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Ω-3 PUFA缓解非酒精性脂肪肝所致氧化应激损伤的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩略词第11-12页
1 绪论第12-28页
    1.1 非酒精性脂肪肝病及其病理机制研究进展第12-23页
        1.1.1 NAFLD中IR及内质网应激第12-14页
        1.1.2 NAFLD中基因的表达及调控第14-17页
        1.1.3 NAFLD中线粒体磷脂及其功能变化第17-21页
        1.1.4 NAFLD中线粒体ROS第21-23页
    1.2 Ω -3 多不饱和脂肪酸第23-27页
        1.2.1 Ω -3 PUFA与NAFLD第23-25页
        1.2.2 Ω -3 PUFA与线粒体磷脂及其脂肪酸第25-27页
        1.2.3 Ω -3 PUFA与线粒体ROS第27页
    1.3 立题依据与研究内容第27-28页
2 材料与方法第28-42页
    2.1 主要试剂与仪器第28-30页
    2.2 主要溶液的配制第30-31页
    2.3 动物实验第31-34页
        2.3.1 实验动物饲养第31-32页
        2.3.2 血液样品及肝组织采集第32页
        2.3.3 血清TG、TCH、HDLC、LDLC浓度测定第32-33页
        2.3.4 血清ALT、AST及GST、SOD活力测定第33页
        2.3.5 动物肝脏组织学分析第33页
        2.3.6 动物饲料脂肪酸成分测定第33-34页
    2.4 细胞实验第34-41页
        2.4.1 细胞培养第34页
        2.4.2 细胞实验分组第34-35页
        2.4.3 细胞增殖活性测量第35页
        2.4.4 线粒体DNA数量测定第35页
        2.4.5 总DNA提取第35-36页
        2.4.6 RNA提取第36页
        2.4.7 引物设计第36-37页
        2.4.8 实时定量PCR检测基因转录水平第37页
        2.4.9 BCA法测定蛋白浓度第37-38页
        2.4.10 细胞内活性氧自由基生成量测定第38页
        2.4.11 线粒体膜电位Δ Ψ 测定第38-39页
        2.4.12 细胞内GSH水平及SOD活力测定第39页
        2.4.13 双染色流式细胞术测定细胞凋亡率第39页
        2.4.14 蛋白印迹实验检测蛋白质表达第39-41页
        2.4.15 线粒体分离、磷脂提取及纯化第41页
        2.4.16 气相色谱法测定线粒体膜磷脂及饲料油脂脂肪酸组成第41页
    2.5 数据分析及统计第41-42页
3 结果与分析第42-64页
    3.1 动物体重、肝重及肝脏形态第42-46页
        3.1.1 体重、肝重第42-43页
        3.1.2 肝脏形态及外观第43-46页
    3.2 血清生化指标第46-49页
        3.2.1 血清中TG、TC、LDL-C及HDL-C浓度变化第46页
        3.2.2 ALT及AST活力第46-47页
        3.2.3 GST及SOD活力第47-49页
    3.3 动物饲料脂肪酸组成第49-50页
    3.4 Ω -3 PUFA及棕榈酸对肝细胞增殖活性的影响第50-51页
        3.4.1 高浓度棕榈酸对细胞活性的影响第50页
        3.4.2 Ω -3 多不饱和脂肪酸缓解高脂负荷压力对肝细胞活力的损伤第50-51页
    3.5 不同PUFA干预后细胞凋亡率第51-53页
    3.6 Ω -3 PUFA缓解细胞内ROS的生成第53-55页
    3.7 细胞内线粒体数量的变化第55-56页
    3.8 Ω -3 PUFA对线粒体膜电位崩解的缓解作用第56-58页
    3.9 Ω -3 PUFA干预后细胞内GSH水平和SOD活力第58-59页
    3.10 PUFA处理后基因转录变化第59-60页
    3.11 PUFA干预后基因表达量第60-62页
    3.12 PUFA孵育后线粒体膜磷脂脂肪酸组成的变化第62-64页
4 讨论第64-68页
    4.1 动物实验结论第64页
    4.2 细胞实验结论第64-66页
    4.3 总结与讨论第66-68页
参考文献第68-80页
致谢第80页

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