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传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)侵染相关蛋白的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 文献综述第9-28页
 1 虹彩病毒第9-13页
   ·虹彩病毒概况第9-10页
   ·虹彩病毒分类第10-11页
   ·虹彩病毒的结构第11页
   ·肿大细胞病毒属第11-12页
   ·ISKNV 研究进展第12-13页
 2 窖蛋白家族的研究进展第13-20页
   ·窖蛋白(caveolin)第13-14页
   ·Caveolin 的结构第14-16页
   ·Caveolin 的功能第16-19页
   ·Caveolin-1 在病毒感染过程中的作用第19-20页
 3 病毒与宿主相互作用的研究方法第20-23页
   ·免疫共沉淀第21页
   ·酵母双杂交技术第21-22页
   ·病毒铺覆蛋白印迹技术第22页
   ·GST 亲和层析和 GST Pull-down 方法第22页
   ·荧光共振能量转移技术(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)第22-23页
 4 细胞骨架与病毒的关系第23-27页
   ·细胞骨架的组成第23-25页
   ·细胞骨架在病毒感染过程中的作用第25-27页
 5 本研究的目的与意义第27-28页
第二章 ISKNV 中与 MCAV-1 相互作用蛋白的筛选第28-58页
 1 引言第28页
 2 实验材料第28-35页
 3 实验方法第35-48页
 4 结果第48-55页
   ·目的基因的扩增第48-49页
   ·重组质粒的构建和鉴定第49页
   ·重组质粒的表达鉴定第49页
   ·重组质粒与 mCav-1 免疫共沉淀分析第49-50页
   ·MCP 与 mCav-1 蛋白的在转染细胞中的共定位分析第50-51页
   ·Myc-MCP 与 Flag-mCav-1 的免疫共沉淀分析第51-52页
   ·pGEX-4T-1-MCP 重组质粒的构建及原核表达第52-53页
   ·Pull-down 证明 MCP 与 mCav-1 之间的相互作用第53-55页
 5 讨论第55-56页
 6 小结第56-58页
第三章 MCP 与 MCAV-1 相互作用区域分析及其在 ISKNV 侵染过程中作用第58-80页
 1 引言第58页
 2 实验方法第58-67页
 3 结果第67-76页
   ·mCav-1 突变体真核质粒的构建第67-68页
   ·Western-blot 检验 mCav-1 突变体真核表达质粒的表达第68页
   ·MCP 与 mCav-1 相互作用区域的确定第68-70页
   ·ISKNV 感染感染早期,MFF-1 细胞中 MCP 与 mCav-1 的共迁移第70-72页
   ·ISKNV 感染早期 mCav-1 与 MCP 在 MFF-1 细胞中共定位第72-73页
   ·抑制 mCav-1 蛋白的表达阻碍 ISKNV 的入侵第73-75页
   ·稳定细胞系的筛选和感染第75-76页
 4 讨论第76-78页
 5 小结第78-80页
第四章 细胞骨架蛋白在 ISKNV 侵染中的作用第80-98页
 1 引言第80页
 2 实验方法第80-86页
 3 结果第86-95页
   ·Actin 和 microtubules 解聚药物对 MFF-1 细胞骨架的影响第86页
   ·Actin 解聚药物对 ISKNV 感染的影响第86-89页
   ·解聚 actin 影响 ISKNV 对 MFF-1 细胞的入侵第89-91页
   ·Actin 和 microtubules 解聚药物对 ISKNV 晚期阶段的影响第91-93页
   ·ISKNV 的 MCP 与 MFF-1 细胞的 actin 蛋白之间存在相互作用第93-94页
   ·Triton X-100 与 subtilisin 处理实验第94-95页
 4 讨论第95-97页
 5 小结第97-98页
全文总结第98-99页
参考文献第99-110页
附录 博士期间发表及待发表论文第110-111页
致谢第111-112页

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