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日本七鳃鳗Btk的原核表达、抗体制备及相关免疫学研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 绪论第8-17页
    1.1 Btk的结构第8页
    1.2 Btk与其它物种序列的相似性第8-9页
    1.3 Btk在适应性免疫中主要参与B细胞信号通路第9-14页
        1.3.1 B细胞受体激活Btk的机制第11页
        1.3.2 Btk活性的抑制第11-12页
        1.3.3 Btk活化的下游分子第12-13页
        1.3.4 Btk活化的多样性第13-14页
    1.4 Btk与先天性免疫的关系第14-15页
        1.4.1 Btk在巨噬细胞中的作用第14页
        1.4.2 Btk在肥大细胞中的作用第14-15页
        1.4.3 Btk在树突细胞中的功能第15页
    1.5 Btk与Toll样受体第15页
    1.6 BTK突变与X连锁的丙种球蛋白缺乏症(XLA)第15-16页
    1.7 意义第16-17页
2 日本七鳃鳗Btk分子的原核表达、蛋白纯化及多克隆抗体的制备第17-36页
    2.1 日本七鳃鳗Btk的原核表达及重组蛋白纯化第17-27页
        2.1.1 材料第17页
        2.1.2 方法第17-25页
        2.1.3 结果第25-27页
    2.2 兔抗日本七鳃鳗Btk多克隆抗体的制备及鉴定第27-34页
        2.2.1 材料第27-28页
        2.2.2 方法第28-31页
        2.2.3 结果第31-34页
    2.3 讨论第34页
    2.4 小结第34-36页
3 日本七鳃鳗BTK Real-time PCR分析第36-42页
    3.1 材料第36-37页
        3.1.1 主要试剂第36页
        3.1.2 主要仪器第36-37页
    3.2 方法第37-39页
        3.2.1 日本七鳃鳗刺激方案第37页
        3.2.2 日本七鳃鳗白细胞及其组织的分离第37页
        3.2.3 日本七鳃鳗白细胞总RNA及各组织总RNA的提取第37-38页
        3.2.4 RNA质量检测第38页
        3.2.5 Real-time PCR法检测BTK mRNA的相对表达量第38-39页
        3.2.6 统计学分析第39页
    3.3 结果第39-40页
    3.4 讨论第40-41页
    3.5 小结第41-42页
4 Btk蛋白的Western blot及流式细胞分析(FACS)第42-48页
    4.1 Western blot分析Btk蛋白的表达第42-43页
        4.1.1 材料第42页
        4.1.2 方法第42页
        4.1.3 结果第42-43页
    4.2 流式细胞分析Btk在白细胞中的表达第43-46页
        4.2.1 材料第43-44页
        4.2.2 方法第44页
        4.2.3 结果第44-46页
    4.3 讨论第46-47页
    4.4 小结第47-48页
结论第48-49页
本论文的创新点第49-50页
参考文献第50-54页
附录A 日本七鳃鳗Btk蛋白的C端激酶结构域的编码区第54-55页
附录B Real-time PCR中管家基因GAPDH和目的基因BTK的标准曲线第55-56页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第56-57页
致谢第57页

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