| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-28页 |
| 1.1 蓖麻毒素研究背景 | 第15-22页 |
| 1.1.1 蓖麻毒素的理化性质与结构 | 第15-16页 |
| 1.1.2 蓖麻毒素的危害与毒性作用 | 第16-18页 |
| 1.1.3 蓖麻毒素的应用 | 第18-20页 |
| 1.1.4 蓖麻毒素的检测 | 第20-22页 |
| 1.2 生物质谱技术 | 第22-26页 |
| 1.2.1 电喷雾质谱 | 第22-23页 |
| 1.2.2 基质辅助激光解吸质谱 | 第23页 |
| 1.2.3 生物质谱技术在蛋白质分析中的应用 | 第23-26页 |
| 1.3 金属螯合纳米磁珠提取技术 | 第26-27页 |
| 1.3.1 金属螯合纳米磁珠提取技术原理 | 第26-27页 |
| 1.3.2 金属螯合纳米磁珠提取技术的应用 | 第27页 |
| 1.4 本论文研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章 蓖麻毒素结构确证 | 第28-44页 |
| 2.1 材料 | 第28-31页 |
| 2.1.1 试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.2 溶液配制 | 第29-30页 |
| 2.1.3 仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.4 分析软件 | 第31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-34页 |
| 2.2.1 蓖麻毒素蛋白定量 | 第31页 |
| 2.2.2 蓖麻毒素完整分子量测定 | 第31页 |
| 2.2.3 MALDI-TOF-MS 检测蓖麻毒素 A 链、B 链肽指纹谱 | 第31-33页 |
| 2.2.3.1 SDS-PAGE 法分离 A 链、B 链 | 第31-32页 |
| 2.2.3.2 胶内酶切 | 第32页 |
| 2.2.3.3 酶切后肽段提取 | 第32页 |
| 2.2.3.4 样品脱盐 | 第32-33页 |
| 2.2.3.5 A 链、B 链肽指纹谱检测 | 第33页 |
| 2.2.4 UPLC-MS/MS 检测蓖麻毒素溶液酶切后肽段 | 第33-34页 |
| 2.2.4.1 蓖麻毒素溶液酶切 | 第33页 |
| 2.2.4.2 样品制备 | 第33页 |
| 2.2.4.3 液相色谱分离条件 | 第33-34页 |
| 2.2.4.4 四级杆-飞行时间串联质谱参数设置 | 第34页 |
| 2.2.5 数据分析 | 第34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-43页 |
| 2.3.1 蓖麻毒素定量结果 | 第34-35页 |
| 2.3.2 蓖麻毒素的完整分子量 | 第35页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE 分离蓖麻毒素结果 | 第35-36页 |
| 2.3.4 MALDI-TOF-MS 检测蓖麻毒素 A 链、B 链肽指纹图结果 | 第36-37页 |
| 2.3.5 nanoUPLC-ESI-TOF-MS/MS 检测酶酶切蓖麻毒素肽段结果 | 第37-43页 |
| 2.3.5.1 蓖麻毒素酶切总离子流图 | 第37-38页 |
| 2.3.5.2 蓖麻毒素理论序列 | 第38-39页 |
| 2.3.5.3 检测酶切蓖麻毒素肽段覆盖率 | 第39-42页 |
| 2.3.5.4 蓖麻毒素重要特征肽段序列分析检测 | 第42-43页 |
| 2.4 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 铜螯合纳米磁珠结合 MALDI-TOF MS 质谱分析鉴定血清中蓖麻毒素 | 第44-62页 |
| 3.1 材料 | 第45-46页 |
| 3.1.1 试剂 | 第45页 |
| 3.1.2 溶液配制 | 第45-46页 |
| 3.1.3 仪器 | 第46页 |
| 3.1.4 分析软件 | 第46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-49页 |
| 3.2.1 蛋白酶解变性剂对酶解效率的影响 | 第46页 |
| 3.2.2 蓖麻毒素快速酶切 | 第46-47页 |
| 3.2.3 铜螯合纳米磁珠提取蓖麻毒素酶切溶液 | 第47页 |
| 3.2.4 铜螯合纳米磁珠提取酶切蓖麻毒素溶液质谱检测 | 第47页 |
| 3.2.5 血清蛋白质快速酶切 | 第47-48页 |
| 3.2.6 铜螯合纳米磁珠提取血清蛋白酶切溶液 | 第48页 |
| 3.2.7 铜螯合纳米磁珠提取血清蛋白酶切溶液质谱检测 | 第48页 |
| 3.2.8 重复性试验 | 第48页 |
| 3.2.9 铜螯合纳米磁珠提取蓖麻毒素酶切后特征肽段灵敏度 | 第48页 |
| 3.2.10 磁珠提取结合 MALDI-TOF-MS 方法蓖麻毒素检出限 | 第48页 |
| 3.2.11 磁珠提取结合 MALDI-TOF-MS 方法在破伤风毒素检测中的应用 | 第48-49页 |
| 3.3 实验结果 | 第49-60页 |
| 3.3.1 蛋白酶解变性剂对酶解效率的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.2 铜螯合纳米磁珠提取蓖麻毒素特征肽段结果 | 第50-52页 |
| 3.3.3 铜螯合纳米磁珠提取血清酶切肽段结果 | 第52-54页 |
| 3.3.4 蓖麻毒素特征肽段挑选 | 第54-56页 |
| 3.3.5 铜螯合纳米磁珠富集标志肽段结果 | 第56页 |
| 3.3.6 方法重复性 | 第56-57页 |
| 3.3.7 铜螯合纳米磁珠结合 MALDI-TOF-MS 法分析水溶液中蓖麻毒素检测限 | 第57-58页 |
| 3.3.8 铜螯合纳米磁珠结合 MALDI-TOF MS 法分析血清中蓖麻毒素的检测限 | 第58-59页 |
| 3.3.9 磁珠结合 MALDI-TOF-MS 方法在破伤风毒素检测中的应用 | 第59-60页 |
| 3.4 小结 | 第60-62页 |
| 第四章 结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-75页 |
| 作者简介及在学期间所获科研成果 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
