| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 第1章 前言 | 第14-24页 |
| 1.1 miRNA-200c在肿瘤中的应用 | 第14-21页 |
| 1.1.1 miRNA概述 | 第14页 |
| 1.1.2 miRNAs家族简介 | 第14-16页 |
| 1.1.3 miRNA-200c与肿瘤诊断 | 第16-17页 |
| 1.1.4 miRNA-200c与肿瘤耐药 | 第17-19页 |
| 1.1.5 miRNA-200c与肿瘤转移 | 第19-20页 |
| 1.1.6 miRNA-200c的应用展望 | 第20-21页 |
| 1.2 肺癌及MTX耐药 | 第21-22页 |
| 1.2.1 肺癌 | 第21页 |
| 1.2.2 甲氨喋呤耐药 | 第21-22页 |
| 1.3 miRNA-200c与MTX耐药的关系 | 第22-23页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 1.4.1 目的 | 第23页 |
| 1.4.2 意义 | 第23-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-35页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第24-27页 |
| 2.1.1 材料 | 第24页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.3 常用溶液的配制 | 第25-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 A549/MTX细胞培养 | 第27页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第27页 |
| 2.2.3 细胞冻存 | 第27页 |
| 2.2.4 细胞复苏 | 第27-28页 |
| 2.2.5 耐药细胞诱导 | 第28页 |
| 2.2.6 四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测耐药指数(RI) | 第28-29页 |
| 2.2.7 细胞转染 | 第29-30页 |
| 2.2.8 细胞RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.9 cDNA第一链的合成 | 第31页 |
| 2.2.10 实时荧光定量RT-PCR | 第31-32页 |
| 2.2.11 细胞划痕实验 | 第32-33页 |
| 2.2.12 细胞transwell迁移实验 | 第33-34页 |
| 2.2.13 细胞transwell侵袭实验 | 第34页 |
| 2.3 统计学方法 | 第34-35页 |
| 第3章 实验结果 | 第35-41页 |
| 3.1 MTT法检测耐药细胞指数(RI) | 第35页 |
| 3.2 A549细胞在MTX诱导和miRNA-200c转染后的改变 | 第35-36页 |
| 3.2.1 A549细胞形态在MTX诱导后的改变 | 第35页 |
| 3.2.2 A549/MTX细胞形态在miRNA-200c转染后的改变 | 第35-36页 |
| 3.3 miRNA-200c在各组细胞中的表达情况 | 第36-37页 |
| 3.4 各组细胞迁移和侵袭能力情况 | 第37-39页 |
| 3.4.1 细胞划痕实验结果 | 第37-38页 |
| 3.4.2 细胞transwell迁移实验结果 | 第38页 |
| 3.4.3 细胞Transwell侵袭实验结果 | 第38-39页 |
| 3.5 转染miRNA-200c后A549/MTX细胞EZH2及E-cad表达量变化结果 | 第39-41页 |
| 第4章 讨论 | 第41-44页 |
| 第5章 结论 | 第44-46页 |
| 5.1 转染miRNA-200c能逆转A549/MTX细胞形态改变 | 第44页 |
| 5.2 转染miRNA-200c后A549/MTX细胞表达miRNA-200c增加 | 第44页 |
| 5.3 转染miRNA-200c后A549/MTX细胞的迁移和侵袭能力降低 | 第44-45页 |
| 5.4 转染miRNA-200c后A549/MTX细胞表达EZH2降低、E-cad升高 | 第45-46页 |
| 第6章 问题与展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
