摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
前言 | 第11-16页 |
参考文献 | 第14-16页 |
第一部分 CPNE1蛋白在肺腺癌组织中的表达及临床意义 | 第16-24页 |
1 材料与方法 | 第16-19页 |
一、实验材料 | 第16-17页 |
二、实验方法 | 第17-19页 |
2 实验结果 | 第19-21页 |
3 讨论 | 第21-23页 |
小结 | 第23-24页 |
第二部分 沉默CPNE1基因稳转细胞系建立后效果鉴定 | 第24-38页 |
1 材料和方法 | 第24-33页 |
一、实验材料 | 第24-27页 |
二、实验方法 | 第27-28页 |
三、荧光显微镜观察 | 第28页 |
四、肺腺癌细胞中CPNE1 mRNA检测(Real-time PCR) | 第28-30页 |
五、肺腺癌细胞中CPNE1蛋白检测(Western Blot方法) | 第30-33页 |
六、统计学方法 | 第33页 |
2 结果 | 第33-36页 |
一、Western Blot检测各肺癌细胞与未分化支气管上皮细胞中CPNE1的表达 | 第33页 |
二、荧光显微镜下检测下调CPNE1基因后在肺腺癌细胞株中的转染效率 | 第33-34页 |
三、RT-PCR方法检测下调CPNE1基因后在肺腺癌细胞株中CPNE1 mRNA的表达 | 第34-35页 |
四、Western Blot方法检测下调CPNE1基因后在肺腺癌细胞株中CPNE1蛋白的表达 | 第35-36页 |
3 讨论 | 第36-37页 |
小结 | 第37-38页 |
第三部分 慢病毒介导的CPNE1-SHRNA对肺腺癌细胞抑制作用的体外研究 | 第38-53页 |
1 材料与方法 | 第38-42页 |
1 材料 | 第38-39页 |
2 方法 | 第39-42页 |
2 结果 | 第42-50页 |
2.1 CPNE1表达下调后对A549、H1299细胞增殖能力的影响 | 第42-43页 |
2.2 CPNE1表达下调后对A549、H1299细胞克隆形成能力的影响 | 第43-44页 |
2.3 CPNE1表达下调后对A549、H1299细胞转移能力的影响 | 第44页 |
2.4 CPNE1表达下调后Transwell检测A549、H1299细胞迁移能力的改变 | 第44-47页 |
2.5 流式细胞分析A549、H1299细胞周期变化 | 第47页 |
2.6 CPNE1干扰后对A549、H1299细胞中相关蛋白表达的影响 | 第47-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
小结 | 第52-53页 |
第四部分 慢病毒介导的CPNE1-SHRNA对肺腺癌细胞抑制作用的体内研究 | 第53-61页 |
材料和方法 | 第53-55页 |
1、材料 | 第53页 |
2、方法 | 第53-55页 |
2 结果 | 第55-58页 |
1、裸鼠及移植瘤生长的监测 | 第55页 |
2、移植瘤体积大小的比较 | 第55-58页 |
3 讨论 | 第58-60页 |
小结 | 第60-61页 |
全文总结 | 第61-62页 |
问题与展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
综述 RNA干扰技术及其在肺癌研究中的应用 | 第69-79页 |
参考文献 | 第74-79页 |
英文缩略词表(ABBREVIATION) | 第79-81页 |
攻读学位期间已发表的学术论文 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |