摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 绪论 | 第8-17页 |
1.1 Btk的结构 | 第8页 |
1.2 Btk与其它物种序列的相似性 | 第8-9页 |
1.3 Btk在适应性免疫中主要参与B细胞信号通路 | 第9-14页 |
1.3.1 B细胞受体激活Btk的机制 | 第11页 |
1.3.2 Btk活性的抑制 | 第11-12页 |
1.3.3 Btk活化的下游分子 | 第12-13页 |
1.3.4 Btk活化的多样性 | 第13-14页 |
1.4 Btk与先天性免疫的关系 | 第14-15页 |
1.4.1 Btk在巨噬细胞中的作用 | 第14页 |
1.4.2 Btk在肥大细胞中的作用 | 第14-15页 |
1.4.3 Btk在树突细胞中的功能 | 第15页 |
1.5 Btk与Toll样受体 | 第15页 |
1.6 BTK突变与X连锁的丙种球蛋白缺乏症(XLA) | 第15-16页 |
1.7 意义 | 第16-17页 |
2 日本七鳃鳗Btk分子的原核表达、蛋白纯化及多克隆抗体的制备 | 第17-36页 |
2.1 日本七鳃鳗Btk的原核表达及重组蛋白纯化 | 第17-27页 |
2.1.1 材料 | 第17页 |
2.1.2 方法 | 第17-25页 |
2.1.3 结果 | 第25-27页 |
2.2 兔抗日本七鳃鳗Btk多克隆抗体的制备及鉴定 | 第27-34页 |
2.2.1 材料 | 第27-28页 |
2.2.2 方法 | 第28-31页 |
2.2.3 结果 | 第31-34页 |
2.3 讨论 | 第34页 |
2.4 小结 | 第34-36页 |
3 日本七鳃鳗BTK Real-time PCR分析 | 第36-42页 |
3.1 材料 | 第36-37页 |
3.1.1 主要试剂 | 第36页 |
3.1.2 主要仪器 | 第36-37页 |
3.2 方法 | 第37-39页 |
3.2.1 日本七鳃鳗刺激方案 | 第37页 |
3.2.2 日本七鳃鳗白细胞及其组织的分离 | 第37页 |
3.2.3 日本七鳃鳗白细胞总RNA及各组织总RNA的提取 | 第37-38页 |
3.2.4 RNA质量检测 | 第38页 |
3.2.5 Real-time PCR法检测BTK mRNA的相对表达量 | 第38-39页 |
3.2.6 统计学分析 | 第39页 |
3.3 结果 | 第39-40页 |
3.4 讨论 | 第40-41页 |
3.5 小结 | 第41-42页 |
4 Btk蛋白的Western blot及流式细胞分析(FACS) | 第42-48页 |
4.1 Western blot分析Btk蛋白的表达 | 第42-43页 |
4.1.1 材料 | 第42页 |
4.1.2 方法 | 第42页 |
4.1.3 结果 | 第42-43页 |
4.2 流式细胞分析Btk在白细胞中的表达 | 第43-46页 |
4.2.1 材料 | 第43-44页 |
4.2.2 方法 | 第44页 |
4.2.3 结果 | 第44-46页 |
4.3 讨论 | 第46-47页 |
4.4 小结 | 第47-48页 |
结论 | 第48-49页 |
本论文的创新点 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
附录A 日本七鳃鳗Btk蛋白的C端激酶结构域的编码区 | 第54-55页 |
附录B Real-time PCR中管家基因GAPDH和目的基因BTK的标准曲线 | 第55-56页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |