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伤寒沙门菌mig-14基因表达特性研究

摘要第5-8页
Abstract第8-11页
英文缩写索引第14-15页
1 绪论第15-19页
    1.1 伤寒沙门菌简介第15-16页
    1.2 水平获得的外来基因简介第16页
    1.3 mig-14 基因简介第16-19页
2 研究目的、研究方案、技术路线、材料方法第19-49页
    2.1 研究目的第19页
    2.2 研究方案第19-20页
    2.3 技术路线第20-22页
        2.3.1 探索mig-14 普通培养条件下低表达的机制第20-21页
        2.3.2 探索mig-14 在PB刺激下的表达机制第21页
        2.3.3 IHF 与 Mig-14 对 SPI-1 的调控作用关系第21-22页
    2.4 实验材料第22-31页
        2.4.1 菌株与质粒第22-23页
        2.4.2 主要试剂及材料第23页
        2.4.3 主要溶液第23-30页
        2.4.4 主要仪器第30-31页
    2.5 实验方法第31-49页
        2.5.1 伤寒沙门菌基因缺失变异株的制备第31-38页
        2.5.2 实时定量PCR检测mig-14 mRNA水平第38-41页
        2.5.3 mig-14 的lacZ基因融合实验第41-43页
        2.5.4 Western blot免疫印迹法检测Mig-14 表达水平第43-44页
        2.5.5 蛋白表达第44-46页
        2.5.6 凝胶阻滞实验(EMSA)第46-47页
        2.5.7 高渗早期IHF(HimA/Him D)对mig-14 及SPI-1 的影响第47-49页
3 实验结果第49-71页
    3.1 沉默蛋白HNS、Hha、YdgT在体外普通培养条件下抑制mig-14 的转录表达第49-58页
        3.1.1 伤寒沙门菌hns、hha、ydgT缺陷变异株的制备第49-53页
        3.1.2 伤寒沙门菌hns高表达株的构建第53-55页
        3.1.3 qRT-PCR检测mig-14 mRNA水平第55-56页
        3.1.4 沉默蛋白HNS能直接作用于mig-14 启动子第56-58页
    3.2 PB刺激下mig-14 的激活依赖调节因子Fis、HilD、IHF、OmpR第58-62页
        3.2.1 伤寒沙门菌hilD、himA、himD缺陷变异株的制备第58-59页
        3.2.2 PB刺激下各菌株中mig-14 mRNA水平第59-60页
        3.2.3 Western blot免疫印迹法检测PB刺激下各菌株中Mig-14 表达水平第60-61页
        3.2.4 lacZ报告基因融合实验第61-62页
    3.3 高渗早期宿主整合因子(IHF)激活mig-14 的转录表达可增强对SPI-1的调节第62-71页
        3.3.3 IHF的α亚基HimA能与mig-14 启动子区域结合第65-67页
        3.3.4 高渗早期IHF激活iagA的转录第67-69页
        3.3.5 高渗早期Mig-14 对iagA的激活依赖IHF第69-71页
4 讨论第71-75页
5 主要结论及展望第75-76页
    5.1 主要结论第75页
    5.2 展望第75-76页
参考文献第76-82页
致谢第82-83页
攻读硕士学位期间发表的文章第83页

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