| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-26页 |
| ·发根农杆菌 | 第13-15页 |
| ·发根农杆菌的生物学特性与分类 | 第13页 |
| ·Ri 质粒的结构和功能 | 第13-15页 |
| ·毛状根诱导的分子机制 | 第15页 |
| ·毛状根诱导及培养方法 | 第15-18页 |
| ·利用Ri 质粒转移外源基因的方法 | 第15页 |
| ·毛状根的增殖培养 | 第15-16页 |
| ·通过毛状根获得再生植株的方法 | 第16页 |
| ·毛状根及转化植株的鉴定 | 第16页 |
| ·发根农杆菌介导基因转化的影响因素 | 第16-18页 |
| ·毛状根的特征及应用 | 第18-19页 |
| ·毛状根的特征 | 第18页 |
| ·毛状根的应用 | 第18-19页 |
| ·棉花转基因研究现状 | 第19-21页 |
| ·MYB 转录因子的研究进展 | 第21-23页 |
| ·MYB 转录因子的结构特征和分类 | 第21-22页 |
| ·MYB 类转录因子的生物学功能 | 第22-23页 |
| ·棉花抗毒菌素—棉酚的应用 | 第23-24页 |
| ·医学应用 | 第23-24页 |
| ·工业应用 | 第24页 |
| ·农业应用 | 第24页 |
| ·研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 棉花毛状根的获得及再生植株体系的建立 | 第26-46页 |
| ·实验材料 | 第26-30页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌种 | 第26页 |
| ·酶与试剂 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-32页 |
| ·发根农杆菌的培养 | 第30页 |
| ·野生型发根农杆菌Ri 质粒的分子鉴定 | 第30页 |
| ·棉花无菌苗的培养及其培养条件 | 第30-31页 |
| ·无菌条件下棉花毛状根诱导体系的建立 | 第31页 |
| ·不同菌种对不同棉花品种的致根能力和获得毛状根的比较 | 第31页 |
| ·不同外植体的获得棉花毛状根的比较 | 第31页 |
| ·不同培养基成分对棉花毛状根诱导的比较 | 第31页 |
| ·棉花毛状根的固体培养 | 第31页 |
| ·棉花毛状根的液体培养 | 第31页 |
| ·土培法获得棉花毛状根 | 第31-32页 |
| ·棉花毛状根再生植株体系的建立 | 第32页 |
| ·CTAB 法提取棉花毛状根基因组DNA | 第32页 |
| ·rol 基因的PCR 检测 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-42页 |
| ·无菌条件下棉花毛状根体系的建立 | 第32-33页 |
| ·不同菌种对不同棉花品种的致根能力比较 | 第33-35页 |
| ·不同外植体的获得棉花毛状根的比较 | 第35-36页 |
| ·外植体苗龄对棉花毛状根诱导的影响 | 第36页 |
| ·诱导发根培养基的优化 | 第36-37页 |
| ·棉花毛状根的分子检测 | 第37-40页 |
| ·棉花毛状根的液体培养 | 第40页 |
| ·土培法获得棉花毛状根 | 第40-41页 |
| ·棉花毛状根再生植株的体系建立 | 第41页 |
| ·再生植株转化rol 基因的PCR 检测 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·棉花基因型对转化Ri 质粒T-DNA 的影响 | 第42-43页 |
| ·不同发根农杆菌对棉花的致根能力 | 第43页 |
| ·不同外植体对毛状根获得的影响 | 第43页 |
| ·棉花苗龄对毛状根诱导的影响 | 第43页 |
| ·培养基成分对棉花毛状根诱导的影响 | 第43-44页 |
| ·棉花毛状根的固体培养和液体培养 | 第44页 |
| ·土培法的优缺点 | 第44页 |
| ·棉花毛状根再生植株过程中激素的影响 | 第44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| 第三章 转基因毛状根的获得 | 第46-64页 |
| ·实验材料 | 第46-48页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·菌种 | 第46页 |
| ·植物表达载体 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·酶与试剂 | 第46页 |
| ·试剂配制 | 第46-48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-53页 |
| ·质粒提取 | 第48-49页 |
| ·发根农杆菌感受态的制备与转化 | 第49页 |
| ·载体质粒DNA 电激转化感受态A4 发根农杆菌 | 第49页 |
| ·转化农杆菌阳性克隆的鉴定 | 第49-50页 |
| ·诱导转基因毛状根的获得 | 第50页 |
| ·转基因毛状根的抗性筛选 | 第50页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第50页 |
| ·转基因毛状根基因组DNA 的提取及PCR 检测 | 第50-51页 |
| ·转基因毛状根外源基因的 PCR southern-blot 检测 | 第51-52页 |
| ·生长曲线的测定 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-62页 |
| ·获得转外源基因的A4 菌 | 第53-54页 |
| ·转基因棉花毛状根的诱导 | 第54页 |
| ·转基因棉花毛状根的抗性筛选 | 第54页 |
| ·形态学观察 | 第54页 |
| ·转基因棉花毛状根的GUS 检测 | 第54-55页 |
| ·转基因毛状根基因组的PCR 结果 | 第55-58页 |
| ·转基因毛状根的Southern-blot 结果 | 第58-59页 |
| ·转基因毛状根的液体培养及生长曲线的测定 | 第59-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·转基因棉花毛状根的获得 | 第62页 |
| ·棉花毛状根的转基因率 | 第62-63页 |
| ·转基因棉花毛状根的液体培养 | 第63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第四章 结论与创新点 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |