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利用cDNA-AFLP技术分离玉米盐胁迫响应相关基因

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
符号说明第7-12页
第一章 文献综述第12-22页
    1.1 导入系对盐胁迫的生理响应第13-14页
        1.1.1 植物形态指标对盐胁迫的响应第13页
        1.1.2 植物生理特性对盐胁迫的响应第13-14页
    1.2 植物的抗盐的生理机制第14-17页
        1.2.1 植物的耐渗透调节第14-15页
        1.2.2 植物的耐离子调节第15-16页
        1.2.3 抗氧化防御系统第16页
        1.2.4 植物激素调节第16-17页
    1.3 植物抗盐的分子机制第17-19页
        1.3.1 离子区域化第17-18页
        1.3.2 渗透调节第18页
        1.3.3 抗氧化防御机制第18-19页
    1.4 CDNA-AFLP技术第19-20页
        1.4.1 cDNA-AFLP技术原理第19页
        1.4.2 cDNA-AFLP技术在差异表达研究中的应用第19-20页
    1.5 研究目的与意义第20-21页
    1.6 技术路线第21-22页
第二章 导入系对盐胁迫的生理响应第22-32页
    2.1 供试材料第22页
    2.2 试验设计第22页
    2.3 测定项目及方法第22-23页
        2.3.1 形态指标的测定第22页
        2.3.2 生理指标的测定第22-23页
    2.4 数据分析第23页
    2.5 结果与分析第23-29页
        2.5.1 盐胁迫对3个玉米自交系形态的影响第23-24页
        2.5.2 盐胁迫对3个玉米自交系叶片叶绿素含量和Pn的影响第24-25页
        2.5.3 盐胁迫对3个玉米自交系叶片电导率、MDA、可溶性蛋白及抗氧化酶活性的影响第25-26页
        2.5.4 耐盐指标的相关性分析和方差分析第26-27页
        2.5.5 3个玉米自交系耐盐指标间主成分分析第27-28页
        2.5.6 隶属函数分析第28-29页
    2.6 讨论第29-31页
    2.7 小结第31-32页
第三章 玉米苗期盐胁迫CDNA-AFLP分析第32-58页
    3.1 试验材料第32页
    3.2 盐胁迫处理第32页
    3.3 试验方法第32-41页
        3.3.1 总RNA的提取第32-33页
        3.3.2 双链cDNA的合成第33-34页
            3.3.2.1 第一链cDNA的合成第33页
            3.3.2.2 双链cDNA的合成第33-34页
        3.3.3 双链cDNA酶切及接头连接第34-35页
            3.3.3.1 酶切第34页
            3.3.3.2 接头的连接第34-35页
        3.3.4 预扩增第35页
        3.3.5 选择性扩增第35-36页
        3.3.6 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第36-38页
            3.3.6.1 电泳长、短板的准备及组装第36-37页
            3.3.6.2 聚丙烯酰胺凝胶的制备及灌胶第37页
            3.3.6.3 扩增产物聚丙烯酰胺凝胶电泳第37-38页
            3.3.6.4 银染染色过程第38页
        3.3.7 耐盐差异片段的回收与测序第38-40页
            3.3.7.1 差异片段的回收第38页
            3.3.7.2 再次PCR第38-39页
            3.3.7.3 差异片段的琼脂糖回收第39页
            3.3.7.4 差异片段与T载体的连接第39-40页
            3.3.7.5 差异片段连接产物的平板转化第40页
            3.3.7.6 菌液PCR阳性检测第40页
            3.3.7.7 测序结果分析第40页
        3.3.8 差异片段的Real-time qRT-PCR第40-41页
    3.4 结果分析第41-55页
        3.4.1 RNA的提取第41-42页
        3.4.2 cDNA合成第42-43页
            3.4.2.1 cDNA单链检测第42页
            3.4.2.2 双链cDNA检测第42-43页
        3.4.3 双链cDNA双酶切第43页
        3.4.4 预扩增检测第43-44页
        3.4.5 选择性扩增检测第44页
        3.4.6 不同浓度盐胁迫下玉米的cDNA-AFLP差异表达分析第44-45页
        3.4.7 盐胁迫相关TDF的分类第45-47页
        3.4.8 玉米耐盐相关TDFs的回收测序第47-49页
            3.4.8.1 差异片段的回收第47页
            3.4.8.2 再次PCR第47-48页
            3.4.8.3 DNA琼脂糖检测第48页
            3.4.8.4 阳性菌的检测第48-49页
        3.4.9 TDFs的功能注释第49-54页
        3.4.10 部分差异条带qRT-PCR分析第54-55页
    3.5 讨论第55-57页
        3.5.1 玉米盐响应相关基因的生物学意义第55-57页
            3.5.1.1 信号转导第55-56页
            3.5.1.2 胁迫响应第56页
            3.5.1.3 转录因子第56-57页
    3.6 小结第57-58页
第四章结论第58-60页
    4.1 3个玉米自交系耐盐性评价第58页
    4.2 盐胁迫相关基因的CDNA-AFLP分析第58-60页
参考文献第60-72页
致谢第72-73页
作者简介第73页

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