| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 CYVCV的发现历史 | 第11-12页 |
| 1.2 CYVCV分类地位 | 第12-13页 |
| 1.3 CYVCV生物学特性 | 第13-16页 |
| 1.3.1 CYVCV寄主范围 | 第13-14页 |
| 1.3.2 CYVCV危害特点 | 第14-15页 |
| 1.3.3 CYVCV传播方式 | 第15-16页 |
| 1.4 CYVCV分子生物学特性 | 第16-18页 |
| 1.4.1 CYVCV基因组结构 | 第16-17页 |
| 1.4.2 CYVCV分子多样性 | 第17-18页 |
| 1.5 CYVCV检测方法 | 第18-19页 |
| 1.5.1 生物学鉴定 | 第18页 |
| 1.5.2 分子生物学检测 | 第18页 |
| 1.5.3 血清学检测 | 第18-19页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 柑橘黄化脉明病毒的RT-PCR检测 | 第20-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 样品来源 | 第20页 |
| 2.1.2 研究所用主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第21页 |
| 2.2.2 总RNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.3 RT-PCR | 第22页 |
| 2.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第22-23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-27页 |
| 2.3.1 来源7个省份柑橘样品CYVCV的RT-PCR检测 | 第23-24页 |
| 2.3.2 分析CYVCV在湖北各地区柑橘样品上分布特点 | 第24-25页 |
| 2.3.3 分析不同种类柑橘样品CYVCV侵染率 | 第25-26页 |
| 2.3.4 CYVCV侵染率与柑橘表现症状之间关系分析 | 第26-27页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 CYVCV甲基转移酶基因met和外壳蛋白基因cp序列分析 | 第29-40页 |
| 3.1 试验材料 | 第29-30页 |
| 3.1.1 样品来源 | 第29页 |
| 3.1.2 研究所用主要试剂 | 第29-30页 |
| 3.2 试验方法 | 第30-32页 |
| 3.2.1 引物设计与合成 | 第30页 |
| 3.2.2 总RNA的提取 | 第30页 |
| 3.2.3 RT-PCR | 第30页 |
| 3.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| 3.2.5 PCR扩增产物的回收 | 第30-31页 |
| 3.2.6 大肠杆菌热击感受态细胞的制备 | 第31页 |
| 3.2.7 DNA片段的连接 | 第31-32页 |
| 3.2.8 热击转化 | 第32页 |
| 3.2.9 重组质粒的阳性鉴定及序列测定 | 第32页 |
| 3.2.10 序列分析所用软件 | 第32页 |
| 3.3 结果与分析 | 第32-39页 |
| 3.3.1 CYVCV甲基转移酶met和外壳蛋白cp基因多重比对分析 | 第32-35页 |
| 3.3.2 CYVCV甲基转移酶met和外壳蛋白cp基因系统进化树分析 | 第35-39页 |
| 3.4 小结与分析 | 第39-40页 |
| 第四章 CYVCV生物学特性研究 | 第40-51页 |
| 4.1 试验材料 | 第40-41页 |
| 4.1.1 供试材料 | 第40-41页 |
| 4.2 试验方法 | 第41-46页 |
| 4.2.1 引物设计与合成 | 第41页 |
| 4.2.2 总RNA的提取 | 第41-42页 |
| 4.2.3 DNA消化 | 第42-43页 |
| 4.2.4 反转录合成cDNA | 第43页 |
| 4.2.5 qRT-PCR的扩增 | 第43-44页 |
| 4.2.6 质粒提取 | 第44-45页 |
| 4.2.7 标准曲线制作 | 第45-46页 |
| 4.3 结果与分析 | 第46-49页 |
| 4.3.1 不同种柑橘感染CYVCV症状 | 第46-47页 |
| 4.3.2 qRT-PCR分析柠檬枝条不同组织CYVCV含量 | 第47页 |
| 4.3.3 qRT-PCR分析4种柑橘感染不同时期CYVCV含量 | 第47-48页 |
| 4.3.4 qRT-PCR分析感染甜橙3个部位不同时期CYVCV含量 | 第48-49页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第49-51页 |
| 第五章 结论与展望 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录1 常用溶液配制 | 第58-59页 |
| 附录2 RT-PCR柑橘样品CYVCV | 第59-67页 |
| 附录3 部分柑橘样品症状图 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
