| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第一章 RNA 聚合酶启动子和其介导 RNAi 的研究进展 | 第12-23页 |
| ·RNA 聚合酶启动子 | 第12-14页 |
| ·RNA Pol Ⅱ启动子 | 第12页 |
| ·RNA Pol Ⅲ启动子 | 第12-13页 |
| ·U6, H1, 7SK 三型 RNA Pol Ⅲ启动子 | 第13-14页 |
| ·RNA 干扰（RNAi） | 第14-18页 |
| ·内源性 RNAi 通路 | 第14-15页 |
| ·通过外源模拟 RNA 合成片段驾驭 RNAi 通路 | 第15-17页 |
| ·利用 RNA Pol Ⅲ启动子为 RNAi 服务 | 第17页 |
| ·RNA 聚合酶启动子驱动的 RNAi 技术应用进展 | 第17-18页 |
| ·利用 RNA 聚合酶启动子的慢病毒 RNAi 载体的研究进展 | 第18-22页 |
| ·慢病毒的结构特点 | 第18-19页 |
| ·慢病毒毒载体的构建原理 | 第19-20页 |
| ·慢病毒载体的应用前景 | 第20-22页 |
| ·小结和展望 | 第22页 |
| ·研究目的 | 第22-23页 |
| 第二章 鸡 7SK 启动子核心序列、小鼠 U6 启动子的克隆、序列测定和 RNA 干扰载体的构建 | 第23-35页 |
| ·材料和方法 | 第23-29页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-29页 |
| ·结果 | 第29-34页 |
| ·鸡血红细胞基因组提取后 1%琼脂糖凝胶电泳图像 | 第29页 |
| ·启动子分子克隆后 1%琼脂糖凝胶电泳图像 | 第29-30页 |
| ·鸡 7SK 启动子的生物信息学分析 | 第30-33页 |
| ·小鼠 U6 启动子的生物信息学分析 | 第33页 |
| ·pch7sk-shEGFP1/2，pmU6-shEGFP1/2 RNA 干扰载体的酶切鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第三章 慢病毒介导稳定表达 EGFP 的 DF-EGFP 和 Vero-EGFP 细胞建立 | 第35-41页 |
| ·材料和方法 | 第35-36页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-36页 |
| ·结果 | 第36-39页 |
| ·梯度稀释法复核慢病毒滴度结果 | 第36页 |
| ·经嘌呤霉素筛选后的 DF-EGFP 和 Vero-EGFP 细胞 | 第36-37页 |
| ·流式细胞术分析结果 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第四章 在 DF-EGFP 和 Vero-EGFP 细胞上分别评价鸡 7SK 和小鼠 U6 启动子的表达shRNA 效率 | 第41-52页 |
| ·材料和方法 | 第41-45页 |
| ·主要材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-45页 |
| ·结果 | 第45-50页 |
| ·不同条件转染后荧光显微镜下观察 DF-EGFP 的绿色荧光蛋白表达情况 | 第45-46页 |
| ·流式细胞术检测 EGFP 荧光平均强度 | 第46-48页 |
| ·RT-qPCR 检测 EGFP 基因相对表达情况 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50页 |
| ·小结 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 附表1 | 第58页 |
| 附表2 | 第58-59页 |
| 附表3 | 第59-60页 |
| 英文缩略表 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
