| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·逆境和植物的抗逆性 | 第12页 |
| ·植物在非生物逆境下的应答反应 | 第12页 |
| ·植物抗逆性研究方法 | 第12-13页 |
| ·水稻抗逆相关基因的克隆和研究进展 | 第13-17页 |
| ·转录因子与非生物胁迫 | 第13-14页 |
| ·上游调控基因与非生物胁迫 | 第14-15页 |
| ·泛素化与非生物胁迫 | 第15-16页 |
| ·小RNA、表观遗传与非生物胁迫 | 第16-17页 |
| ·AP2/EREBP 转录因子研究进展 | 第17-19页 |
| ·AP2/EREBP 家族结构和分类 | 第17页 |
| ·ERF 类转录因子 | 第17-18页 |
| ·DREB/CBFs 转录因子 | 第18页 |
| ·ERFs 和DREBs 结合顺式作用元件的异同 | 第18-19页 |
| ·泛素化途径 | 第19-20页 |
| ·研究目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 AP2/EREBP 家族基因在非生物胁迫下表达差异的分析 | 第22-31页 |
| ·材料和方法 | 第22-26页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·水稻胁迫处理 | 第22-23页 |
| ·Real-time PCR 分析引物的设计 | 第23页 |
| ·RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·RNA 纯度的分析 | 第24页 |
| ·DNaseⅠ消化RNA 中的基因组DNA | 第24页 |
| ·反转录 | 第24-25页 |
| ·cDNA 浓度的调节和Real-time PCR 引物的效率分析 | 第25页 |
| ·Real-time PCR 分析 | 第25-26页 |
| ·数据分析方法 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-29页 |
| ·RNA 的纯度分析结果 | 第26页 |
| ·AP2/EREBP 转录因子基因在典型抗逆水稻品种胁迫前后的表达差异分析 | 第26-29页 |
| ·日本晴中OsASIE1 在低温、高盐和PEG 胁迫下的表达量变化谱 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 凝胶迁移率实验分析 | 第31-40页 |
| ·材料与方法 | 第31-36页 |
| ·PCR 扩増目的基因 | 第31页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第31页 |
| ·酶切连接和转化 | 第31-32页 |
| ·质粒的提取 | 第32页 |
| ·目的蛋白的制备 | 第32-34页 |
| ·目的DNA 序列及突变序列的制备 | 第34页 |
| ·EMSA 实验 | 第34-35页 |
| ·多序列比对和系统发育树分析 | 第35-36页 |
| ·结果和分析 | 第36-38页 |
| ·原核表达目的蛋白 | 第36页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第36页 |
| ·目的基因的AP2 结构域对GCC box 和DRE 的结合分析 | 第36-37页 |
| ·水稻和拟南芥中OsASIE1 同源EREBP 转录因子的系统比较分析 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 表达载体的构建和遗传转化 | 第40-50页 |
| ·材料与方法 | 第40-45页 |
| ·水稻材料 | 第40页 |
| ·培养基制备 | 第40页 |
| ·RNA 的提取、DNaseⅠ消化基因组DNA 和反转录 | 第40页 |
| ·PCR 扩增目的基因、PCR 产物的回收、酶切连接转化和质粒提取 | 第40页 |
| ·gateway 技术构建载体 | 第40-41页 |
| ·超表达载体构建 | 第41页 |
| ·RNA 干扰载体的构建 | 第41-42页 |
| ·遗传转化 | 第42-44页 |
| ·转基因植株表型的鉴定 | 第44-45页 |
| ·序列比对和基因编码蛋白结构分析 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-48页 |
| ·表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·目的基因序列的分析 | 第46页 |
| ·转基因植株的获得 | 第46-47页 |
| ·PCR 验证转基因阳性植株 | 第47-48页 |
| ·在水稻中超表达OsASIE1 能够改善水稻耐盐胁迫的能力 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录Ⅰ 入门克隆载体图谱 | 第57-58页 |
| 附录Ⅱ RNA干扰载体图谱 | 第58-59页 |
| 附录Ⅲ 超表达载体图谱 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
