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肿瘤细胞中E2F1对ICAM-1的调控作用及机制的初步探索

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
第1章 绪论(文献综述及课题背景介绍)第8-20页
   ·细胞间粘附分子:ICAM-1(CD54)第8-12页
     ·ICAM-1 概述第8-9页
     ·ICAM-1 的表达和功能第9-12页
   ·转录因子 E2F1第12-17页
     ·E2F 概述第12-13页
     ·转录因子 E2F1第13-16页
     ·转录因子E2F1 与肿瘤第16-17页
   ·核转录因子 NF-κB 家族第17-20页
     ·转录因子NF-κB 概述第17页
     ·NF-κB 的结构与功能第17-18页
     ·转录因子NF-κB 与细胞间粘附分子ICAM-1第18-20页
第2章 实验材料与方法第20-43页
   ·质粒的构建和抽提第20-27页
     ·所需溶液及其配制第20-22页
     ·质粒的抽提第22-24页
     ·ICAM-1 promoter 报告基因质粒的构建第24-27页
   ·细胞培养和转染第27-32页
     ·细胞培养所需溶液及其配制第27-28页
     ·细胞培养第28-30页
     ·宫颈癌细胞系Hela 的瞬时转染第30-31页
     ·前列腺肿瘤细胞系PC3 的瞬时转染第31-32页
   ·Western blotting第32-39页
     ·所需溶液及其配制第32-34页
     ·Western blotting 实验步骤第34-36页
     ·RT-PCR(逆转录PCR)第36-39页
   ·双荧光素酶报告基因实验第39-43页
     ·Hela/PC3 细胞中双荧光素酶报告基因检测实验第39-41页
     ·PC3 细胞中多种DNA 共转染及双荧光素酶报告基因检测第41-43页
第3章 实验结果与讨论第43-49页
   ·在肿瘤细胞系 PC3 和 Hela 中,E2F1 抑制ICAM-1 的表达第43-45页
     ·在PC3 和Hela 细胞中,敲低E2F1 导致ICAM-1 的mRNA 水平上调第43-44页
     ·在Hela 细胞中,敲低E2F1 导致ICAM-1 的蛋白表达水平下降第44-45页
   ·E2F1 可能通过ICAM-1 启动子上的两个NF-κB 位点发挥转录调控作用第45-47页
     ·ICAM-1 启动子的分析第45-46页
     ·PC3 细胞中E2F1 可能是通过NF-κB 位点调控ICAM-1 的表达第46-47页
     ·Hela 细胞中E2F1 可能通过NF-κB 位点调控ICAM-1 的表达第47页
   ·讨论第47-49页
参考文献第49-56页
致谢第56页

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