| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 第1章 绪论(文献综述及课题背景介绍) | 第8-20页 |
| ·细胞间粘附分子:ICAM-1(CD54) | 第8-12页 |
| ·ICAM-1 概述 | 第8-9页 |
| ·ICAM-1 的表达和功能 | 第9-12页 |
| ·转录因子 E2F1 | 第12-17页 |
| ·E2F 概述 | 第12-13页 |
| ·转录因子 E2F1 | 第13-16页 |
| ·转录因子E2F1 与肿瘤 | 第16-17页 |
| ·核转录因子 NF-κB 家族 | 第17-20页 |
| ·转录因子NF-κB 概述 | 第17页 |
| ·NF-κB 的结构与功能 | 第17-18页 |
| ·转录因子NF-κB 与细胞间粘附分子ICAM-1 | 第18-20页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第20-43页 |
| ·质粒的构建和抽提 | 第20-27页 |
| ·所需溶液及其配制 | 第20-22页 |
| ·质粒的抽提 | 第22-24页 |
| ·ICAM-1 promoter 报告基因质粒的构建 | 第24-27页 |
| ·细胞培养和转染 | 第27-32页 |
| ·细胞培养所需溶液及其配制 | 第27-28页 |
| ·细胞培养 | 第28-30页 |
| ·宫颈癌细胞系Hela 的瞬时转染 | 第30-31页 |
| ·前列腺肿瘤细胞系PC3 的瞬时转染 | 第31-32页 |
| ·Western blotting | 第32-39页 |
| ·所需溶液及其配制 | 第32-34页 |
| ·Western blotting 实验步骤 | 第34-36页 |
| ·RT-PCR(逆转录PCR) | 第36-39页 |
| ·双荧光素酶报告基因实验 | 第39-43页 |
| ·Hela/PC3 细胞中双荧光素酶报告基因检测实验 | 第39-41页 |
| ·PC3 细胞中多种DNA 共转染及双荧光素酶报告基因检测 | 第41-43页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第43-49页 |
| ·在肿瘤细胞系 PC3 和 Hela 中,E2F1 抑制ICAM-1 的表达 | 第43-45页 |
| ·在PC3 和Hela 细胞中,敲低E2F1 导致ICAM-1 的mRNA 水平上调 | 第43-44页 |
| ·在Hela 细胞中,敲低E2F1 导致ICAM-1 的蛋白表达水平下降 | 第44-45页 |
| ·E2F1 可能通过ICAM-1 启动子上的两个NF-κB 位点发挥转录调控作用 | 第45-47页 |
| ·ICAM-1 启动子的分析 | 第45-46页 |
| ·PC3 细胞中E2F1 可能是通过NF-κB 位点调控ICAM-1 的表达 | 第46-47页 |
| ·Hela 细胞中E2F1 可能通过NF-κB 位点调控ICAM-1 的表达 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56页 |