |
| 6.1.5 实验动物 | 第76页 |
| 6.2 方法 | 第76-77页 |
| 6.2.1 蛋白 4.1B对B16皮下移植瘤的影响 | 第76页 |
| 6.2.2 蛋白 4.1B对B16-F10肺转移的影响 | 第76-77页 |
| 6.2.3 统计学分析 | 第77页 |
| 6.3 结果 | 第77-79页 |
| 6.3.1 蛋白 4.1B对B16皮下移植瘤的影响 | 第77-78页 |
| 6.3.2 蛋白 4.1B对B16-F10肺转移的影响 | 第78-79页 |
| 6.4 讨论 | 第79-80页 |
| 第七章 全文讨论 | 第80-82页 |
| 全文结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-88页 |
| 个人简历、硕士期间发表的学术论文及研究成果 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
