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原花青素和EGCG在Marc-145细胞中对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制作用研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
英文缩略词第7-10页
1 前言第10-18页
    1.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒及其危害第10-12页
    1.2 猪繁殖与呼吸综合征的防治技术第12-15页
        1.2.1 疫苗免疫第12-13页
        1.2.2 药物治疗第13-14页
        1.2.3 中药或中药单体抗PRRSV第14-15页
    1.3 原花青素、EGCG的研究概况第15-18页
        1.3.1 茶多酚的药理活性第15页
        1.3.2 EGCG的药理活性第15-16页
        1.3.3 原花青素的药理活性第16-18页
    1.4 本论文研究目的及意义第18页
2 材料与方法第18-27页
    2.1 主要药物与试剂第18-19页
    2.2 病毒与细胞株第19页
    2.3 主要仪器第19-20页
    2.4 常用试剂配制第20页
    2.5 方法第20-27页
        2.5.1 Marc-145细胞培养第20-21页
        2.5.2 PRRSV的扩增第21页
        2.5.3 PRRSV对Marc-145细胞的TCID50测定第21-22页
        2.5.4 CCK-8 法测定药物的细胞毒性第22页
        2.5.5 间接免疫荧光试验(IFA)筛选抗PRRSV活性药物第22页
        2.5.6 蛋白免疫印迹分析(Western blot)第22-23页
        2.5.7 实时荧光定量PCR检测 (Real-time PCR)第23-25页
        2.5.8 药物对PRRSV增殖的抑制作用试验第25-26页
        2.5.9 药物阻断PRRSV吸附Marc-145细胞试验第26页
        2.5.10 药物阻断PRRSV内化作用试验第26页
        2.5.11 药物与PRRSV直接作用试验第26页
        2.5.12 药物预处理细胞试验第26-27页
        2.5.13 药物抑制PRRSV大分子合成及病毒粒子组装试验第27页
        2.5.14 药物抑制PRRSV释放试验第27页
    2.6 试验数据处理第27页
        2.6.1 CPE判定标准第27页
        2.6.2 统计方法第27页
3 结果与分析第27-44页
    3.1 PRRSV对Marc-145细胞TCID50试验结果第27-28页
    3.2 抗PRRSV活性药物筛选试验结果第28-31页
    3.3 PC、EGCG对Marc-145细胞活力的影响第31-32页
    3.4 PC、EGCG对PRRSV增殖的抑制作用第32-36页
        3.4.1 PC、EGCG处理 48 h后对病毒增殖的抑制作用第32-35页
        3.4.2 PC、EGCG处理不同时间对PRRSV的抑制作用第35-36页
    3.5 PC、EGCG阻断PRRSV对Marc-145细胞的吸附第36-37页
    3.6 PC、EGCG阻断PRRSV的细胞内化第37-39页
    3.7 PC、EGCG对PRRSV的直接抑制作用第39-40页
    3.8 PC、EGCG处理不影响Marc-145细胞的PRRSV受体第40-41页
    3.9 PC、EGCG抑制PRRSV在Marc-145细胞中的合成及装配第41-42页
    3.10 PC、EGCG抑制PRRSV的释放第42-44页
4 讨论第44-47页
全文总结第47-48页
致谢第48-49页
参考文献第49-54页

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