摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词 | 第11-12页 |
1 绪论 | 第12-28页 |
1.1 非酒精性脂肪肝病及其病理机制研究进展 | 第12-23页 |
1.1.1 NAFLD中IR及内质网应激 | 第12-14页 |
1.1.2 NAFLD中基因的表达及调控 | 第14-17页 |
1.1.3 NAFLD中线粒体磷脂及其功能变化 | 第17-21页 |
1.1.4 NAFLD中线粒体ROS | 第21-23页 |
1.2 Ω -3 多不饱和脂肪酸 | 第23-27页 |
1.2.1 Ω -3 PUFA与NAFLD | 第23-25页 |
1.2.2 Ω -3 PUFA与线粒体磷脂及其脂肪酸 | 第25-27页 |
1.2.3 Ω -3 PUFA与线粒体ROS | 第27页 |
1.3 立题依据与研究内容 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-42页 |
2.1 主要试剂与仪器 | 第28-30页 |
2.2 主要溶液的配制 | 第30-31页 |
2.3 动物实验 | 第31-34页 |
2.3.1 实验动物饲养 | 第31-32页 |
2.3.2 血液样品及肝组织采集 | 第32页 |
2.3.3 血清TG、TCH、HDLC、LDLC浓度测定 | 第32-33页 |
2.3.4 血清ALT、AST及GST、SOD活力测定 | 第33页 |
2.3.5 动物肝脏组织学分析 | 第33页 |
2.3.6 动物饲料脂肪酸成分测定 | 第33-34页 |
2.4 细胞实验 | 第34-41页 |
2.4.1 细胞培养 | 第34页 |
2.4.2 细胞实验分组 | 第34-35页 |
2.4.3 细胞增殖活性测量 | 第35页 |
2.4.4 线粒体DNA数量测定 | 第35页 |
2.4.5 总DNA提取 | 第35-36页 |
2.4.6 RNA提取 | 第36页 |
2.4.7 引物设计 | 第36-37页 |
2.4.8 实时定量PCR检测基因转录水平 | 第37页 |
2.4.9 BCA法测定蛋白浓度 | 第37-38页 |
2.4.10 细胞内活性氧自由基生成量测定 | 第38页 |
2.4.11 线粒体膜电位Δ Ψ 测定 | 第38-39页 |
2.4.12 细胞内GSH水平及SOD活力测定 | 第39页 |
2.4.13 双染色流式细胞术测定细胞凋亡率 | 第39页 |
2.4.14 蛋白印迹实验检测蛋白质表达 | 第39-41页 |
2.4.15 线粒体分离、磷脂提取及纯化 | 第41页 |
2.4.16 气相色谱法测定线粒体膜磷脂及饲料油脂脂肪酸组成 | 第41页 |
2.5 数据分析及统计 | 第41-42页 |
3 结果与分析 | 第42-64页 |
3.1 动物体重、肝重及肝脏形态 | 第42-46页 |
3.1.1 体重、肝重 | 第42-43页 |
3.1.2 肝脏形态及外观 | 第43-46页 |
3.2 血清生化指标 | 第46-49页 |
3.2.1 血清中TG、TC、LDL-C及HDL-C浓度变化 | 第46页 |
3.2.2 ALT及AST活力 | 第46-47页 |
3.2.3 GST及SOD活力 | 第47-49页 |
3.3 动物饲料脂肪酸组成 | 第49-50页 |
3.4 Ω -3 PUFA及棕榈酸对肝细胞增殖活性的影响 | 第50-51页 |
3.4.1 高浓度棕榈酸对细胞活性的影响 | 第50页 |
3.4.2 Ω -3 多不饱和脂肪酸缓解高脂负荷压力对肝细胞活力的损伤 | 第50-51页 |
3.5 不同PUFA干预后细胞凋亡率 | 第51-53页 |
3.6 Ω -3 PUFA缓解细胞内ROS的生成 | 第53-55页 |
3.7 细胞内线粒体数量的变化 | 第55-56页 |
3.8 Ω -3 PUFA对线粒体膜电位崩解的缓解作用 | 第56-58页 |
3.9 Ω -3 PUFA干预后细胞内GSH水平和SOD活力 | 第58-59页 |
3.10 PUFA处理后基因转录变化 | 第59-60页 |
3.11 PUFA干预后基因表达量 | 第60-62页 |
3.12 PUFA孵育后线粒体膜磷脂脂肪酸组成的变化 | 第62-64页 |
4 讨论 | 第64-68页 |
4.1 动物实验结论 | 第64页 |
4.2 细胞实验结论 | 第64-66页 |
4.3 总结与讨论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-80页 |
致谢 | 第80页 |